Der Einfluss von Mikroglia auf das Differenzierungsverhalten neuraler Stammzellen in vitro:
Gespeichert in:
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| Veröffentlicht: |
Köln
[2021]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
..........................................................................................................................6
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.................................................................................................................9
1
EINLEITUNG
..............................................................................................................................11
1.1
MIKROGLIA
UND
SCHLAGANFALL
.............................................................................................
11
1.1.1
AKTIVIERUNG
VON
MIKROGLIA
......................................................................................
12
1.2
NEURALE
STAMMZELLEN
UND
SCHLAGANFALL.........................................................................
13
1.3
HYPOTHESE
UND
ZIEL
........................................................................................................
14
2
MATERIAL
.................................................................................................................................15
2.1
CHEMIKALIEN
....................................................................................................................
15
2.2
HERGESTELLTE
LOESUNGEN
...................................................................................................
16
2.2.1
BESCHICHTUNG
..........................................................................................................
16
2.2.2
NSC
KULTUR
..............................................................................................................
16
2.2.3
MIKROGLIA
KULTUR
......................................................................................................
16
2.2.4
FAERBUNG
..................................................................................................................
17
2.3
ANTIKOERPER
......................................................................................................................
17
2.3.1
PRIMAERANTIKOERPER
....................................................................................................
17
2.3.2
SEKUNDAERANTIKOERPER
...............................................................................................
17
2.4
KUNSTSTOFFMATERIAL
UND
SONSTIGES
.................................................................................
17
2.5
SOFTWARE
UND
GERAETE
......................................................................................................
18
2.6
BIOLOGISCHES
MATERIAL
.....................................................................................................
18
3
METHODEN
.............................................................................................................................19
3.1
MIKROGLIA
.........................................................................................................................
19
3.1.1
ISOLATION
DER
MIKROGLIA
...........................................................................................
19
3.1.2
GEWINNUNG
DER
MIKROGLIA-REINKULTUR
....................................................................
20
3.1.3
STIMULATION
DER
MIKROGLIA
.......................................................................................
20
3.2
NEURALE
STAMMZELLEN
.....................................................................................................
21
3.2.1
ISOLATION
DER
STAMMZELLEN
......................................................................................
21
3.2.2
MONOLAYER-KULTUR:
BESCHICHTUNG
DER
ANZUCHTOBERFLAECHEN
.................................
22
3.2.3
KULTIVIERUNG
DER
STAMMZELLEN
...............................................................................
22
3.2.4
PASSAGE
DER
STAMMZELLEN
.......................................................................................
22
3.2.5
DIFFERENZIERUNG
......................................................................................................
23
4
FLUORESZENZFAERBUNG
............................................................................................................
25
6
5
MIKROSKOPIE
.........................................................................................................................
27
6
STATISTISCHE
ANALYSE
.............................................................................................................
28
7
ERGEBNISSE
..............................................................................................................................
29
7.1
MORPHOLOGIE
DER
DIFFERENZIERTEN
ZELLEN
.........................................................................
29
7.1.1
DIE
UNBEHANDELTE
KONTROLLGRUPPE
..........................................................................
29
7.1.2
DER
EINFLUSS
UNBEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
UNBEHANDELT)
...................................
30
7.1.3
DER
EINFLUSS
IL-4
BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
IL-4)
................................................
31
7.1.4
DER
EINFLUSS
LPS-BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
LPS)
................................................
32
7.1.5
DER
EINFLUSS
LPS
UND
IL-4
-
BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
LPS+IL-4)
.......................
33
7.1.6
DER
EINFLUSS
VON
LPS
...............................................................................................34
7.1.7
DER
EINFLUSS
VON
IL-4
...............................................................................................
35
7.2
QUANTITATIVE
VERSUCHSAUSWERTUNG
.................................................................................
36
7.2.1
ANZAHL
DER
SOX2
POSITIVEN
NSC
...............................................................................
36
7.2.2
ANZAHL
DER
TUJL
POSITIVEN
JUNGEN
NEURONE
..........................................................
38
7.2.3
ANZAHL
DER
GFAP
POSITIVEN
ASTROZYTEN
...................................................................40
7.2.4
ANZAHL
DER
CNPASE
POSITIVEN
OLIGODENDROZYTEN
..................................................
42
7.3
DIE
KONTROLLVERSUCHE
......................................................................................................
43
7.3.1
ANZAHL
SOX-2
POSITIVER
NSC
DER
KONTROLLVERSUCHE
................................................
43
7.3.2
ANZAHL
DER
TUJL
POSITIVEN
NEURONE
......................................................................44
7.3.3
ANZAHL
DER
GFAP-POSITIVEN
ASTROZYTEN
................................................................45
7.3.4
ANZAHL
DER
CNPASE-POSITIVEN
OLIGODENDROZYTEN
..................................................
46
8
DISKUSSION
..............................................................................................................................
47
8.1
AKTIVIERUNG
YYML
............................................................................................................
47
8.2
EFFEKT
DER
ML
MIKROGLIA
AUF
NSC
....................................................................................
48
8.3
YYM2
AKTIVIERUNG
............................................................................................................
50
8.4
EFFEKT
DER
M2
MIKROGLIA
AUF
NSC
....................................................................................
53
8.5
NICHT-STIMULIERTE
MIKROGLIA
............................................................................................
54
8.6
HYBRID-MIKROGLIA
.............................................................................................................
54
8.7
KONTROLLVERSUCHE
.............................................................................................................
55
8.8
FAZIT
UND
AUSBLICK
............................................................................................................
55
9
ZUSAMMENFASSUNG
...............................................................................................................
58
10
LITERATURVERZEICHNIS
.............................................................................................................
59
11
ANHANG
...................................................................................................................................
64
7
11.1
TABELLENVERZEICHNIS
........................................................................................................64
11.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
....................................................................................................
64
11.3
DIAGRAMMVERZEICHNIS
.....................................................................................................
65
12
LEBENSLAUF
............................................................................................................................
66
8
|
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.6
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.9
1
EINLEITUNG
.11
1.1
MIKROGLIA
UND
SCHLAGANFALL
.
11
1.1.1
AKTIVIERUNG
VON
MIKROGLIA
.
12
1.2
NEURALE
STAMMZELLEN
UND
SCHLAGANFALL.
13
1.3
HYPOTHESE
UND
ZIEL
.
14
2
MATERIAL
.15
2.1
CHEMIKALIEN
.
15
2.2
HERGESTELLTE
LOESUNGEN
.
16
2.2.1
BESCHICHTUNG
.
16
2.2.2
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KULTUR
.
16
2.2.3
MIKROGLIA
KULTUR
.
16
2.2.4
FAERBUNG
.
17
2.3
ANTIKOERPER
.
17
2.3.1
PRIMAERANTIKOERPER
.
17
2.3.2
SEKUNDAERANTIKOERPER
.
17
2.4
KUNSTSTOFFMATERIAL
UND
SONSTIGES
.
17
2.5
SOFTWARE
UND
GERAETE
.
18
2.6
BIOLOGISCHES
MATERIAL
.
18
3
METHODEN
.19
3.1
MIKROGLIA
.
19
3.1.1
ISOLATION
DER
MIKROGLIA
.
19
3.1.2
GEWINNUNG
DER
MIKROGLIA-REINKULTUR
.
20
3.1.3
STIMULATION
DER
MIKROGLIA
.
20
3.2
NEURALE
STAMMZELLEN
.
21
3.2.1
ISOLATION
DER
STAMMZELLEN
.
21
3.2.2
MONOLAYER-KULTUR:
BESCHICHTUNG
DER
ANZUCHTOBERFLAECHEN
.
22
3.2.3
KULTIVIERUNG
DER
STAMMZELLEN
.
22
3.2.4
PASSAGE
DER
STAMMZELLEN
.
22
3.2.5
DIFFERENZIERUNG
.
23
4
FLUORESZENZFAERBUNG
.
25
6
5
MIKROSKOPIE
.
27
6
STATISTISCHE
ANALYSE
.
28
7
ERGEBNISSE
.
29
7.1
MORPHOLOGIE
DER
DIFFERENZIERTEN
ZELLEN
.
29
7.1.1
DIE
UNBEHANDELTE
KONTROLLGRUPPE
.
29
7.1.2
DER
EINFLUSS
UNBEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
UNBEHANDELT)
.
30
7.1.3
DER
EINFLUSS
IL-4
BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
IL-4)
.
31
7.1.4
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EINFLUSS
LPS-BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
LPS)
.
32
7.1.5
DER
EINFLUSS
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UND
IL-4
-
BEHANDELTER
MIKROGLIA
(KM
LPS+IL-4)
.
33
7.1.6
DER
EINFLUSS
VON
LPS
.34
7.1.7
DER
EINFLUSS
VON
IL-4
.
35
7.2
QUANTITATIVE
VERSUCHSAUSWERTUNG
.
36
7.2.1
ANZAHL
DER
SOX2
POSITIVEN
NSC
.
36
7.2.2
ANZAHL
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TUJL
POSITIVEN
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NEURONE
.
38
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ANZAHL
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GFAP
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.40
7.2.4
ANZAHL
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CNPASE
POSITIVEN
OLIGODENDROZYTEN
.
42
7.3
DIE
KONTROLLVERSUCHE
.
43
7.3.1
ANZAHL
SOX-2
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KONTROLLVERSUCHE
.
43
7.3.2
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NEURONE
.44
7.3.3
ANZAHL
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GFAP-POSITIVEN
ASTROZYTEN
.45
7.3.4
ANZAHL
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CNPASE-POSITIVEN
OLIGODENDROZYTEN
.
46
8
DISKUSSION
.
47
8.1
AKTIVIERUNG
YYML"
.
47
8.2
EFFEKT
DER
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MIKROGLIA
AUF
NSC
.
48
8.3
YYM2"
AKTIVIERUNG
.
50
8.4
EFFEKT
DER
M2
MIKROGLIA
AUF
NSC
.
53
8.5
NICHT-STIMULIERTE
MIKROGLIA
.
54
8.6
HYBRID-MIKROGLIA
.
54
8.7
KONTROLLVERSUCHE
.
55
8.8
FAZIT
UND
AUSBLICK
.
55
9
ZUSAMMENFASSUNG
.
58
10
LITERATURVERZEICHNIS
.
59
11
ANHANG
.
64
7
11.1
TABELLENVERZEICHNIS
.64
11.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
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11.3
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12
LEBENSLAUF
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