Genotypische phänotypische Untersuchungen zur Eignung des Autoaggregationsfaktors ehaA als diagnostischer Marker für enterohämorrhagische Escherichia coli:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
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Münster
2023
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---|---|
adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
..................................................................................................
1
1.1
ERKRANKUNGEN
DURCH
EHEC
...................................................................................
1
1.2
VIRULENZFAKTOREN
.......................................................................................................
2
1.2.1
TOXINE
......................................................................................................................
2
1.2.2
ADHAESIONS
UND
AUTOAGGREGATIONSFAKTOREN
.............................................................
3
1.3
BIOFILME
......................................................................................................................
4
1.4
AUTOTRANSPORTER
(AT)-PROTEINE
...............................................................................
6
1.5
EHAA
..........................................................................................................................
8
1.6
ZIELSETZUNG
.................................................................................................................
9
2
MATERIALIEN
..............................................................................................
10
2.1
BAKTERIENSTAEMME
....................................................................................................
10
2.2
MEDIEN
.....................................................................................................................
13
2.3
OLIGONUKLEOTIDE
.......................................................................................................
13
2.4
ENZYME
UND
CHEMIKALIEN
......................................................................................
14
2.5
PUFFER
UND
LOESUNGEN
..............................................................................................
14
2.6
GERAETE
......................................................................................................................
14
2.7
SONSTIGE
VERBRAUCHSMATERIALIEN
...........................................................................
15
3
METHODEN
.................................................................................................
17
3.1
HALTUNG
UND
ANZUCHT
VON
BAKTERIEN
....................................................................
17
3.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
...........................................................................
17
3.2.1
ISOLIERUNG
CHROMOSOMALER
DNA
AUS
E.
COLI
...........................................................
17
3.2.2
HITZEEXTRAKTION
VON
DNA
AUS
E.
COLI
.....................................................................
18
3.2.3
DNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
..........................................................................
18
3.2.4
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
ZUR
AMPLIFIKATION
EHAA-SPEZIFISCHER
FRAGMENTE
...............................................................................................................
18
3.2.5
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
...................................................................................
20
3.2.6
AUFREINIGUNG
VON
PCR-PRODUKTEN
........................................................................
20
3.2.7
SANGER
SEQUENZIERUNG
...........................................................................................
20
3.2.8
SOUTHERN
BLOT
.........................................................................................................
22
3.3
PHAENOTYPISCHE
UNTERSUCHUNG
................................................................................
25
3.3.1
BIOFILM-ASSAY
........................................................................................................
25
3.3.2
PHOTOMETRISCHE
MESSUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DES
BIOFILMS
................................
26
3.4
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.........................................................................................
26
4
ERGEBNISSE
..............................................................................................
27
4.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
................................................................
27
4.1.1
PCR-ERGEBNISSE
UND
IN
SILICO-ANALYSE
VON
REFERENZGENOMEN
............................
27
4.1.2
SOUTHERN
BLOT-ERGEBNISSE
.......................................................................................
32
4.1.3
SEQUENZANALYSE
UND
PHYLOGENETISCHER
VERGLEICH
PD
UND
TD-INTERNER
FRAGMENTE
..............................................................................................................
33
4.2
PHAENOTYPISCHE
UNTERSUCHUNG
MITTELS
...................................................................
36
5
DISKUSSION
..............................................................................................
41
6
LITERATURVERZEICHNIS
..............................................................................
48
7
DANKSAGUNG
............................................................................................
61
8
LEBENSLAUF
..............................................................................................
62
9
ANHANG
......................................................................................................
I
9.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.............................................................................................
I
9.2
MULTIPLES
ALIGNMENT
................................................................................................
II
|
adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
ERKRANKUNGEN
DURCH
EHEC
.
1
1.2
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.
2
1.2.1
TOXINE
.
2
1.2.2
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.
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.
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(AT)-PROTEINE
.
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.
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.
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2.1
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10
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.
13
2.3
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.
13
2.4
ENZYME
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CHEMIKALIEN
.
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2.5
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.
14
2.6
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.
14
2.7
SONSTIGE
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
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.
17
3.1
HALTUNG
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BAKTERIEN
.
17
3.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
17
3.2.1
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CHROMOSOMALER
DNA
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E.
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.
17
3.2.2
HITZEEXTRAKTION
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E.
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.
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3.2.3
DNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
.
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(PCR)
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.
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3.2.5
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
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3.2.6
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PCR-PRODUKTEN
.
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3.2.7
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SEQUENZIERUNG
.
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BLOT
.
22
3.3
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UNTERSUCHUNG
.
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3.3.1
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.
25
3.3.2
PHOTOMETRISCHE
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QUANTIFIZIERUNG
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BIOFILMS
.
26
3.4
STATISTISCHE
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.
26
4
ERGEBNISSE
.
27
4.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
27
4.1.1
PCR-ERGEBNISSE
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SILICO-ANALYSE
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REFERENZGENOMEN
.
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BLOT-ERGEBNISSE
.
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SEQUENZANALYSE
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PHYLOGENETISCHER
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TD-INTERNER
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.
33
4.2
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MITTELS
.
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.
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LITERATURVERZEICHNIS
.
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.
61
8
LEBENSLAUF
.
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