Verfügbarkeit: Untersuchung der Antibiotika Suszeptibilität von Staphylococcus aureus "Small Colony Variants" unter Einfluss von MEK-Inhibitoren

Untersuchung der Antibiotika Suszeptibilität von Staphylococcus aureus "Small Colony Variants" unter Einfluss von MEK-Inhibitoren:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Lenz, Eileen Esther 1997- (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Münster 2022
Schlagworte:	Staphylococcus aureus Hochschulschrift
Online-Zugang:	Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis
Beschreibung:	109 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm

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Datensatz im Suchindex

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG .............................................................................................................. 1 1.1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS WT ...................................................................................................... 1 1.1.1 STRUKTURELLER AUFBAU DER S. AUREUS ZELLE .............................................................................................. 2 1.1.2 VIRULENZ UND RESISTENZFAKTOREN VON S. AUREUS ................................................................................... 3 1.2 S. AUREUS SMALL COLONY VARIANT (SCV) ..................................................................................... 3 1.2.1 MORPHOLOGIE UND WACHSTUM DER S. AUREUS SCVS ................................................................................ 4 1.2.2 INDUKTION UND VIRULENZ DER S. AUREUS SCV ........................................................................................... 5 1.2.3 S. AUREUS SCV ASSOZIIERTE ERKRANKUNGEN (OSTEOMYELITIS) ................................................................... 6 1.2.4 ANTIBIOTIKASUSZEPTIBILITAET BEI S. AUREUS SCVS ...................................................................................... 7 1.3 INFLUENZAVIRUS UND S. AUREUS WT BEI KOINFEKTIONEN IM MENSCHEN .......................................... 8 1.4 DIE ............................................................................................................................................ 9 1.4.1 MEK-INHIBITOREN ................................................................................................................................. 10 1.5 DIE SERIN/ THREONIN KINASE PKNB ........................................................................................... 12 1.6 THERAPIEANSAETZE UND PRAEVENTION DER S. AUREUS WT/ SCV INFEKTION ...................................... 12 1.6.1 THERAPIESTRATEGIEN BEI S. AUREUS INFEKTIONEN .................................................................................... 13 1.6.2 THERAPIESTRATEGIEN BEI S. AUREUS SCV INFEKTIONEN ............................................................................ 13 1.7 ZIELSETZUNG ............................................................................................................................. 14 2 MATERIAL ...................................................... 16 2.1 CHEMIKALIEN ............................................................................................................................ 16 2.2 INHIBITOREN ................................................................................................................................ 18 2.3 VERWENDETE MEDIEN UND PUFFER .............................................................................................. 18 2.4 KIT ............................................................................................................................................ 21 2.5 ZELLLINIE ................................................................................................................................... 21 2.6 BAKTERIENSTAEMME .................................................................................................................... 22 2.7 ANTIKOERPER ............................................................................................................................... 22 2.7.1 PRIMAERE ANTIKOERPER ............................................................................................................................. 22 2.7.2 SEKUNDAERE ANTIKOERPER ......................................................................................................................... 23 2.8 VERBRAUCHSMATERIALIEN UND GERAETE ........................................................................................ 23 2.9 VERWENDETE ANTIBIOTIKATESTSTREIFEN: M. I. C. EVALUATOR STRIPS ................................................. 26 3 METHODEN ............................................................................................................. 26 3.1 KULTIVIERUNG UND KRYOKONSERVIERUNG PROKARYOTISCHER ZELLEN .................................................. 26 3.2 TRUEBUNGS UND WACHSTUMSTEST VON BAKTERIEN IN ANWESENHEIT SPEZIFISCHER MEK-INHIBITOREN (ATR-002, CI-1040, U0126) ....................................................................... 27 3.3 SENSITIVITAETSTESTUNG ................................................................................................................. 28 3.4 BESTIMMUNG DER WIRKUNG VON ATR-002 AUF DIE BAKTERIENANZAHLEN IN VERSCHIEDENEN MEDIEN ........................................................................................................... 28 3.5 BAKTERIELLE INFEKTION IN A549-ZELLEN ........................................................................................ 29 3.6 BESTIMMUNG DER BAKTERIENTITER IM ZELLULAEREN SYSTEM ............................................................. 30 3.7 LDH-ASSAY ........................................................................................................................... 30 3.8 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN - PROTEINE ........................................................................... 31 3.8.1 HERSTELLUNG DER PROTEINLYSATE ............................................................................................................ 31 3.8.2 NATRIUMLAURYLSULFAT-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SODIUM DODECYL SULFATE POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS-, SDS-PAGE) ............................................................................... 32 3.8.3 WESTERN BLOT ..................................................................................................................................... 32 3.9 BESTIMMUNG DES PH-WERTES VERSCHIEDENER MEDIEN IN AN UND ABWESENHEIT VON ATR-002 33 3.10 WIRKUNG VON ATR-002 IM BAKTERIENMEDIUM UNTER ZUGABE VON HUMANEM SERUMALBUMIN. ..33 3.11 BESTIMMUNG DER MINIMALEN HEMMKONZENTRATION .................................................................. 34 3.12 STATISTISCHE ANALYSEN ............................................................................................................. 34 4 ERGEBNISSE .......................................................................................................... 35 4.1 DIE S. AUREUS SCV 3878 BILDET KLEINERE KOLONIEN ALS DER S. AUREUS WT 3878 ..................... 35 4.2 DIE ANWESENHEIT DES MEK-INHIBITORS ATR-002 BEWIRKT DIE REDUKTION DER OPTISCHEN DICHTE IN DEN BAKTERIENSUSPENSIONEN.................................................................................... 36 4.3 IN ANWESENHEIT VON ATR-002 IST DAS BAKTERIENWACHSTUM REDUZIERT ..................................... 39 4.4 DER S. AUREUS WT 3878 UND DIE S. AUREUS SCV 3878 ZEIGEN KEINE DESENSITIVIERUNG GEGENUEBER DEN MEK-INHIBITOREN .............................................................................. 41 4.5 DIE BEHANDLUNG MIT MEK-INHIBITOREN BEWIRKT KEINE KREUZDESENSIBILISIERUNG BEI DER S. AUREUS SCV 3878 ............................................................................................................. 46 4.6 ATR-002 BEWIRKT EINE REDUKTION DER BAKTERIENTITER - UNABHAENGIG VOM GETESTETEN BAKTERIENMEDIUM ................................................................................................................... 50 4.7 EINE ERHOEHUNG DER INFEKTIONSDOSIS DES S. AUREUS WT 3878 UND DER S. AUREUS SCV 3878 FUEHRT ZU VERMEHRTER BAKTERIENLAST IM A549-ZELLSYSTEM ............................................ 53 4.8 DER S. AUREUS WT 3878 INDUZIERT MIKROSKOPISCH EINEN GROESSEREN ZYTOPATHISCHEN EFFEKT ALS DIE S. AUREUS SCV 3878 ....................................................................................... 56 4.9 DIE BEHANDLUNG MIT DEM MEK-INHIBITOR ATR-002 RESULTIERT NICHT IN EINER REDUKTION DES BAKTERIENWACHSTUMS IN A549-ZELLEN 8 H NACH INFEKTION ........................................... 58 4.10 ATR-002 HAT KEINEN EFFEKT AUF DIE BAKTERIENLAST IM ZELLULAEREN SYSTEM 24 H NACH INFEKTION .62 4.11 INFEKTION MIT S. AUREUS WT 3878 FUEHRT ZU EINER HOEHEREN LDH-FREISETZUNG IM VERGLEICH ZUR INFEKTION MIT S. AUREUS SCV 3878 ........................................................................ 65 4.12 ATR-002 (10 PM UND 20 PM) FUEHRT ZU EINER DEPHOSPHORYLIERUNG VON P-ERK ...................... 67 4.13 ATR-002 ZEIGT KEINEN ANTIBAKTERIELLEN EFFEKT IM INVASIONS-/ INFEKTIONS UND ME-MEDIUM ....69 4.14 DIE BAKTERIEN UND ZELLKULTURMEDIEN ZEIGEN EINEN AEHNLICHEN PH-WERT UNABHAENGIG VON DER DMSO BZW. ATR-002 SUBSTITUTION ...................................................................... 72 4.15 ATR-002 ZEIGT EINEN BAKTERIENTITER REDUZIERENDEN EFFEKT IN DREI WEITEREN ZELLKULTURMEDIEN. 73 4.16 HSA REDUZIERT DEN ANTIBAKTERIELLEN EFFEKT VON ATR-002 ....................................................... 76 4.17 UNTERSUCHUNG DER ANTIBIOTIKA SUSZEPTIBILITAET VON S. AUREUS SCV 3878 UNTER DEM EINFLUSS VON MEK-INHIBITOREN ............................................................................................... 79 4.17.1 U0126 AENDERT NICHT DIE SUSZEPTIBILITAET VON S. AUREUS WT 3878 UND S. AUREUS SCV 3878 GEGENUEBER ANTIBIOTIKA ................................................................................................................ 79 4.17.2 ATR-002 INDUZIERT EINE STEIGERUNG DER ANTIBIOTIKASUSZEPTIBILITAET DER S. AUREUS SCV 3878 GEGENUEBER VANCOMYCIN UND LINEZOLID ......................................................................................... 82 5 DISKUSSION .......................................................................................................... 86 5.1 PHAENOTYPISCHE UNTERSCHIEDE ZWISCHEN DEM S. AUREUS WT 3878 UND DER S. AUREUS SCV 3878 .............................................................................................................. 87 5.2 MEK-INHIBITOREN ALS ANTIPATHOGENE SUBSTANZEN BEI DEM S. AUREUS WT 3878 UND DER S. AUREUS SCV 3878 .............................................................................................................. 88 5.2.1 ANTIPATHOGENE WIRKUNG VON ATR-002 IN PROKARYOTEN UND ZELLKULTUR-MEDIEN .................................. 91 5.2.2 ANTIPATHOGENE WIRKUNG VON ATR-002 IM ZELLULAEREN SYSTEM ............................................................. 91 5.2.3 ATR-002 ZEIGT IM ZELLULAEREN SYSTEM EINEN INAKTIVIERENDEN EFFEKT AUF P-ERK ................................. 93 5.3 VERAENDERUNG DER ANTIBIOTIKA-SUSZEPTIBILITAET UNTER DEM EINFLUSS VON MEK-INHIBITOREN .......... 94 5.3.1 VERAENDERUNG DER ANTIBIOTIKA-SUSZEPTIBILITAET UNTER DEM EINFLUSS VON U0126 .................................... 94 5.3.2 VERAENDERUNG DER ANTIBIOTIKA-SUSZEPTIBILITAET UNTER DEM EINFLUSS VON ATR-002 ................................ 95 5.4 AUSBLICK ................................................................................................................................... 97 6 LITERATURVERZEICHNIS ............................................................................................ 98 7 DANKSAGUNG ...................................................................................................... 106 8 LEBENSLAUF ......................................................................................................... 107
adam_txt	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG . 1 1.1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS WT . 1 1.1.1 STRUKTURELLER AUFBAU DER S. AUREUS ZELLE . 2 1.1.2 VIRULENZ UND RESISTENZFAKTOREN VON S. AUREUS . 3 1.2 S. AUREUS SMALL COLONY VARIANT (SCV) . 3 1.2.1 MORPHOLOGIE UND WACHSTUM DER S. AUREUS SCVS . 4 1.2.2 INDUKTION UND VIRULENZ DER S. AUREUS SCV . 5 1.2.3 S. AUREUS SCV ASSOZIIERTE ERKRANKUNGEN (OSTEOMYELITIS) . 6 1.2.4 ANTIBIOTIKASUSZEPTIBILITAET BEI S. AUREUS SCVS . 7 1.3 INFLUENZAVIRUS UND S. AUREUS WT BEI KOINFEKTIONEN IM MENSCHEN . 8 1.4 DIE . 9 1.4.1 MEK-INHIBITOREN . 10 1.5 DIE SERIN/ THREONIN KINASE PKNB . 12 1.6 THERAPIEANSAETZE UND PRAEVENTION DER S. AUREUS WT/ SCV INFEKTION . 12 1.6.1 THERAPIESTRATEGIEN BEI S. AUREUS INFEKTIONEN . 13 1.6.2 THERAPIESTRATEGIEN BEI S. 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EVALUATOR STRIPS . 26 3 METHODEN . 26 3.1 KULTIVIERUNG UND KRYOKONSERVIERUNG PROKARYOTISCHER ZELLEN . 26 3.2 TRUEBUNGS UND WACHSTUMSTEST VON BAKTERIEN IN ANWESENHEIT SPEZIFISCHER MEK-INHIBITOREN (ATR-002, CI-1040, U0126) . 27 3.3 SENSITIVITAETSTESTUNG . 28 3.4 BESTIMMUNG DER WIRKUNG VON ATR-002 AUF DIE BAKTERIENANZAHLEN IN VERSCHIEDENEN MEDIEN . 28 3.5 BAKTERIELLE INFEKTION IN A549-ZELLEN . 29 3.6 BESTIMMUNG DER BAKTERIENTITER IM ZELLULAEREN SYSTEM . 30 3.7 LDH-ASSAY . 30 3.8 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN - PROTEINE . 31 3.8.1 HERSTELLUNG DER PROTEINLYSATE . 31 3.8.2 NATRIUMLAURYLSULFAT-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SODIUM DODECYL SULFATE POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS-, SDS-PAGE) . 32 3.8.3 WESTERN BLOT . 32 3.9 BESTIMMUNG DES PH-WERTES VERSCHIEDENER MEDIEN IN AN UND ABWESENHEIT VON ATR-002 33 3.10 WIRKUNG VON ATR-002 IM BAKTERIENMEDIUM UNTER ZUGABE VON HUMANEM SERUMALBUMIN. .33 3.11 BESTIMMUNG DER MINIMALEN HEMMKONZENTRATION . 34 3.12 STATISTISCHE ANALYSEN . 34 4 ERGEBNISSE . 35 4.1 DIE S. 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