Der Einfluss von Interleukin-10 auf Hepatitis C Virus-spezifische CD8+ T-Zellen:
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| adam_text | AUS DEM DEPARTMENT INNERE MEDIZIN
KLINIK FUER INNERE MEDIZIN II
(GASTROENTEROLOGIE, HEPATOLOGIE, ENDOKRINOLOGIE UND INFEKTIOLOGIE)
DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET FREIBURG IM BREISGAU
DER EINFLUSS VON LNTERLEUKIN-10 AUF HEPATITIS C
VIRUS-SPEZIFISCHE CD8
+
T-ZELLEN
I N A U G U RA L-DISSERTATION
ZUR
ERLANGUNG DES MEDIZINISCHEN DOKTORGRADES
DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET
DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET
FREIBURG I.BR.
VORGELEGT 2015
VON EMANUEL NIESEN,
GEBOREN IN GEROLSTEIN
HTTP://D-NB.INFO/1081952857
IV
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS IMMUNSYSTEM 1
1.1.1 DAS ANGEBORENE IMMUNSYSTEM 1
1.1.2 DAS ADAPTIVE IMMUNSYSTEM 2
1.1.3 T-LYMPHOZYTEN 3
1.1.4 CD8
+
T-ZELLEN 4
1.1.5 PRIMING VON CD8
+
T-ZELLEN 5
1.1.5.1 MD-DCS ALS APCS 6
1.1.6 CD8
+
T-ZELL KINETIK UND DIFFERENZIERUNG 7
1.2 DAS HEPATITIS-C-VIRUS 8
1.2.1 KLINISCHE ASPEKTE DER HCV-LNFEKTION 10
1.3 DAS IMMUNMODULATORISCHE ZYTOKIN IL-10 11
1.3.1 DIE WIRKUNG VON IL-10 AUF IMMUNZELLEN 12
1.3.2 PRODUKTION UND ROLLE VON IL-10 BEI CHRONISCHEN VIRALEN INFEKTIONEN
12
1.3.3 DIE ROLLE VON IL-10 IN DER HCV-LNFEKTION 14
1.4 DIE ROLLE VON CD8
+
T-ZELLEN IN DER HCV-LNFEKTION 16
1.4.1 PRIMING HCV-SPEZIFISCHER CD8
+
T-ZELLEN 18
1.4.2 DIFFERENZIERUNG HCV-SPEZIFISCHER CD8
+
T-ZELLEN 19
1.4.2.1 NAIVE HCV-SPEZIFISCHE CD8
+
T-ZELLEN 24
1.4.3 MECHANISMEN DES CD8
+
T-ZELL-VERSAGENS IN DER HCV-LNFEKTION 25
1.4.3.1 CD8
+
T-ZELL-ERSCHOEPFUNG 26
1.4.3.2 VIRALER ESCAPE 26
1.4.3.3 FEHLENDE CD4
+
T-ZELL-HILFE 26
1.4.3.4 REGULATORISCHE T-ZELLEN 27
1.4.3.5 IMMUNMODULATORISCHE ZYTOKINE 28
1.4.3.6 FEHLENDES/VERAENDERTES PRIMING VON CD8
+
T-ZELLEN 28
1.5 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 29
2 MATERIAL UND METHODEN 31
2.1 MATERIAL 31
2.1.1 GERAETE 31
2.1.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN 31
2.1.3 CHEMIKALIEN 32
2.1.4 PUFFER, MEDIEN, LOESUNGEN 33
2.1.5 BIOLOGIKA 34
V
2.1.6 REAGENZIENSAETZE 34
2.1.7 PEPTIDE 34
2.1.8 TETRAMERE 35
2.1.9 FLUORESZENZ-MARKIERTE ANTIKOERPER UND FAERBESUBSTANZEN 35
2.2 ZELLULAER-IMMUNOLOGISCHE METHODEN 36
2.2.1 ZELLKULTUR 36
2.2.2 ZELLZAHLBESTIMMUNG 37
2.2.3 KRYOKONSERVIERUNG VON ZELLEN 37
2.2.4 AUFTAUEN KRYOKONSERVIERTER ZELLEN 37
2.2.5 ISOLATION VON CD8
+
UND CD14
+
ZELLEN 37
2.2.6 PBSE-FAERBUNG 38
2.2.7 ANTIGEN-SPEZIFISCHE EXPANSION VON CD8
+
T-ZELLEN (CTL-KULTUR) 38
2.2.8 MODIFIZIERUNG DER CTL-KULTUR 39
2.2.9 GENERIERUNG VON MONOCYTE-DERIVED DENDRITIC CELLS (MD-DCS) 39
2.2.10 PRIMING-KOKULTUR 40
2.2.11 GRUNDLAGEN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 42
2.2.12 OBERFLAECHEN-FAERBUNG 43
2.2.13 CD8
+
T-ZELLEN 43
2.2.14 MD-DCS 44
2.2.15 HLA-A2-FAERBUNG 44
2.2.16 TETRAMER-FAERBUNG 45
2.2.17 FUNKTIONELLE, INTRAZELLULAERE ZYTOKIN-FAERBUNG 46
2.2.18 ANALYSE DER DATEN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 47
2.3 PATIENTEN 48
2.4 SOFTWARE 50
2.5 STATISTISCHE ANALYSEN 50
3 ERGEBNISSE 51
3.1 PRIMING NAIVER HCV-SPEZIFISCHER CD8
+
T-ZELLEN 51
3.1.1 EXPANSION 51
3.1.2 FUNKTIONALITAET 52
3.1.3 DIFFERENZIERUNG/PHAENOTYP 53
3.2 EINFLUSS VON IL-10 AUF DAS PRIMING NAIVER HCV-SPEZIFISCHER CD8
+
T-ZELLEN... 54
3.2.1 EXPANSION 54
3.2.2 FUNKTIONALITAET 55
3.2.3 DIFFERENZIERUNG/PHAENOTYP 56
VI
3.2.3.1 EXPRESSION VON CCR7 58
3.2.3.2 EXPRESSION VON CD45RA 59
3.2.3.3 EXPRESSION VON CD27 60
3.2.3.4 EXPRESSION VON PD-1 61
3.2.3.5 EXPRESSION VON CD127 62
3.2.3.6 EXPRESSION VON CD11A 63
3.2.3.7 EXPRESSION VON CD38 64
3.3 EINFLUSS VON IL-10 AUF HCV-SPEZIFISCHE CD8
+
T-ZELLEN NACH DEREN PRIMING...65
3.4 BESTIMMUNG DER ZIELZELLEN DER IL-10-WIRKUNG 66
3.5 EXPRESSION VON OBERFLAECHENMARKERN AUF IL-10-VORINKUBIERTEN MD-DCS 66
3.6 PHAENOTYP/DIFFERENZIERUNG DER HCV-SPEZIFISCHEN CD8
+
T-ZELLEN NACH DEREN
PRIMING DURCH MIT IL-10-VORINKUBIERTEN MD-DCS 68
3.7 WIRKUNG VON ANTI-CD28 AUF DIE PRIMING-KOKULTUR 69
3.8 WIRKUNG VON ANTI-IL-10 AUF DAS PRIMING NAIVER HCV-SPEZIFISCHER
CD8
+
T-ZELLEN 71
3.9 WIRKUNG VON IL-10 AUF DAS PRIMING NAIVER INFLUENZA
VIRUS-SPEZIFISCHER
CD8
+
T-ZELLEN 72
3.10 WIRKUNG VON IL-10 UND ANTI-IL-10 AUF VIRUS-SPEZIFISCHE
CD8
+
T-GEDAECHTNISZELLEN CHRONISCH HCV-INFIZIERTER PATIENTEN 72
3.10.1 PATIENTENKOHORTE 73
3.10.2 EXPANSION 73
3.10.3 FUNKTIONALITAET 75
4 DISKUSSION 77
5 LITERATURVERZEICHNIS 88
6 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 102
7 AEBBILDUNGSVERZEICHNIS 105
8 TABELLENVERZEICHNIS 107
9 DANKSAGUNG 108
10 VEROEFFENTLICHUNGEN 109
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