Inhibition der Makrophagenproliferation dominiert die Plaqueregression durch Cholesterinsenkung:
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| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Freiburg im Breisgau
[2022]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
...........................................................................................................................
1
1.1
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ATHEROSKLEROSE
...........................................................................
2
1.1.1
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
IN
DER
ATHEROSKLEROSE
..........................................
5
1.1.2
PLAQUEREGRESSION
...................................................................................................
7
1.2
STATINE
IN
DER
THERAPIE DER
ATHEROSKLEROSE
..................................................................
9
1.3
APOE3-LEIDEN
MAEUSE
.................................................................................................
12
1.4
FRAGESTELLUNG
DER
DOKTORARBEIT
...................................................................................
14
2
MATERIAL
...........................................................................................................................
15
2.1
V
ERSUCHSTIERE
..............................................................................................................
15
2.2
TIERFUTTER
.....................................................................................................................
15
2.3
ANTIKOERPER
...................................................................................................................
16
2.3.1
ANTIKOERPER
UND
FAERBEKITS
ZUR
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
...........................................
16
2.3.2
ANTIKOERPER,
FARBSTOFFE,
FAERBEKITS
ZUR
IMMUNHISTOLOGIE
......................................
17
2.3.3
TAQMAN-SONDEN
.................................................................................................
19
2.3.4
CHEMIKALIEN,
REAGENZIEN
UND
ENZYME
...............................................................
19
2.3.5
PUFFER
..................................................................................................................
21
2.3.6
WEITERE
KITS
........................................................................................................
21
2.3.7
SONSTIGE
MATERIALIEN
...........................................................................................
22
2.3.8
GERAETE
.................................................................................................................
23
2.3.9
SOFTWARE
.............................................................................................................
24
3
METHODEN
..........................................................................................................................
26
3.1
IN
VIVO
STUDIE
............................................................................................................
26
3.1.1
STUDIENDESIGN
.....................................................................................................
26
3.1.2
PROBENGEWINNUNG
...............................................................................................
27
3.1.2.1
BLUTENTNAHME
UND
GEWINNUNG
DES
BLUTPLASMAS
.........................................
27
3.1.2.2
ORGANENTNAHME
UND
ZELLISOLATION
...............................................................
27
III
3.1.3
IN
VIVO
ZELLMARKIERUNG
.......................................................................................
28
3.1.3.1
BEADS
............................................................................................................
28
3.1.3.2
UBC-GFP-KNOCHENMARKTRANSPLANTATION
.....................................................
29
3.1.3.3
BROMDESOXYURIDIN
........................................................................................
30
3.1.4
HUMANE
PRAEPARATE
...............................................................................................
30
3.2
ENZYMATISCHE
KOIORIMETRISCHE
ANALYSEN
....................................................................
31
3.2.1
GESAMTCHOLESTERIN
...............................................................................................
31
3.2.2
TRIGLYZERIDE
........................................................................................................
32
3.3
ENZYMGEKOPPELTER
IMMUNADSORPTIONSTEST
..................................................................
32
3.3.1
SERUM
AMYLOID
A
...............................................................................................
32
3.3.2
APOLIPOPROTEIN
B
.................................................................................................
33
3.4
QUANTITATIVE
REAL-TIME
POLYMERASEKETTENREAKTION
....................................................
33
3.5
HISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
...........................................................................................
34
3.5.1
OIL-RED-O
FAERBUNG
.............................................................................................
34
3.5.2
MASSON TRICHROM
FAERBUNG
..................................................................................
34
3.5.3
CD68
FAERBUNG
.....................................................................................................
35
3.5.4
BILDGEBUNG
UND
AUSWERTUNG
...............................................................................
35
3.6
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
......................................................................................
36
3.6.1
BRDU
UND
CD68
FAERBUNG
....................................................................................
36
3.6.2
TUNEL
UND
CD68
FAERBUNG
................................................................................
37
3.6.3
BEADS
UND
CD68
FAERBUNG
...................................................................................
37
3.6.4
GRUEN-FLUORESZIERENDES
PROTEIN
UND
CD68
FAERBUNG
.............................................
38
3.6.5
HUMANE
PRAEPARATE
...............................................................................................
38
3.6.6
BILDGEBUNG
UND
AUSWERTUNG
...............................................................................
39
3.7
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.................................................................................................
39
3.7.1
OBERFLAECHENFAERBUNGEN
.........................................................................................
39
3.7.2
INTRAZELLULAERE
FAERBUNGEN
......................................................................................
40
3.7.2.1
PROLIFERATIONSANALYSE
...................................................................................
40
IV
3.7.2.2
ZELLTODANALYSE
.............................................................................................
40
3.7.3
AUSWERTUNG
........................................................................................................
41
3.8
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
............................................................................................
41
4
ERGEBNISSE
........................................................................................................................
42
4.1
ORALES
ATORVASTATIN
UND
CHOLESTERINFREIE
DIAET
SENKEN
DEN
CHOLESTERINSPIEGEL
UND
INDUZIEREN PHAENOTYPISCH
PLAQUEREGRESSION
.........................................................................
42
4.2
ORALES
ATORVASTATIN
HEMMT
DIE
MONOZYTENEINWANDERUNG
UND
DIE
MAKROPHAGENAKKUMULATION
IN
DER
ETABLIERTEN
ATHEROSKLEROSE
...........................................
47
4.3
ORALES
ATORVASTATIN HEMMT
DIE
MAKROPHAGENAKKUMULATION
VORRANGIG
DURCH
REDUKTION
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
..............................................................
54
4.4
DIE
HEMMUNG
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
HAENGT
VON
DER
SYSTEMISCHEN
CHOLESTERINSENKUNG
AB
........................................................................................................
59
4.5
LOKALE
MAKROPHAGENPROLIFERATION
KORRELIERT
MIT
HYPERCHOLESTERINAEMIE
UND
LIPIDREICHEN
ATHEROSKLEROTISCHEN
PLAQUES
IN
MENSCHEN
........................................................
64
5
DISKUSSION
..........................................................................................................................
66
5.1
ZELLBIOLOGISCHE
PROZESSE
WAEHREND
DER
PLAQUEREGRESSION
UND
DIE
WIRKUNG
VON
ORAL
ZUGEFUEHRTEM
ATORVASTATIN
AUF
ETABLIERTE
ATHEROSKLEROTISCHE
PLAQUES
...................................
66
5.2
RELEVANZ
DER
STUDIE
FUER
DIE
AKTUELLE
THERAPIE
DER
ATHEROSKLEROSE
UND
NEUE
THERAPIEANSAETZE
ZUR
HEMMUNG
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
..............................
71
6
ZUSAMMENFASSUNG
.............................................................................................................
75
7
LITERATURVERZEICHNIS
...........................................................................................................
76
8
PUBLIKATIONEN
...................................................................................................................
106
9
LEBENSLAUF
.......................................................................................................................
107
10
EIDESSTATTLICHE
V
ERSICHERUNG
...........................................................................................
108
11
ERKLAERUNG
ZUM
EIGENANTEIL
.............................................................................................
109
12
DANKSAGUNG
....................................................................................................................
110
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ATHEROSKLEROSE
.
2
1.1.1
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
IN
DER
ATHEROSKLEROSE
.
5
1.1.2
PLAQUEREGRESSION
.
7
1.2
STATINE
IN
DER
THERAPIE DER
ATHEROSKLEROSE
.
9
1.3
APOE3-LEIDEN
MAEUSE
.
12
1.4
FRAGESTELLUNG
DER
DOKTORARBEIT
.
14
2
MATERIAL
.
15
2.1
V
ERSUCHSTIERE
.
15
2.2
TIERFUTTER
.
15
2.3
ANTIKOERPER
.
16
2.3.1
ANTIKOERPER
UND
FAERBEKITS
ZUR
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
16
2.3.2
ANTIKOERPER,
FARBSTOFFE,
FAERBEKITS
ZUR
IMMUNHISTOLOGIE
.
17
2.3.3
TAQMAN-SONDEN
.
19
2.3.4
CHEMIKALIEN,
REAGENZIEN
UND
ENZYME
.
19
2.3.5
PUFFER
.
21
2.3.6
WEITERE
KITS
.
21
2.3.7
SONSTIGE
MATERIALIEN
.
22
2.3.8
GERAETE
.
23
2.3.9
SOFTWARE
.
24
3
METHODEN
.
26
3.1
IN
VIVO
STUDIE
.
26
3.1.1
STUDIENDESIGN
.
26
3.1.2
PROBENGEWINNUNG
.
27
3.1.2.1
BLUTENTNAHME
UND
GEWINNUNG
DES
BLUTPLASMAS
.
27
3.1.2.2
ORGANENTNAHME
UND
ZELLISOLATION
.
27
III
3.1.3
IN
VIVO
ZELLMARKIERUNG
.
28
3.1.3.1
BEADS
.
28
3.1.3.2
UBC-GFP-KNOCHENMARKTRANSPLANTATION
.
29
3.1.3.3
BROMDESOXYURIDIN
.
30
3.1.4
HUMANE
PRAEPARATE
.
30
3.2
ENZYMATISCHE
KOIORIMETRISCHE
ANALYSEN
.
31
3.2.1
GESAMTCHOLESTERIN
.
31
3.2.2
TRIGLYZERIDE
.
32
3.3
ENZYMGEKOPPELTER
IMMUNADSORPTIONSTEST
.
32
3.3.1
SERUM
AMYLOID
A
.
32
3.3.2
APOLIPOPROTEIN
B
.
33
3.4
QUANTITATIVE
REAL-TIME
POLYMERASEKETTENREAKTION
.
33
3.5
HISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
.
34
3.5.1
OIL-RED-O
FAERBUNG
.
34
3.5.2
MASSON TRICHROM
FAERBUNG
.
34
3.5.3
CD68
FAERBUNG
.
35
3.5.4
BILDGEBUNG
UND
AUSWERTUNG
.
35
3.6
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
.
36
3.6.1
BRDU
UND
CD68
FAERBUNG
.
36
3.6.2
TUNEL
UND
CD68
FAERBUNG
.
37
3.6.3
BEADS
UND
CD68
FAERBUNG
.
37
3.6.4
GRUEN-FLUORESZIERENDES
PROTEIN
UND
CD68
FAERBUNG
.
38
3.6.5
HUMANE
PRAEPARATE
.
38
3.6.6
BILDGEBUNG
UND
AUSWERTUNG
.
39
3.7
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
39
3.7.1
OBERFLAECHENFAERBUNGEN
.
39
3.7.2
INTRAZELLULAERE
FAERBUNGEN
.
40
3.7.2.1
PROLIFERATIONSANALYSE
.
40
IV
3.7.2.2
ZELLTODANALYSE
.
40
3.7.3
AUSWERTUNG
.
41
3.8
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
41
4
ERGEBNISSE
.
42
4.1
ORALES
ATORVASTATIN
UND
CHOLESTERINFREIE
DIAET
SENKEN
DEN
CHOLESTERINSPIEGEL
UND
INDUZIEREN PHAENOTYPISCH
PLAQUEREGRESSION
.
42
4.2
ORALES
ATORVASTATIN
HEMMT
DIE
MONOZYTENEINWANDERUNG
UND
DIE
MAKROPHAGENAKKUMULATION
IN
DER
ETABLIERTEN
ATHEROSKLEROSE
.
47
4.3
ORALES
ATORVASTATIN HEMMT
DIE
MAKROPHAGENAKKUMULATION
VORRANGIG
DURCH
REDUKTION
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
.
54
4.4
DIE
HEMMUNG
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
HAENGT
VON
DER
SYSTEMISCHEN
CHOLESTERINSENKUNG
AB
.
59
4.5
LOKALE
MAKROPHAGENPROLIFERATION
KORRELIERT
MIT
HYPERCHOLESTERINAEMIE
UND
LIPIDREICHEN
ATHEROSKLEROTISCHEN
PLAQUES
IN
MENSCHEN
.
64
5
DISKUSSION
.
66
5.1
ZELLBIOLOGISCHE
PROZESSE
WAEHREND
DER
PLAQUEREGRESSION
UND
DIE
WIRKUNG
VON
ORAL
ZUGEFUEHRTEM
ATORVASTATIN
AUF
ETABLIERTE
ATHEROSKLEROTISCHE
PLAQUES
.
66
5.2
RELEVANZ
DER
STUDIE
FUER
DIE
AKTUELLE
THERAPIE
DER
ATHEROSKLEROSE
UND
NEUE
THERAPIEANSAETZE
ZUR
HEMMUNG
DER
LOKALEN
MAKROPHAGENPROLIFERATION
.
71
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
75
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
76
8
PUBLIKATIONEN
.
106
9
LEBENSLAUF
.
107
10
EIDESSTATTLICHE
V
ERSICHERUNG
.
108
11
ERKLAERUNG
ZUM
EIGENANTEIL
.
109
12
DANKSAGUNG
.
110 |
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