Einfluss von Gelatine-Methacryloyl-Hydrogelen auf die Morphologie und osteogene Differenzierung mesenchymaler Stammzellen:
Gespeichert in:
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Aachen
[2021]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
TISSUE
ENGINEERING
..............................................................................
1
1.2
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.............................................................
3
1.3
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
................................................................
6
1.4
EXTRAZELLULAERMATRIX
...........................................................................
7
1.5
HYDROGELE
.........................................................................................
8
1.6
ZIEL
DER
ARBEIT
...................................................................................
10
2
MATERIAL
UND
METHODEN
12
2.1
MATERIALIEN
UND
GERAETE
.....................................................................
12
2.1.1
CHEMIKALIEN
...........................................................................
12
2.1.2
HYDROGELE
..............................................................................
12
2.1.3
VERBRAUCHSMATERIALIEN
..........................................................
13
2.1.4
MEDIEN
...................................................................................
14
2.1.5
KITS
.........................................................................................
15
2.1.6
GERAETE
...................................................................................
15
2.1.7
SOFTWARE
UND
DATENBANKEN
..................................................
16
2.2
VERWENDETE
ZELLTYPEN
.....................................................................
16
2.2.1
L929-ZELLEN
...........................................................................
16
2.2.2
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
...............................................
17
2.3
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
................................................................
17
2.3.1
ISOLATION
DER
ZELLEN
................................................................
17
2.3.2
PASSAGIEREN
VON
ZELLEN
..........................................................
18
2.3.3
KRYOKONSERVIERUNG
VON
ZELLEN
............................................
19
2.3.4
ZELLZAEHLUNG
MITTELS
CASY-1
............................................
20
2.3.5
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
..................................................
20
2.4
ZYTOTOXIZITAETSTESTS
..............................................................................
21
2.4.1
DIREKTER
ZYTOTOXIZITAETSTEST
.....................................................
21
2.4.2
CYTOTOX-ONEYYHOMOGEWEOUS
MEMBRANE
INTEGRITY
ASSAY
...
22
2.5
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
........................................................................
23
2.6
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
..........................................................
24
2.6.1
FIXIERUNG
.............................................................................
24
2.6.2
REM-BILDER
..........................................................................
25
2.6.3
ENERGIEDISPERSIVE
ROENTGENSPEKTROSKOPIE
(EDX)
.................
25
2.7
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
..................................................................
25
3
ERGEBNISSE
26
3.1
VITALITAET
DER
ZELLEN
..........................................................................
26
3.1.1
LEBEND-TOT-FAERBUNG
.............................................................
26
3.1.2
ZELLZAHL
................................................................................
29
3.1.3
ZYTOTOXIZITAETSTEST
..................................................................
32
3.2
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
...............................................................
33
3.2.1
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
.............................................................
33
3.2.2
RASTERELEKRONENMIKROSKOPIE-BILDER
....................................
35
3.2.3
EDX-ANALYSE
.......................................................................
38
3.2.4
MAPPING
................................................................................
40
4
DISKUSSION
UND
AUSBLICK
44
4.1
ZYTOKOMPATIBILITAET
DER
MATERIALIEN
..................................................
44
4.1.1
LEBEND-TOT-FAERBUNG
.............................................................
44
4.1.2
ZELLZAHL
................................................................................
45
4.1.3
ZYTOTOXIZITAETSTEST
..................................................................
47
4.2
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
...............................................................
48
4.2.1
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
.............................................................
49
4.2.2
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
UND
EDX-ANALYSE
.................
50
4.3
CHARAKTERISIERUNG
DES
HYDROGELS
....................................................
52
4.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
....................................................
53
LITERATURVERZEICHNIS
54
5
DANKSAGUNG
63
6
ANHANG
64
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
TISSUE
ENGINEERING
.
1
1.2
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.
3
1.3
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
.
6
1.4
EXTRAZELLULAERMATRIX
.
7
1.5
HYDROGELE
.
8
1.6
ZIEL
DER
ARBEIT
.
10
2
MATERIAL
UND
METHODEN
12
2.1
MATERIALIEN
UND
GERAETE
.
12
2.1.1
CHEMIKALIEN
.
12
2.1.2
HYDROGELE
.
12
2.1.3
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
13
2.1.4
MEDIEN
.
14
2.1.5
KITS
.
15
2.1.6
GERAETE
.
15
2.1.7
SOFTWARE
UND
DATENBANKEN
.
16
2.2
VERWENDETE
ZELLTYPEN
.
16
2.2.1
L929-ZELLEN
.
16
2.2.2
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.
17
2.3
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
.
17
2.3.1
ISOLATION
DER
ZELLEN
.
17
2.3.2
PASSAGIEREN
VON
ZELLEN
.
18
2.3.3
KRYOKONSERVIERUNG
VON
ZELLEN
.
19
2.3.4
ZELLZAEHLUNG
MITTELS
CASY-1
.
20
2.3.5
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
.
20
2.4
ZYTOTOXIZITAETSTESTS
.
21
2.4.1
DIREKTER
ZYTOTOXIZITAETSTEST
.
21
2.4.2
CYTOTOX-ONEYYHOMOGEWEOUS
MEMBRANE
INTEGRITY
ASSAY
.
22
2.5
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
.
23
2.6
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
24
2.6.1
FIXIERUNG
.
24
2.6.2
REM-BILDER
.
25
2.6.3
ENERGIEDISPERSIVE
ROENTGENSPEKTROSKOPIE
(EDX)
.
25
2.7
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
25
3
ERGEBNISSE
26
3.1
VITALITAET
DER
ZELLEN
.
26
3.1.1
LEBEND-TOT-FAERBUNG
.
26
3.1.2
ZELLZAHL
.
29
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.
32
3.2
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
.
33
3.2.1
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
.
33
3.2.2
RASTERELEKRONENMIKROSKOPIE-BILDER
.
35
3.2.3
EDX-ANALYSE
.
38
3.2.4
MAPPING
.
40
4
DISKUSSION
UND
AUSBLICK
44
4.1
ZYTOKOMPATIBILITAET
DER
MATERIALIEN
.
44
4.1.1
LEBEND-TOT-FAERBUNG
.
44
4.1.2
ZELLZAHL
.
45
4.1.3
ZYTOTOXIZITAETSTEST
.
47
4.2
OSTEOGENE
DIFFERENZIERUNG
.
48
4.2.1
ALIZARIN-ROT-FAERBUNG
.
49
4.2.2
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
UND
EDX-ANALYSE
.
50
4.3
CHARAKTERISIERUNG
DES
HYDROGELS
.
52
4.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
.
53
LITERATURVERZEICHNIS
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5
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