Einfluss einer Patientenmutation auf die transkriptionelle Aktivität von HNF1β:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2021]
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| Schlagworte: | |
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| Beschreibung: | 84 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.............................................................................................................
II
1
EINLEITUNG
.................................................................................................................
4
1.1
HNFLSS
ALS
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
.......................................................................
4
1.2
.
DIE
ROLLE
VON
HNFLSS
IN
DER
NIERENENTWICKLUNG
................................
6
1.3
.
HNFIB-MUTATIONEN
ALS
MULTI-SYSTEM
ERKRANKUNG
.............................
9
1.4
REPROGRAMMIEREN
ZU
IRECS
............................................................................
14
1.5
ANIMAL
CAP
ASSAY
MIT
XENOPUS
LAEVIS
EXPLANTATEN
........................................
16
1.6
ZIEL
DIESER
DISSERTATION
....................................................................................
17
2
MATERIAL
UND
METHODEN
..........................................................................................
18
2.1
.
CLONING
................................................................................................
18
2.2
WESTERN
BLOT
....................................................................................................
22
2.3
ZELLKULTUR
UND
LENTIVIRALE
TRANSDUKTION
..........................................................
23
2.4
.
SELEKTION
DER
ERFOLGREICH
REPROGRAMMIERTEN
ZELLEN
...........................
28
2.5
.
ANIMAL
CAP
ASSAY
..............................................................................
29
2.6
RNA-SEQUENCING
UND
AUSWERTUNG
..................................................................
34
3
ERGEBNISSE
.............................................................................................................
35
3.1
HNFLSS
MUTATIONEN
IN
DEN
IRECS
...................................................................
35
3.1.1
DIE
ACHT
AUSGEWAEHLTEN
MUTATIONEN
WURDEN
IN
HNF1B
UEBERNOMMEN
.........
35
3.1.2
HNFLSS
WIRD
MIT
UND
OHNE
MUTATION
VON
HEK293T
ZELLEN
EXPRIMIERT
......
36
3.1.3
DIE
MUTATION
HNF1B
ARG295CYS
HAT
VON
DEN
MUTATIONEN
DIE
HOECHSTE
KONVERSIONSRATE
ZU
IRECS
......................................................................
37
3.1.4
MUTATION
R295C
IN
HNFLSS
HAT
QUALITATIVE
AUSWIRKUNGEN
AUF
DIE
IRECS.
..39
3.1.5
MUTATION
R295C
IN
HNF1B
HAT
EINEN
EINFLUSS
AUF
DIE
REGULATION
NIERENPATHOLOGISCHER
GENE
......................................................................
46
3.2
HNF1
SS
-INDUKTION
IN
DEN
ANIMAL
CAPS
.........................................................
48
3.2.1
DER
INJIZIERTE
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
WIRD
VON
DEN
INJIZIERTEN
EMBRYONEN
EXPRIMIERT
................................................................................................
48
3.2.2
DIE
ANIMAL
CAPS
EXPRIMIEREN
RENALES
GEWEBE
NACH
INJEKTION
VON
HNF1B
MRNA
....................................................................................................
49
3.2.3
DIE
R295C
HNF1B
UND
DIE
HNF1B-WT
INJIZIERTEN
CAPS
UNTERSCHEIDEN
SICH
IN
IHREM
TRANSKRIPTIONSPROFIL
...................................................
52
3.2.4
EINFLUSS
VON
R295C
AUF
DIE
ROLLE
VON
HNFLSS
IN
DER
AUSBILDUNG
VON
PRONEPHROSGEWEBE
.................................................................................
53
3.2.5
DIE
VERAENDERTE
REGULATION
NIERENPATHOLOGISCHER
GENE
LAESST
SICH
IN
DEN
CAPS
TEILWEISE
BESTAETIGEN
................................................................................
54
4
DISKUSSION
.............................................................................................................
56
4.1
IRECS:
EINE
NEUE
METHODE
UM
MUTATIONEN
IN
HNFLSS
ZU
UNTERSUCHEN
..........
56
4.2
DIE
ANDEREN
SIEBEN
MUTATIONEN
KONNTEN
ZU
KEINER
RELEVANTEN
KONVERSION
ZU
IRECS
FUHREN
............................................................................................
57
4.3
DIE
DURCH
R295C
HNFLSS
GENERIERTEN
IRECS
EXPRIMIEREN
RENALE
MARKERGENE
IN
REDUZIERTEM
MASS
...................................................................
58
4.4
DER
PHAENOTYP
VON
HETEROZYGOTEN
MUTATIONSTRAEGERN
KANN
TEILWEISE
DURCH
DIE
TRANSKRIPTOMANALYSE
ERKLAERT
WERDEN
........................................................
59
4.5
IRECS
UND
KAPPEN
IM
VERGLEICH
.....................................................................
61
4.6
ES
LIESS
SICH
DURCH
INJEKTION
VON
HNF1B
PRONEPHROSGEWEBE
IN
DEN
ANIMAL
CAPS
INDUZIEREN
........................................................................................
62
4.7
DIE
MUTIERTEN
IRECS
ZEIGEN
EINE
AUSSERGEWOEHNLICH
STARKE
ADHAESION
AN
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
................................................................................
63
ZUSAMMENFASSUNG
..........................................................................................................
64
ANHANG
............................................................................................................................
65
LITERATURVERZEICHNIS
.........................................................................................................
75
DANKSAGUNG
.....................................................................................................................
81
LEBENSLAUF
.......................................................................................................................
82
ERKLAERUNG
ZUM
EIGENANTEIL
.............................................................................................
83
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
................................................................................................
84
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.
II
1
EINLEITUNG
.
4
1.1
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ALS
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
.
4
1.2
.
DIE
ROLLE
VON
HNFLSS
IN
DER
NIERENENTWICKLUNG
.
6
1.3
.
HNFIB-MUTATIONEN
ALS
MULTI-SYSTEM
ERKRANKUNG
.
9
1.4
REPROGRAMMIEREN
ZU
IRECS
.
14
1.5
ANIMAL
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ASSAY
MIT
XENOPUS
LAEVIS
EXPLANTATEN
.
16
1.6
ZIEL
DIESER
DISSERTATION
.
17
2
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18
2.1
.
CLONING
.
18
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.
22
2.3
ZELLKULTUR
UND
LENTIVIRALE
TRANSDUKTION
.
23
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SELEKTION
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ERFOLGREICH
REPROGRAMMIERTEN
ZELLEN
.
28
2.5
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.
29
2.6
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UND
AUSWERTUNG
.
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3
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35
3.1
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MUTATIONEN
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IRECS
.
35
3.1.1
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AUSGEWAEHLTEN
MUTATIONEN
WURDEN
IN
HNF1B
UEBERNOMMEN
.
35
3.1.2
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MIT
UND
OHNE
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HEK293T
ZELLEN
EXPRIMIERT
.
36
3.1.3
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VON
DEN
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DIE
HOECHSTE
KONVERSIONSRATE
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IRECS
.
37
3.1.4
MUTATION
R295C
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HNFLSS
HAT
QUALITATIVE
AUSWIRKUNGEN
AUF
DIE
IRECS.
.39
3.1.5
MUTATION
R295C
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HNF1B
HAT
EINEN
EINFLUSS
AUF
DIE
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NIERENPATHOLOGISCHER
GENE
.
46
3.2
HNF1
SS
-INDUKTION
IN
DEN
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.
48
3.2.1
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INJIZIERTE
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
WIRD
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DEN
INJIZIERTEN
EMBRYONEN
EXPRIMIERT
.
48
3.2.2
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EXPRIMIEREN
RENALES
GEWEBE
NACH
INJEKTION
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HNF1B
MRNA
.
49
3.2.3
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R295C
HNF1B
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INJIZIERTEN
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UNTERSCHEIDEN
SICH
IN
IHREM
TRANSKRIPTIONSPROFIL
.
52
3.2.4
EINFLUSS
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R295C
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ROLLE
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HNFLSS
IN
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AUSBILDUNG
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PRONEPHROSGEWEBE
.
53
3.2.5
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VERAENDERTE
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NIERENPATHOLOGISCHER
GENE
LAESST
SICH
IN
DEN
CAPS
TEILWEISE
BESTAETIGEN
.
54
4
DISKUSSION
.
56
4.1
IRECS:
EINE
NEUE
METHODE
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MUTATIONEN
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HNFLSS
ZU
UNTERSUCHEN
.
56
4.2
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RELEVANTEN
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IRECS
FUHREN
.
57
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REDUZIERTEM
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.
58
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KAPPEN
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VERGLEICH
.
61
4.6
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HNF1B
PRONEPHROSGEWEBE
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DEN
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INDUZIEREN
.
62
4.7
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IRECS
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EINE
AUSSERGEWOEHNLICH
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ADHAESION
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EXTRAZELLULAERE
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.
63
ZUSAMMENFASSUNG
.
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.
65
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.
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.
81
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