Urethrale cholinerge chemosensorische Zellen initiieren eine neurogene Entzündung als Reaktion auf den Bitterstoff Denatonium:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2021
|
| Ausgabe: | 1. Auflage |
| Schriftenreihe: | Edition Scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | X, 114 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm x 14.8 cm, 200 g |
| ISBN: | 9783835969957 3835969951 |
Internformat
MARC
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|---|---|
| adam_text | ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
............................................................................................
III
1.
EINLEITUNG
................................................................................................................
1
1.1
HARNWEGSINFEKTE
............................................................................................
1
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE
...........................................................................................
2
1.1.2
RISIKOFAKTOREN
...........................................................................................
3
1.1.3
ERREGERSPEKTRUM
.......................................................................................
3
1.1.4
KLINISCHE
SYMPTOMATIK
............................................................................
5
1.1.5
DIAGNOSTIK
..................................................................................................
6
1.1.6
THERAPIE
....................................................................................................
6
1.2
GESCHMACKSWAHRNEHMUNG
............................................................................
7
1.2.1
GESCHMACKSTRANSDUKTIONSKASKADE
........................................................
7
1.2.2
BEDEUTUNG
DER
WAHRNEHMUNG
VON
BITTERSTOFFEN
...................................
9
1.3
SOLITAERE
CHEMOSENSORISCHE
EPITHELZELLEN
....................................................
10
1.3.1
ENTDECKUNG
DER
YYBUERSTENZELLE
.............................................................
10
1.3.2
CHARAKTERISIERUNG
VON
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN..
11
1.3.3
CHOLINERGER
CHARAKTER
VON
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN
12
1.3.4
WAECHTERFUNKION
UND
ABWEHRMECHANISMEN
VON
EXTRAURETHRALEN
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN
...................................................
13
1.3.5
DIE
URETHRALE
CHOLINERGE
CHEMOSENSORISCHE
ZELLE
..............................
15
1.3.5.1
HISTOLOGISCHER
AUFBAU
DER
URETHRA
................................................
15
1.3.5.2
ENTDECKUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
URETHRALEN
CHOLINERGEN
CHEMOSENSORISCHEN
ZELLE
...........................................................................
16
1.4
NEUROGENE
ENTZUENDUNG
...............................................................................
20
1.4.1
ENTZUENDUNGSMERKMALE
UND
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ENTSTEHUNG
.........
20
1.5
ZIELE
DER
ARBEIT
..............................................................................................26
VI
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.......................................................................................
28
2.1
MATERIALIEN
UND
GERAETE
.................................................................................28
2.1.1
MAUSSTAEMME
..........................................................................................
28
2.1.2
CHEMIKALIEN,
MEDIEN
UND
REAGENZIEN
.................................................
29
2.1.3
REZEPTUREN
DER
LOESUNGEN
UND
PUFFER
..................................................
33
2.1.4
GERAETE
....................................................................................................
34
2.1.5
VERBRAUCHSMATERIALIEN
...........................................................................
36
2.1.6
SOFTWARE
.................................................................................................
36
2.2
METHODEN
.......................................................................................................37
2.2.1
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
.................................
37
2.2.1.1
PROBENGEWINNUNG
UND
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
............................
37
2.2.1.2
AUSWERTUNG
.....................................................................................38
2.2.2
MESSUNG
DER
INTRAZELLULAEREN
CALCIUMKONZENTRATION
IN
SENSORISCHEN
NEURONEN
AUS
SPINALGANGLIEN
.......................................................................
39
2.2.2
.1
ZELLISOLATION
......................................................................39
2.22.2
DURCHFUEHRUNG
..................................................................................
39
2.2.3
EVANS
BLUE-PLASMAEXTRAVASATION
........................................................
40
2.2.3.1
VERSUCHSTIERE
..................................................................................
40
2.2.3.2
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
...................................................................
40
2.2.3.3
VERWENDETE
STIMULANTIEN
...............................................................43
2.2.3.4
VERWENDETE
INHIBITOREN
..................................................................
43
2.2.3.5
PROBENGEWINNUNG
-
HISTOLOGISCHE
AUFARBEITUNG
.........................
44
2.2.3.6
PROBENGEWINNUNG
-
PHOTOMETRISCHE
AUFARBEITUNG
......................
45
2.2.4
REVERSE
TRANSKRIPTASE-POLYMERASEKETTENREAKTION
(RT-PCR)
..........
45
2.2.4.1
RNA-ISOLATION
..................................................................................
45
2.2.4.2
CDNA-SYNTHESE
..............................................................................
46
2.2.4.3
POLYMERASE-KETTENREAKTION
...........................................................
46
VII
2.2.4.4
DNA-GELELEKTROPHORESE
.................................................................
47
2.2.4.5
KONTROLLEN
.........................................................................................
48
2.2.5
IMMUNHISTOCHEMIE
................................................................................
48
2.2.5.1
PROBENENTNAHME
UND
FIXIERUNG
.....................................................
48
2.2.5.2
DURCHFUEHRUNG
...................................................................................
49
2.2.5.3
KONTROLLEN
.........................................................................................
51
2.2.5.4
AUSWERTUNG
UND
DOKUMENTATION
....................................................
51
3.
ERGEBNISSE
...........................................................................................................52
3.1
UNTERSUCHUNG
DER
UCCC-VERMITTELTEN
PLASMAEXTRAVASATION
IN
URETHRA
UND
BLASE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
........................................
52
3.1.1
PHOTOMETRISCHE
AUSWERTUNG
.................................................................
52
3.1.2
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
.....................................................................
53
3.2
LAGEBEZIEHUNG
VON
UCCC
ZU
PEPTIDERGEN
UND
CHOLINOZEPTIVEN
NERVENFASERN
.......................................................................................................
55
3.3
UNTERSUCHUNG
DER
SP-FREISETZUNG
IN
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
NACH
STIMULATION
MIT
25
MM
DENATONIUM
.....................
60
3.4
UNTERSUCHUNG
DER
AENDERUNG
DER
[CA2T]
NACH
GABE
VON
DENATONIUM
IN
EGFP-POSITIVEN
NEURONEN
AUS
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
61
3.5
UNTERSUCHUNG
DER
EXPRESSION
VON
TRPMOE
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
...................................................................................66
3.5.1
FEHLENDE
GENEXPRESSION
VON
TRPM5
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
..............................................................................
66
3.5.2
UNTERSUCHUNG
DER
IMMUNREAKTIVITAET
FUER
TRPM5
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
..............................................................................
67
3.6
NEUROPEPTIDFREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
................................................................
69
3.6.1
SP-FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
............................................................
69
VIII
3.6.2
CGRP-FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
............................................................
71
3.7
SIGNALWEGE
DER
UCCC-VERMITTELTEN
PLASMAEXTRAVASATION
IN
C57BL/6J
MAEUSEN
...............................................................................................................
73
3.8
ROLLE
CHOLINERGER
REZEPTOREN
IN
DER
DENATONIUM-INDUZIERTEN
SP
FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDE
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J-MAEUSEN
...
76
4.
DISKUSSION
...........................................................................................................77
4.1
DIE
VON
DENATONIUM
AUSGELOESTE
ENTZUENDUNGSREAKTION
IST
TRPM5
ABHAENGIG
UND
DAHER
DURCH
UCCC
VERMITTELT
...................................................
77
4.2
DIE
DURCH
DENATONIUM
INDUZIERTE
PLASMAEXTRAVASATION
WIRD
PRIMAER
DURCH
SP
VERMITTELT
........................................................................................................79
4.3
NIKOTINISCHE
ACETYLCHOLINREZEPTOREN
SIND
AN
DER
UCCC-VERMITTELTEN
ENTZUENDUNGSREAKTION
BETEILIGT
...........................................................................83
4.4
HOHE
DENATONIUMKONZENTRATIONEN
STIMULIEREN
TRPM5-UNABHAENGIG
FREIE
NERVENFASERN
......................................................................................................84
4.5
DER
NEUROGENEN
ENTZUENDUNG
IM
URETHRALEN
EPITHEL
LIEGEN
KONVERGIERENDE
SIGNALWEGE
ZUGRUNDE
.........................................................................................85
4.6
NEUROGENE
ENTZUENDUNG
IST
EIN
WEITERER
DURCH
UCCC
VERMITTELTER
SCHUTZMECHANISMUS.....
.....................................................................................
86
4.7
YYDIRTY
SUBSTANCE
DENATONIUM
....................................................................
87
4.8
LIMITATION
DER
STUDIE
UND
AUSBLICK
..............................................................90
4.9
SCHLUSSFOLGERUNG
..........................................................................................
92
5.
LITERATURVERZEICHNIS
............................................................................................
92
6.
ZUSAMMENFASSUNG
...........................................................................................
110
7.
SUMMARY
...........................................................................................................
111
8.
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS
UND
AUFLISTUNG
DER
KONGRESSBEITRAEGE
......................
112
8.1
ORIGINALARBEIT
...............................................................................................
112
8.2
KONGRESSBEITRAEGE
........................................................................................
113
9.
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
.................................................................................
113
IX
10.
DANKSAGUNG
114
X
|
| adam_txt |
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
III
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
HARNWEGSINFEKTE
.
1
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE
.
2
1.1.2
RISIKOFAKTOREN
.
3
1.1.3
ERREGERSPEKTRUM
.
3
1.1.4
KLINISCHE
SYMPTOMATIK
.
5
1.1.5
DIAGNOSTIK
.
6
1.1.6
THERAPIE
.
6
1.2
GESCHMACKSWAHRNEHMUNG
.
7
1.2.1
GESCHMACKSTRANSDUKTIONSKASKADE
.
7
1.2.2
BEDEUTUNG
DER
WAHRNEHMUNG
VON
BITTERSTOFFEN
.
9
1.3
SOLITAERE
CHEMOSENSORISCHE
EPITHELZELLEN
.
10
1.3.1
ENTDECKUNG
DER
YYBUERSTENZELLE
"
.
10
1.3.2
CHARAKTERISIERUNG
VON
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN.
11
1.3.3
CHOLINERGER
CHARAKTER
VON
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN
12
1.3.4
WAECHTERFUNKION
UND
ABWEHRMECHANISMEN
VON
EXTRAURETHRALEN
SOLITAEREN
CHEMOSENSORISCHEN
EPITHELZELLEN
.
13
1.3.5
DIE
URETHRALE
CHOLINERGE
CHEMOSENSORISCHE
ZELLE
.
15
1.3.5.1
HISTOLOGISCHER
AUFBAU
DER
URETHRA
.
15
1.3.5.2
ENTDECKUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
URETHRALEN
CHOLINERGEN
CHEMOSENSORISCHEN
ZELLE
.
16
1.4
NEUROGENE
ENTZUENDUNG
.
20
1.4.1
ENTZUENDUNGSMERKMALE
UND
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ENTSTEHUNG
.
20
1.5
ZIELE
DER
ARBEIT
.26
VI
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
28
2.1
MATERIALIEN
UND
GERAETE
.28
2.1.1
MAUSSTAEMME
.
28
2.1.2
CHEMIKALIEN,
MEDIEN
UND
REAGENZIEN
.
29
2.1.3
REZEPTUREN
DER
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
33
2.1.4
GERAETE
.
34
2.1.5
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
36
2.1.6
SOFTWARE
.
36
2.2
METHODEN
.37
2.2.1
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
.
37
2.2.1.1
PROBENGEWINNUNG
UND
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
.
37
2.2.1.2
AUSWERTUNG
.38
2.2.2
MESSUNG
DER
INTRAZELLULAEREN
CALCIUMKONZENTRATION
IN
SENSORISCHEN
NEURONEN
AUS
SPINALGANGLIEN
.
39
2.2.2
.1
ZELLISOLATION
.39
2.22.2
DURCHFUEHRUNG
.
39
2.2.3
EVANS
BLUE-PLASMAEXTRAVASATION
.
40
2.2.3.1
VERSUCHSTIERE
.
40
2.2.3.2
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
.
40
2.2.3.3
VERWENDETE
STIMULANTIEN
.43
2.2.3.4
VERWENDETE
INHIBITOREN
.
43
2.2.3.5
PROBENGEWINNUNG
-
HISTOLOGISCHE
AUFARBEITUNG
.
44
2.2.3.6
PROBENGEWINNUNG
-
PHOTOMETRISCHE
AUFARBEITUNG
.
45
2.2.4
REVERSE
TRANSKRIPTASE-POLYMERASEKETTENREAKTION
(RT-PCR)
.
45
2.2.4.1
RNA-ISOLATION
.
45
2.2.4.2
CDNA-SYNTHESE
.
46
2.2.4.3
POLYMERASE-KETTENREAKTION
.
46
VII
2.2.4.4
DNA-GELELEKTROPHORESE
.
47
2.2.4.5
KONTROLLEN
.
48
2.2.5
IMMUNHISTOCHEMIE
.
48
2.2.5.1
PROBENENTNAHME
UND
FIXIERUNG
.
48
2.2.5.2
DURCHFUEHRUNG
.
49
2.2.5.3
KONTROLLEN
.
51
2.2.5.4
AUSWERTUNG
UND
DOKUMENTATION
.
51
3.
ERGEBNISSE
.52
3.1
UNTERSUCHUNG
DER
UCCC-VERMITTELTEN
PLASMAEXTRAVASATION
IN
URETHRA
UND
BLASE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
.
52
3.1.1
PHOTOMETRISCHE
AUSWERTUNG
.
52
3.1.2
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
.
53
3.2
LAGEBEZIEHUNG
VON
UCCC
ZU
PEPTIDERGEN
UND
CHOLINOZEPTIVEN
NERVENFASERN
.
55
3.3
UNTERSUCHUNG
DER
SP-FREISETZUNG
IN
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
NACH
STIMULATION
MIT
25
MM
DENATONIUM
.
60
3.4
UNTERSUCHUNG
DER
AENDERUNG
DER
[CA2T]
NACH
GABE
VON
DENATONIUM
IN
EGFP-POSITIVEN
NEURONEN
AUS
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
61
3.5
UNTERSUCHUNG
DER
EXPRESSION
VON
TRPMOE
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
.66
3.5.1
FEHLENDE
GENEXPRESSION
VON
TRPM5
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
.
66
3.5.2
UNTERSUCHUNG
DER
IMMUNREAKTIVITAET
FUER
TRPM5
IN
SPINALGANGLIEN
VON
NACHRA3-EGFP-MAEUSEN
.
67
3.6
NEUROPEPTIDFREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
.
69
3.6.1
SP-FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
.
69
VIII
3.6.2
CGRP-FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDEN
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J
UND
TRPM5-KO-MAEUSEN
.
71
3.7
SIGNALWEGE
DER
UCCC-VERMITTELTEN
PLASMAEXTRAVASATION
IN
C57BL/6J
MAEUSEN
.
73
3.8
ROLLE
CHOLINERGER
REZEPTOREN
IN
DER
DENATONIUM-INDUZIERTEN
SP
FREISETZUNG
IN
UEBERSTAENDE
EXPLANTIERTER
URETHRAE
VON
C57BL/6J-MAEUSEN
.
76
4.
DISKUSSION
.77
4.1
DIE
VON
DENATONIUM
AUSGELOESTE
ENTZUENDUNGSREAKTION
IST
TRPM5
ABHAENGIG
UND
DAHER
DURCH
UCCC
VERMITTELT
.
77
4.2
DIE
DURCH
DENATONIUM
INDUZIERTE
PLASMAEXTRAVASATION
WIRD
PRIMAER
DURCH
SP
VERMITTELT
.79
4.3
NIKOTINISCHE
ACETYLCHOLINREZEPTOREN
SIND
AN
DER
UCCC-VERMITTELTEN
ENTZUENDUNGSREAKTION
BETEILIGT
.83
4.4
HOHE
DENATONIUMKONZENTRATIONEN
STIMULIEREN
TRPM5-UNABHAENGIG
FREIE
NERVENFASERN
.84
4.5
DER
NEUROGENEN
ENTZUENDUNG
IM
URETHRALEN
EPITHEL
LIEGEN
KONVERGIERENDE
SIGNALWEGE
ZUGRUNDE
.85
4.6
NEUROGENE
ENTZUENDUNG
IST
EIN
WEITERER
DURCH
UCCC
VERMITTELTER
SCHUTZMECHANISMUS.
.
86
4.7
YYDIRTY
SUBSTANCE
"
DENATONIUM
.
87
4.8
LIMITATION
DER
STUDIE
UND
AUSBLICK
.90
4.9
SCHLUSSFOLGERUNG
.
92
5.
LITERATURVERZEICHNIS
.
92
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
110
7.
SUMMARY
.
111
8.
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS
UND
AUFLISTUNG
DER
KONGRESSBEITRAEGE
.
112
8.1
ORIGINALARBEIT
.
112
8.2
KONGRESSBEITRAEGE
.
113
9.
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
.
113
IX
10.
DANKSAGUNG
114
X |
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