Optische Bildgebung und Genexpressionsanalyse von Markerproteinen der endothelialen Dysfunktion:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Münster
2022
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| Beschreibung: | 92, IX Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
...........................................................................................................
4
TABELLENVERZEICHNIS
...............................................................................................................
6
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.........................................................................................................
7
1
EINLEITUNG
.........................................................................................................................
10
1.1
ATHEROSKLEROSE
....................................................................................................
10
1.2
ENDOTHELIALE
DYSFUNKTION
....................................................................................
11
1.2.1
PHYSIOLOGISCHE
ENDOTHELFUNKTION
...............................................................
11
1.2.2
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
......................................
12
1.3
INTEGRIN
......................................................................................................................
13
1.4
WEITERE
MARKERPROTEINE
ENDOTHELIALER
DYSFUNKTION
................................................
16
1.5
INTEGRIN
A
V
SS3-SPEZIFISCHE
MOLEKULARE
BILDGEBUNG
...................................................
17
1.6
ZIELSETZUNG
................................................................................................................
19
2
MATERIAL
UND
METHODEN
..................................................................................................
20
2.1
IN-VIVO-VERSUCHE
.......................................................................................................
20
2.1.1
CUFF-IMPLANTATION
................................................................................................
20
2.1.2
OPTISCHE
BILDGEBUNG
.........................................................................................
21
2.1.2.1
FLUORESZENZ-REFLEKTIONS-BILDGEBUNG
-
FRI
..............................................
21
2.1.2.2
FLUORESZENZVERMITTELTE
TOMOGRAPHIE
-
FMT
...........................................22
2.1.2.3
MULTISPEKTRAELE
OPTOAKUSTISCHE
TOMOGRAPHIE
-
MSOT
............................
23
2.1.2.4
OPTISCHE
KONTRASTMITTEL
..............................................................................
24
2.1.3
VERSUCHSTIERE
.....................................................................................................25
2.1.4
MONITORING
UND
BILDGEBUNGSZEITPUNKTE
............................................................25
2.1.5
VERSUCHSENDPUNKT
.............................................................................................
27
2.2
EX-VIVO-VERSUCHE
......................................................................................................28
2.2.1
GENEXPRESSIONSANALYSE
....................................................................................
28
2.2.1.1
RNA-ISOLIERUNG
...........................................................................................
28
2.2.1.2
PRIMER-VALIDIERUNGEN
..................................................................................
29
2.2.1.2.1
REVERSE
TRANSKRIPTION
.........................................................................
29
2.2.1.2.2
GRADIENTEN-PCR
..................................................................................30
2.2.1.3
QUANTITATIVE
REVERSE-TRANSKRIPTASE-POLYMERASE-KETTENREAKTION
(QRT
PCR)
.........................................................................................................................30
2.2.1.4
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.........................................................................32
2.2.2
HISTOLOGIE
............................................................................................................32
2.2.2.1
ELASTICA-VAN-GIESON-FAERBUNG
...................................................................
33
2.2.2.2
IMMUNHISTOCHEMIE
(IHC)
......................................
35
2.2.2.2.1
INTEGRIN
SSS-FAERBUNG
.............................................................................
35
2.2.2.2.2
CD68-A-SMA-DAPI-FAERBUNG
.............................................................
38
2.3
STATISTIK
......................................................................................................................39
3
ERGEBNISSE
.......................................................................................................................
40
3.1
OPTISCHE
BILDGEBUNG
.................................................................................................
40
3.1.1
FLUORESZENZ-REFLEKTIONS-BILDGEBUNG
-
FRI
....................................................
40
3.1.1.1
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSA-CY5.5
IN
VIVO
....................................................
40
3.1.1.2
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSA-CY5.5
EX
VIVO
MIT
BELASSENEM
CUFF
...............
42
3.1.1.3
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSS-CY5.5
EX
VIVO
MIT
ZUVOR
ENTFERNTEM
CUFF
.......42
3.1.2
FLUORESZENZVERMITTELTE
TOMOGRAPHIE
-
FMT
..................................................
43
3.1.3
MULTISPEKTRALE
OPTOAKUSTISCHE
TOMOGRAPHIE
-
MSOT
....................................
44
3.2
GENEXPRESSIONSANALYSE
...........................................................................................
46
3.2.1
PRIMER-VALIDIERUNGEN
.........................................................................................
46
3.2.1.1
GRADIENTEN-PCR
.........................................................................................
46
3.2.1.2RT-KONTROLLE
.............................................................................................
47
3.2.2
VERHALTEN
DER
GENEXPRESSION
DER
INTEGRINE
IN
DER
QRT-PCR
........................
48
3.2.3
VERHALTEN
DER
GENEXPRESSION
DES
A-SMA
IN
DER
QRT-PCR
..........................
49
3.3
HISTOLOGIE
...................................................................................................................
51
3.3.1
ELASTICA-VAN-GIESON-FAERBUNG
...........................................................................
51
3.3.2
INTEGRIN
SSA-FAERBUNG
...........................................................................................54
3.3.3
CD68-A-SMA-DAPI-FAERBUNG
............................................................................55
4
DISKUSSION
.......................................................................................................................
58
4.1
ERGEBNISZUSAMMENFASSUNG
.....................................................................................58
4.2
CUFF-IMPLANTATION
ALS
MODELL
EINER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
..............................
59
4.3
INTEGRIN
AVSS3
ALS
ZIELPROTEIN
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
...................................
61
4.3.1
INTEGRIN
AVSS3
IN
DER
MOLEKULAREN
BILDGEBUNG
...................................................62
4.3.1.1
OPTISCHE
BILDGEBUNG:
FRI
UND
FMT
..........................................................62
4.3.1.2
OPTOAKUSTISCHE
BILDGEBUNG:
MSOT
..........................................................63
4.3.1.3
FRI,
FMT
UND
MSOT
IM
VERGLEICH
MIT
ANDEREN
MODALITAETEN
.................65
4.4
MARKERPROTEINE
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
......................................................66
4.4.1
INTEGRIN
...............................................................................................................66
4.4.2
INTEGRIN
...............................................................................................................67
4.4.3
A-SMA
.................................................................................................................
69
4.4.4
CD68
...................................................................................................................70
4.5
INTEGRIN
A
V
SS3-REZEPTORBLOCKADE
ALS
THERAPIEOPTION
...............................................
73
4.6
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
AUSBLICK
...............................................................................
74
5
LITERATURVERZEICHNIS
.......................................................................................................75
7
DANKSAGUNG
....................................................................................................................
91
8
CURRICULUM
VITAE
.............................................................................................................92
ANHANG
....................................................................................................................................
I
GENEHMIGUNG
DER
FUER
DIE
ARBEIT
DURCHGEFUEHRTEN
TIERVERSUCHE
..........................................
I
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
4
TABELLENVERZEICHNIS
.
6
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
7
1
EINLEITUNG
.
10
1.1
ATHEROSKLEROSE
.
10
1.2
ENDOTHELIALE
DYSFUNKTION
.
11
1.2.1
PHYSIOLOGISCHE
ENDOTHELFUNKTION
.
11
1.2.2
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
.
12
1.3
INTEGRIN
.
13
1.4
WEITERE
MARKERPROTEINE
ENDOTHELIALER
DYSFUNKTION
.
16
1.5
INTEGRIN
A
V
SS3-SPEZIFISCHE
MOLEKULARE
BILDGEBUNG
.
17
1.6
ZIELSETZUNG
.
19
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
20
2.1
IN-VIVO-VERSUCHE
.
20
2.1.1
CUFF-IMPLANTATION
.
20
2.1.2
OPTISCHE
BILDGEBUNG
.
21
2.1.2.1
FLUORESZENZ-REFLEKTIONS-BILDGEBUNG
-
FRI
.
21
2.1.2.2
FLUORESZENZVERMITTELTE
TOMOGRAPHIE
-
FMT
.22
2.1.2.3
MULTISPEKTRAELE
OPTOAKUSTISCHE
TOMOGRAPHIE
-
MSOT
.
23
2.1.2.4
OPTISCHE
KONTRASTMITTEL
.
24
2.1.3
VERSUCHSTIERE
.25
2.1.4
MONITORING
UND
BILDGEBUNGSZEITPUNKTE
.25
2.1.5
VERSUCHSENDPUNKT
.
27
2.2
EX-VIVO-VERSUCHE
.28
2.2.1
GENEXPRESSIONSANALYSE
.
28
2.2.1.1
RNA-ISOLIERUNG
.
28
2.2.1.2
PRIMER-VALIDIERUNGEN
.
29
2.2.1.2.1
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
29
2.2.1.2.2
GRADIENTEN-PCR
.30
2.2.1.3
QUANTITATIVE
REVERSE-TRANSKRIPTASE-POLYMERASE-KETTENREAKTION
(QRT
PCR)
.30
2.2.1.4
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.32
2.2.2
HISTOLOGIE
.32
2.2.2.1
ELASTICA-VAN-GIESON-FAERBUNG
.
33
2.2.2.2
IMMUNHISTOCHEMIE
(IHC)
.
35
2.2.2.2.1
INTEGRIN
SSS-FAERBUNG
.
35
2.2.2.2.2
CD68-A-SMA-DAPI-FAERBUNG
.
38
2.3
STATISTIK
.39
3
ERGEBNISSE
.
40
3.1
OPTISCHE
BILDGEBUNG
.
40
3.1.1
FLUORESZENZ-REFLEKTIONS-BILDGEBUNG
-
FRI
.
40
3.1.1.1
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSA-CY5.5
IN
VIVO
.
40
3.1.1.2
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSA-CY5.5
EX
VIVO
MIT
BELASSENEM
CUFF
.
42
3.1.1.3
SIGNALVERHALTEN
VON
AVSSS-CY5.5
EX
VIVO
MIT
ZUVOR
ENTFERNTEM
CUFF
.42
3.1.2
FLUORESZENZVERMITTELTE
TOMOGRAPHIE
-
FMT
.
43
3.1.3
MULTISPEKTRALE
OPTOAKUSTISCHE
TOMOGRAPHIE
-
MSOT
.
44
3.2
GENEXPRESSIONSANALYSE
.
46
3.2.1
PRIMER-VALIDIERUNGEN
.
46
3.2.1.1
GRADIENTEN-PCR
.
46
3.2.1.2RT-KONTROLLE
.
47
3.2.2
VERHALTEN
DER
GENEXPRESSION
DER
INTEGRINE
IN
DER
QRT-PCR
.
48
3.2.3
VERHALTEN
DER
GENEXPRESSION
DES
A-SMA
IN
DER
QRT-PCR
.
49
3.3
HISTOLOGIE
.
51
3.3.1
ELASTICA-VAN-GIESON-FAERBUNG
.
51
3.3.2
INTEGRIN
SSA-FAERBUNG
.54
3.3.3
CD68-A-SMA-DAPI-FAERBUNG
.55
4
DISKUSSION
.
58
4.1
ERGEBNISZUSAMMENFASSUNG
.58
4.2
CUFF-IMPLANTATION
ALS
MODELL
EINER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
.
59
4.3
INTEGRIN
AVSS3
ALS
ZIELPROTEIN
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
.
61
4.3.1
INTEGRIN
AVSS3
IN
DER
MOLEKULAREN
BILDGEBUNG
.62
4.3.1.1
OPTISCHE
BILDGEBUNG:
FRI
UND
FMT
.62
4.3.1.2
OPTOAKUSTISCHE
BILDGEBUNG:
MSOT
.63
4.3.1.3
FRI,
FMT
UND
MSOT
IM
VERGLEICH
MIT
ANDEREN
MODALITAETEN
.65
4.4
MARKERPROTEINE
DER
ENDOTHELIALEN
DYSFUNKTION
.66
4.4.1
INTEGRIN
.66
4.4.2
INTEGRIN
.67
4.4.3
A-SMA
.
69
4.4.4
CD68
.70
4.5
INTEGRIN
A
V
SS3-REZEPTORBLOCKADE
ALS
THERAPIEOPTION
.
73
4.6
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
AUSBLICK
.
74
5
LITERATURVERZEICHNIS
.75
7
DANKSAGUNG
.
91
8
CURRICULUM
VITAE
.92
ANHANG
.
I
GENEHMIGUNG
DER
FUER
DIE
ARBEIT
DURCHGEFUEHRTEN
TIERVERSUCHE
.
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