Die Rolle von nuclear factor 1 A (NFIA) bei der akuten myeloischen Leukämie:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Münster
2020
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | 129, III Blätter Illustrationen 30 cm |
Internformat
MARC
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Datensatz im Suchindex
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---|---|
adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.....................................................................................................................
1
1.1
AKUTE
MYELOISCHE
LEUKAEMIE
..................................................................................................................
1
1.2
ADULTE
HAEMATOPOESE
...................................................................................................................................
5
1.3
M
YELOISCHE
O
BERFLAECHENMERKMALE
.........................................................................
7
1.3.1
C-K
IT
.............................................................................................................................................
8
1.3.2
GR-1
..............................................................................................................................................
8
1.3.3
CD11B
...........................................................................................................................................
8
1.3.4
CD71
.............................................................................................................................................
8
1.3.5
TER-119
........................................................................................................................................
8
1.3.6
CD41UNDCD61
..........................................................................................................................
9
1.4
NFIA
...................................................................................................................................
9
1.4.1
S
TRUKTUR
,
E
IGENSCHAFTEN
UND
F
UNKTION
........................................................................9
1.4.2
NFIA
IN
DER
E
NTWICKLUNG
,
D
IFFERENZIERUNG
UND
H
AEMATOPOESE
..........................
13
1.4.3
R
OLLE
VON
NFIA
BEI
MALIGNEN
E
RKRANKUNGEN
............................................................
14
1.5
Z
IEL
DER
A
RBEIT
..............................................................................................................
16
2
MATERIAL
UND
METHODEN
17
2.1
C
HEMIKALIEN
...................................................................................................................
17
2.2
A
NTIKOERPER
.....................................................................................................................
19
2.3
P
UFFER
UND
M
EDIEN
......................................................................................................
20
2.3.1
PBS
.............................................................................................................................................
20
2.3.2
DIO
M
EDIUM
.............................................................................................................................
20
2.3.3
RIO
M
EDIUM
..............................................................................................................................
20
2.3.4
SM
(S
USPENSIONS
M
EDIUM
)
.................................................................................................
20
2.3.5
2XHBS
......................................................................................................................................
20
2.3.6
2MC
A
C
L
2
..................................................................................................................................
20
2.3.7
E
RYTHROYZTEN
L
YSE
P
UFFER
...............................................................................................
21
2.3.8
M
ETHYLZELLULOSE
..................................................................................................................
21
2.3.9
SOC
M
EDIUM
.............................................................................................................................
21
2.4
Z
ELLLINIEN
......................................................................................................................
22
2.5
V
ERSUCHSTIERE
..............................................................................................................
22
2.6
P
LASMIDE
.........................................................................................................................
23
2.7
P
LASTIKWARE
.................................................................................................................
24
2.8
K
ITS
..................................................................................................................................
25
2.9
G
ERAETE
............................................................................................................................
25
2.10
S
OFTWARE
.....................................................................................................................
27
2.11
K
LONIERUNGEN
.............................................................................................................
28
2.11.1
UEBERSICHT
.......................................................................................................................................................
28
2.11.2
V
EKTOR
....................................................................................................................................
31
2.11.3
PCR
TEMPLATE
.........................................................................................................................................
32
2.11.4
P
OLYMERASEN
-K
ETTEN
-R
EAKTION
(PCR)
........................................................................
32
2.11.4.1
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MSCV
PURO
...........................................................
37
2.11.4.2
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
2
MSCV
PURO
.........................................
38
2.11.4.3
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
5,6
MSCV
PURO
......................................
39
2.11.4.4
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
9
MSCV
PURO
.........................................
40
2.11.4.5
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
PNT
MSCV
PURO
.............................................
41
2.11.4.6
PCR
KONDITIONEN
FUER
NFIA
ISO
1
A
MHI
MSCV
PURO
...............................................
42
2.11.4.7
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MT4
MSCV
PURO
...................................................
43
2.11.4.8
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MT8
MSCV
PURO
...................................................
44
2.11.5
DNA-A
GAROSE
-G
ELELEKTROPHORESE
..............................................................................
44
2.11.6
A
UFREINIGUNG
PCR
P
RODUKT
............................................................................................
45
2.11.7
L
IGATION
.................................................................................................................................
45
2.11.8
T
RANSFORMATION
..................................................................................................................
46
2.11.9
P
LASMID
-I
SOLATION
:
M
INIPREP
...........................................................................................
47
2.11.10
S
EQUENZIERUNG
...................................................................................................................
47
2.11.11
P
LASMID
-I
SOLATION
:
M
AXIPREP
.......................................................................................
50
2.11.12
P
LASMIDKARTEN
DER
KLONIERTEN
P
LASMIDE
................................................................
51
2.11.12.1
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISO
1
MSCV
PURO
........................................................................
52
2.11.12.2
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
2
MSCV
PURO
........................................................
53
2.11.12.3
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
5,6
MSCV
PURO
...................................................
54
2.11.12.4
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
9
MSCV
PURO
.......................................................
55
2.11.12.5
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
PNT
MSCV
PURO
...........................................................
56
2.11.12.6
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
MHI
MSCV
PURO
..........................................................
57
2.11.12.7
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
MT4
MSCV
PURO
................................................................
58
2.11.12.8
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
MT8
MSCV
PURO
................................................................
59
2.12
RTTA
.............................................................................................................................
60
2.12.1
T
RANSFEKTION
.......................................................................................................................
60
2.12.2
ISOLATION
C-KLT+
HAEMATOPOETISCHER
STAMMZELLEN
(HPCS)
...................................
61
2.12.3
T
RANSDUKTION
......................................................................................................................
63
2.12.4
S
ELEKTION
...............................................................................................................................
63
2.12.5
P
LATTIERUNG
UND
R
EPLATTIERUNG
...................................................................................
63
2.13
K
ULTIVIERUNG
VON
C
-K
IT
+
HPC
S
...............................................................................
64
2.14
Z
YTOSPIN
-F
AERBUNGEN
(M
AY
-G
RUENWALD
-G
IEMSA
)
.................................................
65
2.15
D
URCHFLUSSZYTOMETRIE
............................................................................................
65
2.16
L
INEAGE
DEPLETION
UND
CELL
SORTING
............................................................
68
2.16.1
L
INEAGE
DEPLETION
...........................................................................................................
68
2.16.2
Z
ELL
-
SORTING
VON
S
UBPOPULATIONEN
HAEMATOPOETISCHER
P
ROGENITORZELLEN
...................................................................................................................................................
69
2.17
RNA-ISOLATION
............................................................................................................
75
2.18
CDNA-S
YNTHESE
..........................................................................................................
75
2.19
RT-QPCR
.......................................................................................................................
76
2.20
AML-P
ATIENT
(
INN
)
ENPROBEN
.....................................................................................
80
2.21
S
TAMMZELLPROBEN
....................................................................................................
82
3
ERGEBNISSE
....................................................................................................................
83
3.1
D
IE
EKTOPISCHE
E
XPRESSION
VON
NFIA
IN
MURINEN
HPC
S
FUEHRT
ZU
DEREN
LEUKAEMISCHER
TRANSFORMATION
.......................................................................................................
83
3.2
E
XON
2
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
LEUKAEMISCHE
T
RANSFORMATION
MURINER
HPC
S
87
3.3
D
IE
P
ROTEINDOMAENEN
PNT
UND
MHI
VON
NFIA
SIND
ESSENTIELL
FUER
DIE
T
RANSFORMATION
MURINER
HPC
S
.............................................................................
90
3.4
D
IE
A
MINOSAEUREPAARE
C
YS
103,V
AL
104
UND
L
EU
136J
HE
137
SIND
ESSENTIELL
FUER
DIE
T
RANSFORMATION
....................................................................................................
92
3.5
D
IE
E
XPRESSION
VON
N
FIA
IN
MURINEN
HPC
S
SINKT
IM
Z
UGE
IHRER
D
IFFERENZIERUNG
..........................................................................................................
94
3.6
TV/
J
M-E
XPRESSION
IN
PRIMAEREN
AML-P
ATIENT
(
INN
)
ENPROBEN
...............................
96
4
DISKUSSION
....................................................................................................................
98
5
LITERATURVERZEICHNIS........................................................................................
114
6
DANKSAGUNGEN
........................................................................................................
127
7
LEBENSLAUF
................................................................................................................
128
8
ANHANG
I
|
adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
AKUTE
MYELOISCHE
LEUKAEMIE
.
1
1.2
ADULTE
HAEMATOPOESE
.
5
1.3
M
YELOISCHE
O
BERFLAECHENMERKMALE
.
7
1.3.1
C-K
IT
.
8
1.3.2
GR-1
.
8
1.3.3
CD11B
.
8
1.3.4
CD71
.
8
1.3.5
TER-119
.
8
1.3.6
CD41UNDCD61
.
9
1.4
NFIA
.
9
1.4.1
S
TRUKTUR
,
E
IGENSCHAFTEN
UND
F
UNKTION
.9
1.4.2
NFIA
IN
DER
E
NTWICKLUNG
,
D
IFFERENZIERUNG
UND
H
AEMATOPOESE
.
13
1.4.3
R
OLLE
VON
NFIA
BEI
MALIGNEN
E
RKRANKUNGEN
.
14
1.5
Z
IEL
DER
A
RBEIT
.
16
2
MATERIAL
UND
METHODEN
17
2.1
C
HEMIKALIEN
.
17
2.2
A
NTIKOERPER
.
19
2.3
P
UFFER
UND
M
EDIEN
.
20
2.3.1
PBS
.
20
2.3.2
DIO
M
EDIUM
.
20
2.3.3
RIO
M
EDIUM
.
20
2.3.4
SM
(S
USPENSIONS
M
EDIUM
)
.
20
2.3.5
2XHBS
.
20
2.3.6
2MC
A
C
L
2
.
20
2.3.7
E
RYTHROYZTEN
L
YSE
P
UFFER
.
21
2.3.8
M
ETHYLZELLULOSE
.
21
2.3.9
SOC
M
EDIUM
.
21
2.4
Z
ELLLINIEN
.
22
2.5
V
ERSUCHSTIERE
.
22
2.6
P
LASMIDE
.
23
2.7
P
LASTIKWARE
.
24
2.8
K
ITS
.
25
2.9
G
ERAETE
.
25
2.10
S
OFTWARE
.
27
2.11
K
LONIERUNGEN
.
28
2.11.1
UEBERSICHT
.
28
2.11.2
V
EKTOR
.
31
2.11.3
PCR
"
TEMPLATE
"
.
32
2.11.4
P
OLYMERASEN
-K
ETTEN
-R
EAKTION
(PCR)
.
32
2.11.4.1
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MSCV
PURO
.
37
2.11.4.2
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
2
MSCV
PURO
.
38
2.11.4.3
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
5,6
MSCV
PURO
.
39
2.11.4.4
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
EXON
9
MSCV
PURO
.
40
2.11.4.5
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
A
PNT
MSCV
PURO
.
41
2.11.4.6
PCR
KONDITIONEN
FUER
NFIA
ISO
1
A
MHI
MSCV
PURO
.
42
2.11.4.7
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MT4
MSCV
PURO
.
43
2.11.4.8
PCR
KONDITIONEN
FUER
HNFIA
ISO
1
MT8
MSCV
PURO
.
44
2.11.5
DNA-A
GAROSE
-G
ELELEKTROPHORESE
.
44
2.11.6
A
UFREINIGUNG
PCR
P
RODUKT
.
45
2.11.7
L
IGATION
.
45
2.11.8
T
RANSFORMATION
.
46
2.11.9
P
LASMID
-I
SOLATION
:
M
INIPREP
.
47
2.11.10
S
EQUENZIERUNG
.
47
2.11.11
P
LASMID
-I
SOLATION
:
M
AXIPREP
.
50
2.11.12
P
LASMIDKARTEN
DER
KLONIERTEN
P
LASMIDE
.
51
2.11.12.1
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISO
1
MSCV
PURO
.
52
2.11.12.2
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
2
MSCV
PURO
.
53
2.11.12.3
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
5,6
MSCV
PURO
.
54
2.11.12.4
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
EXON
9
MSCV
PURO
.
55
2.11.12.5
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
PNT
MSCV
PURO
.
56
2.11.12.6
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
A
MHI
MSCV
PURO
.
57
2.11.12.7
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
MT4
MSCV
PURO
.
58
2.11.12.8
PLASMIDKARTE:
HNFIA
ISOL
MT8
MSCV
PURO
.
59
2.12
RTTA
.
60
2.12.1
T
RANSFEKTION
.
60
2.12.2
ISOLATION
C-KLT+
HAEMATOPOETISCHER
STAMMZELLEN
(HPCS)
.
61
2.12.3
T
RANSDUKTION
.
63
2.12.4
S
ELEKTION
.
63
2.12.5
P
LATTIERUNG
UND
R
EPLATTIERUNG
.
63
2.13
K
ULTIVIERUNG
VON
C
-K
IT
+
HPC
S
.
64
2.14
Z
YTOSPIN
-F
AERBUNGEN
(M
AY
-G
RUENWALD
-G
IEMSA
)
.
65
2.15
D
URCHFLUSSZYTOMETRIE
.
65
2.16
"
L
INEAGE
DEPLETION
"
UND
"
CELL
SORTING
"
.
68
2.16.1
"
L
INEAGE
DEPLETION
"
.
68
2.16.2
Z
ELL
-
"
SORTING
"
VON
S
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HAEMATOPOETISCHER
P
ROGENITORZELLEN
.
69
2.17
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.
75
2.18
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YNTHESE
.
75
2.19
RT-QPCR
.
76
2.20
AML-P
ATIENT
(
INN
)
ENPROBEN
.
80
2.21
S
TAMMZELLPROBEN
.
82
3
ERGEBNISSE
.
83
3.1
D
IE
EKTOPISCHE
E
XPRESSION
VON
NFIA
IN
MURINEN
HPC
S
FUEHRT
ZU
DEREN
LEUKAEMISCHER
TRANSFORMATION
.
83
3.2
E
XON
2
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
LEUKAEMISCHE
T
RANSFORMATION
MURINER
HPC
S
87
3.3
D
IE
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ROTEINDOMAENEN
PNT
UND
MHI
VON
NFIA
SIND
ESSENTIELL
FUER
DIE
T
RANSFORMATION
MURINER
HPC
S
.
90
3.4
D
IE
A
MINOSAEUREPAARE
C
YS
103,V
AL
104
UND
L
EU
136J
HE
137
SIND
ESSENTIELL
FUER
DIE
T
RANSFORMATION
.
92
3.5
D
IE
E
XPRESSION
VON
N
FIA
IN
MURINEN
HPC
S
SINKT
IM
Z
UGE
IHRER
D
IFFERENZIERUNG
.
94
3.6
TV/
J
M-E
XPRESSION
IN
PRIMAEREN
AML-P
ATIENT
(
INN
)
ENPROBEN
.
96
4
DISKUSSION
.
98
5
LITERATURVERZEICHNIS.
114
6
DANKSAGUNGEN
.
127
7
LEBENSLAUF
.
128
8
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