Die Rolle von Integrin alpha 11 a während der Schließung der Augenbecherspalte im Zebrabärbling (Danio rerio):
Gespeichert in:
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Freiburg im Breisgau
[2022]
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.....................................................................................................
3
2.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
......................................................................................................
5
3.
EINLEITUNG
............................................................................................................................
6
3.1.
AUGENENTWICKLUNG
UND
ENTSTEHUNG
DER
AUGENBECHERSPALTE
........................................
6
3.2.
DAS
KRANKHEITSBILD
KOLOBOM
..........................................................................................
8
3.3.
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
....................................................................................................
11
3.4.
DIE
TGFSS-SUPERFAMILIE
IM
KONTEXT
DER
AUGENENTWICKLUNG
...........................................
12
3.5.
ZIELGEN
..........................................................................................................................
15
3.6.
ZEBRABAERBLINGE
ALS
VERSUCHSMODELL
.............................................................................
17
3.7.
MORPHOLINOS
.................................................................................................................
17
3.8.
CRISPR/CAS9
..............................................................................................................
19
4.
ZIEL
DES
PROJEKTS
...............................................................................................................
21
5.
MATERIAL
...............................................................
22
5.1.
BENUTZTE
FISCHLINIEN
.....................................................................................................
22
5.2.
FERTIGSYSTEME
/
KITS
.....................................................................................................
22
5.3.
SGRNA
FUER
INJEKTIONEN
..................................................................................................
22
5.4.
PLASMIDE
......................................................................................................................
23
5.5.
PRIMER
..........................................................................................................................
23
5.6.
MORPHOLINOS
.................................................................................................................
23
5.7.
ANTIKOERPER
....................................................................................................................
24
5.8.
ENZYME
UND
GROESSENSTANDARDS
...................................................................................
24
5.9.
MEDIEN,
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.....................................................................................
24
5.10.
CHEMIKALIEN
...............................................................................................................
26
5.11.
GERAETE,
VERBRAUCHSMATERIAL
UND
ZUBEHOER
.................................................................
27
6.
METHODEN
..........................................................................................................................
29
6.1.
TIERMODELL
....................................................................................................................
29
6.2.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODE
....................................................................................
29
6.2.1.
ALLGEMEINE
PROTOKOLLE
............................................................................................
29
6.2.2.
KLONIEREN
UND
SYNTHESE
VON
ISH
SONDEN
.............................................................
34
6.2.3.
WHOLE-MOUNT
IN-SITU-HYBRIDISIERUNG
VON
ZEBRABAERBLING-EMBRYONEN
...................
37
6.2.4.
MORPHOLINOS...........................................................................................................
39
6.2.5.
QPCR
....................................................................................................................
40
6.2.6.
CRISPR/CAS9
.......................................................................................................
42
6.3.
HISTOLOGISCHE
TECHNIKEN
..............................................................................................
47
7.
ERGEBNISSE
........................................................................................................................
49
7.1.
REGULATION
VON
ITGALLA
IN
ZEBRABAERBLINGEN
.................................................................
49
7.2.
BESTIMMUNG
DER
GENEXPRESSION
..................................................................................
50
7.3.
MORPHOLINO-MODULIERTER
KNOCK-DOWN
...........................................................................
53
7.4.
CRISPR/CAS9
KNOCK-OUT
.............................................................................................
57
7.5.
FO-CRISPANTS................................................................................................................
64
7.6.
NEUE
SGRNAS
..............................................................................................................
66
8.
DISKUSSION
.........................................................................................................................
71
8.1.
REGULATION
VON
ITGALLA
IM
ZEBRABAERBLING
....................................................................
71
8.2.
EXPRESSIONSMUSTER
VON
ITGALLA
...................................................................................
73
8.3.
MORPHOLINO-MODULIERTER
KNOCK-DOWN
VON
ITGALLA
.......................................................
74
8.4.
EINORDNUNG
IN
EINE
GEN-KOLOBOM-KARTE
.....................................................................
78
8.5.
GENERIERUNG
EINES
ITGALLA
KNOCK-OUTS
.......................................................................
83
8.6.
ERKLAERUNG
DES
AUSBLEIBENDEN
KO-PHAENOTYPENS
..........................................................
84
9.
ZUSAMMENFASSUNG
...........................................................................................................
89
10.
AUSBLICK
..........................................................................................................................
90
11.
ANHANG
.............................................................................................................................
91
LITERATURVERZEICHNIS
............................................................................................................
91
LEBENSLAUF
.........................................................................................................................
101
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
.............................................................................................
101
DANKSAGUNG
......................................................................................................................
104
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
3
2.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
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3.
EINLEITUNG
.
6
3.1.
AUGENENTWICKLUNG
UND
ENTSTEHUNG
DER
AUGENBECHERSPALTE
.
6
3.2.
DAS
KRANKHEITSBILD
KOLOBOM
.
8
3.3.
EXTRAZELLULAERE
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.
11
3.4.
DIE
TGFSS-SUPERFAMILIE
IM
KONTEXT
DER
AUGENENTWICKLUNG
.
12
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.
15
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ZEBRABAERBLINGE
ALS
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.
17
3.7.
MORPHOLINOS
.
17
3.8.
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.
19
4.
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PROJEKTS
.
21
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.
22
5.1.
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FISCHLINIEN
.
22
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23
5.6.
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23
5.7.
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.
24
5.8.
ENZYME
UND
GROESSENSTANDARDS
.
24
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ZUBEHOER
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29
6.1.
TIERMODELL
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SYNTHESE
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ZEBRABAERBLING-EMBRYONEN
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.
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6.3.
HISTOLOGISCHE
TECHNIKEN
.
47
7.
ERGEBNISSE
.
49
7.1.
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ITGALLA
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ZEBRABAERBLINGEN
.
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7.2.
BESTIMMUNG
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GENEXPRESSION
.
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MORPHOLINO-MODULIERTER
KNOCK-DOWN
.
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7.6.
NEUE
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.
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8.
DISKUSSION
.
71
8.1.
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ITGALLA
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ZEBRABAERBLING
.
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8.2.
EXPRESSIONSMUSTER
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MORPHOLINO-MODULIERTER
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ITGALLA
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74
8.4.
EINORDNUNG
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GEN-KOLOBOM-KARTE
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78
8.5.
GENERIERUNG
EINES
ITGALLA
KNOCK-OUTS
.
83
8.6.
ERKLAERUNG
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AUSBLEIBENDEN
KO-PHAENOTYPENS
.
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ZUSAMMENFASSUNG
.
89
10.
AUSBLICK
.
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