Hochspezifische und effiziente Affinitätsaufreinigung von APC mittels aptamerbeladenen-supermagnetischen Beads:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Bonn
2023
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| Beschreibung: | 111 Seiten Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
6
1.
EINLEITUNG
8
1.1
GRUNDLAGEN
8
1.1.1
DIE
PHYSIOLOGIE
DER
BLUTGERINNUNG
8
1.1.1.1
DIE
PRIMAERE
HAEMOSTASE
9
1.1.1.2
DIE
SEKUNDAERE
HAEMOSTASE
11
1.1.1.3
REGULIERENDE
FAKTOREN
DES
GERINNUNGSABLAUFS
13
1.1.2
PROTEIN
C
SYSTEM
15
1.1.2.1
EINLEITUNG
15
1.1.2.2
DIE
AKTIVIERUNG
VON
PROTEIN
C
15
1.1.2.3
DIE
WIRKUNG
VON
APC
16
1.1.2.4
THERAPEUTISCHE
VERWENDUNG
VON
APC
17
1.1.3
APTAMERE
20
1.1.3.1
EINLEITUNG
20
1.1.3.2
APTAMERE
GEGEN
APC
22
1.1.3.3
ANWENDUNGSMOEGLICHKEITEN
VON
APTAMEREN
24
1.1.3.3.1
DIAGNOSTISCHE
ANWENDUNGSMOEGLICHKEITEN
VON
APTAMEREN
24
1.1.3.3.2
AUFREINIGUNGEN
ANHAND
VON
APTAMER-BASIERTEN
METHODEN
25
1.1.4
MAGNETISCHE
BEADS
26
1.1.5
ZIELSETZUNG
26
2
MATERIAL
UND
METHODEN
28
2.1
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
28
2.2
VERWENDETE
GERAETE
29
2.3
VERWENDETE
PUFFERLOESUNGEN
29
2.4
APC
AKTIVITAETSMESSUNG
30
2.4.1
APC
AKTIVITAETSMESSUNG
ANHAND
FLUOROGENER
SUBSTRATMESSUNG
30
2.5
PROTEIN
C
AKTIVIERUNG
31
2.5.1
PROTEIN
C
AKTIVIERUNGSPROZESS
33
4
2.5.2
APC
STABILITAETSMESSUNG
IM
PUFFERSYTEM
34
2.6
STREPTAVIDIN
BASIERTE
BIO-LAYER-INTERFEROMETRIE
35
2.7
BINDUNG
DER
APTAMERE
AN
SUPERPARAMAGNETISCHE
BEADS
36
2.7.1
EINFUEHRUNG
36
2.7.2
SYNTHESE
UNTERSCHIEDLICHER
APTAMER-BEADS
37
2.7.3 KOPPLUNGSVERSUCH
UND
EFFIZIENZBEWERTUNGEN
38
2.7.3.1
NACHWEIS
DER
ERFOLGREICHEN
IMMOBILISIERUNG
VON
APTAMEREN
AUF
SUPERMAGNETISCHEN
BEADS
41
2.7.3.2
VERGLEICH
DER
LADEKAPAZITAET
DER
BEADS
41
2.8
CAPTURE
AND
ELUTION
VON
APC
ANHAND
APTAMERBELADENER
BEADS
42
2.8.1
CAPTURE
AND
ELUTION
VERSUCHSPROTOKOLL
43
2.8.2
APC
AKTIVITAETSMESSUNGSPRINZIP
NACH
CAPTURE
AND
ELUTION
VERFAHREN
43
2.8.3
VERGLEICH
DER
AUFNAHMEKAPAZITAET
VON
APTAMERBELADENEN
BEADS
45
2.8.4
EVALUIERUNG
DER
SPEZIFISCHEN
CAPTURE
AND
ELUTION-FAEHIGKEIT
VON
APC
MITTELS
HS02
52G-BELADENER
BEADS
46
2.8.5
CAPTURE
AND
ELUTION
VON
APC
BEI
4
C
UND
21
C
REAKTIONSTEMPERATUR
47
2.9
AUFREINIGUNG
VON
GENERIERTEN
APC
AUS
EINEM
PC
KONZENTRAT
47
2.10
NACHWEIS
DER
REINHEIT
DES
GENERIERTEN
APC
MITTELS
NATIVEM
PAGE
GEL
UND
PC
QUANTIFIZIERUNG
49
2.11
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
GRAPHISCHE
DARSTELLUNG
50
3
ERGEBNISSE
51
3.1
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
DES
FLUOROGENEN
TESTSYSTEMS
51
3.2
PROTEIN
C
AKTIVIERUNG
52
3.2.1
PROTEIN
C
AKTIVIERUNG
MITHILFE
VON
PROTAC
ALS
AKTIVATOR
53
3.2.2
PROTEIN
C
AKTIVIERUNG
MITHILFE
VON
THROMBIN
54
3.2.3
OPTIMIERUNG
DER
INKUBATION
57
3.2.4
AKTIVATOREN
IM
VERGLEICH
UND
VOLLSTAENDIGKEIT
DER
AKTIVIERUNG
59
3.3
BIO-LAYER-INTERFEROMETRIE
61
3.4
APTAMERBELADENE
BEADS
65
3.4.1
EINFUEHRUNG
65
3.4.2
NACHWEIS
DER
IMMOBILISIERUNG
DER
APTAMERE
AUF
DEN
SUPERMAGNETISCHEN
BEADS
UND
VERGLEICH
DER
LADEKAPAZITAET
66
5
3.5
CAPTURE
AND
ELUTION
VON
APC
ANHAND
APTAMERBELADENER
BEADS
68
3.5.1
VERGLEICH
DER
APC
AUFREINIGUNGSQUALITAETEN
UNTERSCHIEDLICHER
BEADS
68
3.5.2
CAPTURE
AND
ELUTION
VON
APC
ZUR
KAPAZITAETSBESTIMMUNG
71
3.5.3
CAPTURE
AND
ELUTION
VON
APC
BEI
4
C
UND
21
C
REAKTIONSTEMPERATUR
74
3.5.4
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
DER
BEADS
76
3.6
AUFREINIGUNG
VON
APC
AUS
EINEM
PC
KONZENTRAT
77
3.7
NACHWEIS
DER
REINHEIT
DER
METHODE
AUF
EINEM
NATIVEN
PAGE
GEL
81
4
DISKUSSION
85
5
ZUSAMMENFASSUNG
92
6
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
94
7
TABELLENVERZEICHNIS
96
8
LITERATURVERZEICHNIS
97 |
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Inhaltsverzeichnis