Optimierung der dynamischen In-vitro-3D-Wachstumsbedingungen für Stammzellen des parodontalen Ligaments zur Differenzierung in Alveolarknochenzellen:
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[2021]
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
UND
ZIELSETZUNG
...............................................................................................................
1
2.
STAND
DER
ERKENNTNISSE
.....................................................................................................................2
2.1.
PARODONTALES
LIGAMENT
..................................................................................................................
2
2.2.
PARODONTALE
HOMOEOSTASE
BEI
DER
ORTHODONTISCHEN
ZAHNBEWEGUNG
............................................
3
2.3.
MECHANISCHE
BEANSPRUCHUNG
VON
GEWEBEN
...............................................................................
4
2.4.
EINFLUSS
VON
MECHANISCHER
BEANSPRUCHUNG
AUF
DAS
REMODELLING
IM
PARODONTALEN
LIGAMENT
...
7
2.5.
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
VON
HUMANEN
PARODONTALEN
FIBROBLASTEN
........................................
8
2.6.
ALGINATE
...........................................................................................................................................
9
2.7.
FOKALE
ADHAESIONEN
........................................................................................................................
10
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
..................................................................................................................
12
3.1.
VORBEREITEN
DER
STAMMLOESUNGEN
................................................................................................
12
3.2.
AUFBAU
ZUGVERSUCH
.......................................................................................................................
13
3.3.
ZELLBIOLOGISCHE
ARBEITEN
...............................................................................................................
14
3.3.1.
ZELLKULTURMEDIEN
...................................................................................................................
14
3.3.2.
KULTIVIERUNG
DER
HPDLF-ZELLEN
...............................................................................................
15
3.3.3.
SUBKULTIVIERUNG
DER
HPDLF-ZELLEN
.........................................................................................
15
3.3.4.
EINFRIEREN
DER
HPDLF-ZELLEN
..................................................................................................
16
3.3.5.
AUFTAUEN
DER
HPDLF
ZELLEN
..................................................................................................
16
3.4.
VORVERSUCHE
ZUR
ENTWICKLUNG
DES
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELS
..................................................
16
3.5.
VORBEREITUNG
DER
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELPROBEN
..................................................................
19
3.5.1.
HERSTELLUNG
DES
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELS
.......................................................................
19
3.5.2.
DYNAMISCHE
UND
STATISCHE
KULTIVIERUNG
DER
(ZELLBELADENEN)
HYDROGELPROBEN
...................
21
3.5.3.
SCHNEIDEN
DER
HYDROGELPROBEN
............................................................................................
22
3.6.
VERWENDETE
ASSAYS
UND
FAERBUNGEN
............................................................................................
22
3.6.1.
LEBEND-TOT-FAERBUNG
..............................................................................................................
22
3.6.2.
PROLIFERATIONSASSAY
................................................................................................................
23
3.6.3.
HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG
.................................................................................................
24
3.6.4.
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
...................................................................................................
24
3.7.
KONFOKALMIKROSKOPIE
....................................................................................................................
25
3.8.
OPTIMIERUNG
DER
WACHSTUMSBEDINGUNGEN
VON
HPDLF-ZELLEN
IN
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGEL....
25
3.9.
STATISTISCHE
ANALYSE
......................................................................................................................
30
4.
ERGEBNISSE
.........................................................................................................................................
31
4.1.
RESULTATE
DES
ZUGVERSUCHS...........................................................................................................
31
4.2.
ERGEBNISSE
DER
VOREXPERIMENTE
ZUR
HERSTELLUNG
VON
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGEL
......................
32
4.3.
ETABLIERUNG
DER
IMMUNOHISTOLOGISCHEN
FAERBUNG.........................................................................
33
4.4.
ZELLBIOLOGISCHE
RESULTATE
.............................................................................................................
34
III
5.
DISKUSSION
..........................................................................................................................................
51
6.
ZUSAMMENFASSUNG
............................................................................................................................
57
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.........................................................................................................................
59
8.
ANHANG
................................................................................................................................................
65
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
UND
ZIELSETZUNG
.
1
2.
STAND
DER
ERKENNTNISSE
.2
2.1.
PARODONTALES
LIGAMENT
.
2
2.2.
PARODONTALE
HOMOEOSTASE
BEI
DER
ORTHODONTISCHEN
ZAHNBEWEGUNG
.
3
2.3.
MECHANISCHE
BEANSPRUCHUNG
VON
GEWEBEN
.
4
2.4.
EINFLUSS
VON
MECHANISCHER
BEANSPRUCHUNG
AUF
DAS
REMODELLING
IM
PARODONTALEN
LIGAMENT
.
7
2.5.
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
VON
HUMANEN
PARODONTALEN
FIBROBLASTEN
.
8
2.6.
ALGINATE
.
9
2.7.
FOKALE
ADHAESIONEN
.
10
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
12
3.1.
VORBEREITEN
DER
STAMMLOESUNGEN
.
12
3.2.
AUFBAU
ZUGVERSUCH
.
13
3.3.
ZELLBIOLOGISCHE
ARBEITEN
.
14
3.3.1.
ZELLKULTURMEDIEN
.
14
3.3.2.
KULTIVIERUNG
DER
HPDLF-ZELLEN
.
15
3.3.3.
SUBKULTIVIERUNG
DER
HPDLF-ZELLEN
.
15
3.3.4.
EINFRIEREN
DER
HPDLF-ZELLEN
.
16
3.3.5.
AUFTAUEN
DER
HPDLF
ZELLEN
.
16
3.4.
VORVERSUCHE
ZUR
ENTWICKLUNG
DES
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELS
.
16
3.5.
VORBEREITUNG
DER
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELPROBEN
.
19
3.5.1.
HERSTELLUNG
DES
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGELS
.
19
3.5.2.
DYNAMISCHE
UND
STATISCHE
KULTIVIERUNG
DER
(ZELLBELADENEN)
HYDROGELPROBEN
.
21
3.5.3.
SCHNEIDEN
DER
HYDROGELPROBEN
.
22
3.6.
VERWENDETE
ASSAYS
UND
FAERBUNGEN
.
22
3.6.1.
LEBEND-TOT-FAERBUNG
.
22
3.6.2.
PROLIFERATIONSASSAY
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23
3.6.3.
HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG
.
24
3.6.4.
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
.
24
3.7.
KONFOKALMIKROSKOPIE
.
25
3.8.
OPTIMIERUNG
DER
WACHSTUMSBEDINGUNGEN
VON
HPDLF-ZELLEN
IN
KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGEL.
25
3.9.
STATISTISCHE
ANALYSE
.
30
4.
ERGEBNISSE
.
31
4.1.
RESULTATE
DES
ZUGVERSUCHS.
31
4.2.
ERGEBNISSE
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VOREXPERIMENTE
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HERSTELLUNG
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KOLLAGEN-ALGINAT-HYDROGEL
.
32
4.3.
ETABLIERUNG
DER
IMMUNOHISTOLOGISCHEN
FAERBUNG.
33
4.4.
ZELLBIOLOGISCHE
RESULTATE
.
34
III
5.
DISKUSSION
.
51
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
57
7.
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.
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