Holdings: Auswirkungen eines postnatalen Verlusts von Lhx6 auf aus der MGE stammende Interneurone

Auswirkungen eines postnatalen Verlusts von Lhx6 auf aus der MGE stammende Interneurone:

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Bibliographic Details
Main Author:	Voß, Lars (Author)
Format:	Thesis Book
Language:	German
Published:	Freiburg im Breisgau 2020
Subjects:	Interneuron Hochschulschrift
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGEN ............................................................................................................................ 5 ABBILDUNGSVERZEICHNIS ............................................................................................................. 7 1 EINLEITUNG .......................................................................................................................... 1 1.1 TRANSKRIPTIONSFAKTOREN ALS ENTSCHEIDENDE BAUSTEINE IN DER ZELLDIFFERENZIERUNG ......... 1 1.2 ENTWICKLUNG KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER INTERNEURONEN .......................................... 4 1.3 DIFFERENZIERUNG KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER INTERNEURONEN IN UNTERSCHIEDLICHE SUBTYPEN ................................................................................................................................. 9 1.3.1 DLX1 UND DLX 2 LOESEN EINE DIFFERENZIERUNG ZUM GABAERGEN PHAENOTYP AUS . 9 1.3.2 NKX2-1 INDUZIERT DIE ENSTEHUNG DER MGE UND IST ESSENZIELL FUER DIE ENTWICKLUNG DER AUS IHR ENTSTEHENDEN INTERNEURONE .............................................................................. 10 1.3.3 ROLLE VON LHX6 IN DER ENTWICKLUNG AUS DER MGE STAMMENDER INTERNEURONE... 10 1.3.4 ROLLE AUSGEWAEHLTER ZIELGENE VON LHX6 IN DER INTERNEURONENTWICKLUNG ........... 12 1.3.5 EXTRAZELLULAERE SIGNALE SIND ENTSCHEIDEND FUER DIE DIFFERENZIERUNG VON INTERNEURONEN ................................................................................................................... 14 1.4 IN DER PRAENATALEN DIFFERENZIERUNG ENTSCHEIDENDE TRANSKRIPTIONSFAKTOREN HABEN EINFLUSS AUF DIE POSTNATALE ENTWICKLUNG GABAERGER NEURONEN IM KORTEX UND HIPPOKAMPUS ........................................................................................................................ 15 1.5 ARTIFIZIELL INDUZIERTE LHX6 EXPRESSION ERMOEGLICHT DIE DIFFERENZIERUNG PLURIPOTENTER STAMMZELLEN IN GABAERGE NEURONE ................................................................................... 18 1.6 FUNKTION KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER GABAERGER INTERNEURONE .......................... 18 1.6.1 FUNKTION PV+ INTERNEURONEN IN SCHALTKREISEN DES KORTEX UND HIPPOKAMPUS ..19 1.6.2 BEITRAG PV+ INTERNEURONEN ZU BESTIMMTEN VERHALTENSWEISEN ............................ 19 1.6.3 STOERUNGEN DER PV+ INTERNEURONEN IN NEUROLOGISCHEN UND PSYCHIATRISCHEN ERKRANKUNGEN .................................................................................................................. 20 1.7 ZIEL DER ARBEIT ............................................................................................................ 22 2 MATERIAL UND METHODEN ................................................................................................. 23 2.1 V ERSUCHSTIERE ............................................................................................................ 23 2.2 STEREOTAKTISCHE VIRUSINJEKTION IN DEN HIPPOKAMPUS ADULTER MAEUSE ......................... 23 2.3 VERHALTENSEXPERIMENTE .............................................................................................. 25 2.3.1 SPONTANEOUS ALTERNATION ...................................................................................... 25 2.3.2 NOVELTY-PREFERENCE .............................................................................................. 26 2.3.3 OPEN-FIELD-TEST .................................................................................................. 26 2.3.4 NOVEL OBJECT RECOGNTITION .................................................................................... 26 2.3.5 BARNES MAZE ........................................................................................................ 27 2.4 IMMUNHISTOCHEMIE .................................................................................................... 28 2.4.1 INTRAKARDIALE PERFUSION ........................................................................................ 28 2.4.2 ANTIKOERPER .......................................................................................................... 28 2.4.3 IMMUNFAERBUNG PERFUNDIERTER GEHIRNSCHNITTE ...................................................... 30 2.4.4 IMMUNFAERBUNG FIXIERTER AKUTER GEHRINSCHNITTE .................................................... 30 2.4.5 ANALYSE IMMUNHISTOCHEMISCHER FAERBUNGEN ....................................................... 30 2.5 ELEKTROPHYSIOLOGIE ..................................................................................................... 31 2.5.1 AKUTE HIRNSCHNITTPRAEPARATE ................................................................................. 31 2.5.2 BESTIMMUNG ELEKTROPHYSIOLOGISCHER BASISEIGENSCHAFTEN PARVALBUMIN+ INTERNEURONE ..................................................................................................................... 32 2.6 STATISTISCHE DATENANALYSE ............................................................................................. 33 2.7 PUFFER UND LOESUNGEN .................................................................................................... 34 3 ERGEBNISSE ....................................................................................................................... 35 3.1 ETABLIERUNG EINER GEEIGNETEN AAV9-CRE-GFP VIRUSKONZENTRATION ........................... 35 3.2 AUSWIRKUNGEN DER UNTERSCHIEDLICHEN KNOCKOUT VARIANTEN AUF DIE GESAMTZAHL LHX6+ ZELLEN38 3.3 VERMINDERTE EXPRESSION VON LHX6 IN PV+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT AUF UNTERSCHIEDLICHE WEISEN ...................................................................................................... 41 3.4 VERMINDERTE EXPRESSION VON LHX6 IN MGLURLA+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT DURCH VIRALE INJEKTION .......................................................................................................... 43 3.5 UNVERAENDERTE DICHTE VON PV+ UND MGLURL A+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT 45 3.6 REDUZIERTE FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET VON ZIELGENEN IN AUS DER MGE STAMMENDEN INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS ...................................... 48 3.6.1 REDUZIERTE FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET VON ARX IN PV+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS ................................................................. 48 3.6.2 REDUZIERTE SOX6 FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET IN PV+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS ................................................................. 51 3.6.3 REDUZIERTE SATBL FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET IN MGLURLA+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS ................................................................. 52 3.7 UNVERAENDERTE AKTIVE UND PASSIVE ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER PV+ INTERNEURONEN DES GYRUS DENTATUS NACH VIRALEM KNOCKOUT VON LHX6 ................................. 55 3.8 UNVERAENDERTE MORPHOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER PV+ INTERNEURONEN DES GYRUS DENTATUS NACH VIRALEM KNOCKOUT VON LHX6 .......................................................................... 58 3.9 LHX6LOXP/OXP; PV-CRE MAEUSE ZEIGEN UNVERAENDERTES VERHALTEN IN KOGNITIVEN TESTS ... 60 3.9.1 GLEICHE RATE AN ALTERNATIONEN IM Y-MAZE IN BEIDEN GRUPPEN ......................... 60 3.9.2 UNVERAENDERTE AUFENTHALTSZEIT IM NEUEN ARM DES Y-MAZE BEIM YYNOVELTY PREFERENCE TEST .............................................................................................................. . 3.9.3 UNVERAENDERTE VERHALTEN WAEHREND DES YYOPEN FIELD TEST .................................. 60 3.9.4 GLEICHES INTERESSE AN EINEM NEUEN OBJEKT NACH 5 MINUTEN UND 24 STUNDEN .... 61 3.9.5 VERGLEICHBARES LERNVERHALTEN IM BARNES MAZE UEBER 5 TAGE ............................. 61 4 DISKUSSION ........................................................................................................................ 65 4.1 ERSTE ETABLIERUNG EINES PRAENATALEN KNOCKOUTS VON LHX6 .......................................... 65 4.1.1 BEIDE VERWENDETEN ARTEN DES CRE-LOXP SYSTEMS FUEHREN ZUM VERLUST VON LHX6 65 4.1.2 DAS AUSMASS DES KNOCKOUTS UNTERSCHEIDET SICH IN DEN BEIDEN ANSAETZEN ......... 65 4.2 LHX6 IST KEIN UEBERLEBENSFAKTOR FUER PV+ UND SST+ INTERNEURONEN IM HIPPOKAMPUS UND SEINE FUNKTION VERAENDERT SICH IM LAUFE DER ENTWICKLUNG ............................................. 66 4.3 LHX6 IST POSTNATAL KEINE VORAUSSETZUNG FUER DIE EXPRESSION VON ARX, SOX6 UND SATBL, BEEINFLUSST IHRE EXPRESSION ABER WEITERHIN ................................................................ 68 4.4 DIE DIFFERENZIERUNG UND FUNKTIONALITAET PV+ INTERNEURONEN IST POSTNATAL ZU EINEM GEWISSEN GRAD UNABHAENGIG VON DER AKTIVITAET LHXOES ........................................................... 69 4.5 DER 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adam_txt	INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGEN . 5 ABBILDUNGSVERZEICHNIS . 7 1 EINLEITUNG . 1 1.1 TRANSKRIPTIONSFAKTOREN ALS ENTSCHEIDENDE BAUSTEINE IN DER ZELLDIFFERENZIERUNG . 1 1.2 ENTWICKLUNG KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER INTERNEURONEN . 4 1.3 DIFFERENZIERUNG KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER INTERNEURONEN IN UNTERSCHIEDLICHE SUBTYPEN . 9 1.3.1 DLX1 UND DLX 2 LOESEN EINE DIFFERENZIERUNG ZUM GABAERGEN PHAENOTYP AUS . 9 1.3.2 NKX2-1 INDUZIERT DIE ENSTEHUNG DER MGE UND IST ESSENZIELL FUER DIE ENTWICKLUNG DER AUS IHR ENTSTEHENDEN INTERNEURONE . 10 1.3.3 ROLLE VON LHX6 IN DER ENTWICKLUNG AUS DER MGE STAMMENDER INTERNEURONE. 10 1.3.4 ROLLE AUSGEWAEHLTER ZIELGENE VON LHX6 IN DER INTERNEURONENTWICKLUNG . 12 1.3.5 EXTRAZELLULAERE SIGNALE SIND ENTSCHEIDEND FUER DIE DIFFERENZIERUNG VON INTERNEURONEN . 14 1.4 IN DER PRAENATALEN DIFFERENZIERUNG ENTSCHEIDENDE TRANSKRIPTIONSFAKTOREN HABEN EINFLUSS AUF DIE POSTNATALE ENTWICKLUNG GABAERGER NEURONEN IM KORTEX UND HIPPOKAMPUS . 15 1.5 ARTIFIZIELL INDUZIERTE LHX6 EXPRESSION ERMOEGLICHT DIE DIFFERENZIERUNG PLURIPOTENTER STAMMZELLEN IN GABAERGE NEURONE . 18 1.6 FUNKTION KORTIKALER UND HIPPOKAMPALER GABAERGER INTERNEURONE . 18 1.6.1 FUNKTION PV+ INTERNEURONEN IN SCHALTKREISEN DES KORTEX UND HIPPOKAMPUS .19 1.6.2 BEITRAG PV+ INTERNEURONEN ZU BESTIMMTEN VERHALTENSWEISEN . 19 1.6.3 STOERUNGEN DER PV+ INTERNEURONEN IN NEUROLOGISCHEN UND PSYCHIATRISCHEN ERKRANKUNGEN . 20 1.7 ZIEL DER ARBEIT . 22 2 MATERIAL UND METHODEN . 23 2.1 V ERSUCHSTIERE . 23 2.2 STEREOTAKTISCHE VIRUSINJEKTION IN DEN HIPPOKAMPUS ADULTER MAEUSE . 23 2.3 VERHALTENSEXPERIMENTE . 25 2.3.1 SPONTANEOUS ALTERNATION . 25 2.3.2 NOVELTY-PREFERENCE . 26 2.3.3 OPEN-FIELD-TEST . 26 2.3.4 NOVEL OBJECT RECOGNTITION . 26 2.3.5 BARNES MAZE . 27 2.4 IMMUNHISTOCHEMIE . 28 2.4.1 INTRAKARDIALE PERFUSION . 28 2.4.2 ANTIKOERPER . 28 2.4.3 IMMUNFAERBUNG PERFUNDIERTER GEHIRNSCHNITTE . 30 2.4.4 IMMUNFAERBUNG FIXIERTER AKUTER GEHRINSCHNITTE . 30 2.4.5 ANALYSE IMMUNHISTOCHEMISCHER FAERBUNGEN . 30 2.5 ELEKTROPHYSIOLOGIE . 31 2.5.1 AKUTE HIRNSCHNITTPRAEPARATE . 31 2.5.2 BESTIMMUNG ELEKTROPHYSIOLOGISCHER BASISEIGENSCHAFTEN PARVALBUMIN+ INTERNEURONE . 32 2.6 STATISTISCHE DATENANALYSE . 33 2.7 PUFFER UND LOESUNGEN . 34 3 ERGEBNISSE . 35 3.1 ETABLIERUNG EINER GEEIGNETEN AAV9-CRE-GFP VIRUSKONZENTRATION . 35 3.2 AUSWIRKUNGEN DER UNTERSCHIEDLICHEN KNOCKOUT VARIANTEN AUF DIE GESAMTZAHL LHX6+ ZELLEN38 3.3 VERMINDERTE EXPRESSION VON LHX6 IN PV+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT AUF UNTERSCHIEDLICHE WEISEN . 41 3.4 VERMINDERTE EXPRESSION VON LHX6 IN MGLURLA+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT DURCH VIRALE INJEKTION . 43 3.5 UNVERAENDERTE DICHTE VON PV+ UND MGLURL A+ INTERNEURONEN NACH LHX6 KNOCKOUT 45 3.6 REDUZIERTE FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET VON ZIELGENEN IN AUS DER MGE STAMMENDEN INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS . 48 3.6.1 REDUZIERTE FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET VON ARX IN PV+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS . 48 3.6.2 REDUZIERTE SOX6 FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET IN PV+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS . 51 3.6.3 REDUZIERTE SATBL FLUORESZENZSIGNALINTENSITAET IN MGLURLA+ INTERNEURONEN NACH UNTERSCHIEDLICHEN ARTEN DES LHX6 KNOCKOUTS . 52 3.7 UNVERAENDERTE AKTIVE UND PASSIVE ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER PV+ INTERNEURONEN DES GYRUS DENTATUS NACH VIRALEM KNOCKOUT VON LHX6 . 55 3.8 UNVERAENDERTE MORPHOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER PV+ INTERNEURONEN DES GYRUS DENTATUS NACH VIRALEM KNOCKOUT VON LHX6 . 58 3.9 LHX6LOXP/OXP; PV-CRE MAEUSE ZEIGEN UNVERAENDERTES VERHALTEN IN KOGNITIVEN TESTS . 60 3.9.1 GLEICHE RATE AN ALTERNATIONEN IM Y-MAZE IN BEIDEN GRUPPEN . 60 3.9.2 UNVERAENDERTE AUFENTHALTSZEIT IM NEUEN ARM DES Y-MAZE BEIM YYNOVELTY PREFERENCE " TEST . . 3.9.3 UNVERAENDERTE VERHALTEN WAEHREND DES YYOPEN FIELD " TEST . 60 3.9.4 GLEICHES INTERESSE AN EINEM NEUEN OBJEKT NACH 5 MINUTEN UND 24 STUNDEN . 61 3.9.5 VERGLEICHBARES LERNVERHALTEN IM BARNES MAZE UEBER 5 TAGE . 61 4 DISKUSSION . 65 4.1 ERSTE ETABLIERUNG EINES PRAENATALEN KNOCKOUTS VON LHX6 . 65 4.1.1 BEIDE VERWENDETEN ARTEN DES CRE-LOXP SYSTEMS FUEHREN ZUM VERLUST VON LHX6 65 4.1.2 DAS AUSMASS DES KNOCKOUTS UNTERSCHEIDET SICH IN DEN BEIDEN ANSAETZEN . 65 4.2 LHX6 IST KEIN UEBERLEBENSFAKTOR FUER PV+ UND SST+ INTERNEURONEN IM HIPPOKAMPUS UND SEINE FUNKTION VERAENDERT SICH IM LAUFE DER ENTWICKLUNG . 66 4.3 LHX6 IST POSTNATAL KEINE VORAUSSETZUNG FUER DIE EXPRESSION VON ARX, SOX6 UND SATBL, BEEINFLUSST IHRE EXPRESSION ABER WEITERHIN . 68 4.4 DIE DIFFERENZIERUNG UND FUNKTIONALITAET PV+ INTERNEURONEN IST POSTNATAL ZU EINEM GEWISSEN GRAD UNABHAENGIG VON DER AKTIVITAET LHXOES . 69 4.5 DER POSTNATALE VERLUST VON LHX6 IN PV+ INTERNEURONEN FUEHRT NICHT ZU ABNORMEN VERHALTEN ODER EINSCHRAENKUNGEN IN KOGNITIVEN TESTS . 71 4.6 ZUSAMMENFASSUNG . 72 4.7 AUSBLICK . 5 LITERATURVERZEICHNIS . 75 5.1 PUBLIKATIONEN IM RAHMEN DES DISSERTATIONSPROJEKTES . 89 IV
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spelling	Voß, Lars Verfasser (DE-588)1270729977 aut Auswirkungen eines postnatalen Verlusts von Lhx6 auf aus der MGE stammende Interneurone von Lars Voß Freiburg im Breisgau 2020 vii, 94 Seiten Illustrationen, Diagramme 30 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Dissertation Albert-Ludwigs-Universität Freiburg im Breisgau 2022 2\p Interneuron (DE-588)4314951-0 gnd (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content B:DE-101 application/pdf https://d-nb.info/1272268993/04 Inhaltsverzeichnis DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=034565453&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis 1\p emakn 0,05951 20230310 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#emakn 2\p emagnd 0,23388 20230310 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#emagnd
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