Von bakteriellen Toxinen und maligner Transformation: der Beitrag von Rho-GTPasen zum Krebsgeschehen
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
Dezember 2020
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 155 Seiten Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
.................................................................................................................
1
2.
EINLEITUNG
.................................................................................................................................
3
2.1
CHARAKTERISTIKA
VON
TUMORERKRANKUNGEN
.......................................................................
3
2.2
DAS
MAMMAKARZINOM
-
EPIDEMIOLOGIE
UND
KLINIK
.......................................................
4
2.3
DIE
MOLEKULARE
PATHOGENESE
VON
BRUSTKREBS
................................................................
5
2.4
ZELLMIGRATIONEN
ALS
GRUNDLAGE
DER
METASTASIERUNG
.....................................................7
2.4.1
MODELLIERUNG
DES
AKTINZYTOSKELETTS
UND
ZELLULAERER
FORTSAETZE
ALS
GRUNDLAGE
VON
ZELLMOTILITAET
.............................................................................................................................
8
2.4.2
MESENCHYMALE
MIGRATION
.........................................................................................10
2.4.3
AMOEBOIDE
MIGRATION
..................................................................................................
11
2.4.4
KOLLEKTIVE
MIGRATION
...................................................................................................
11
2.4.5
PLASTIZITAET
UND
UEBERGAENGE
DER
ZELLMIGRATIONSART
WAEHREND
DER
METASTASIERUNGLZ
2.5
DIE
FAMILIE
DER
RHO-GTPASEN
..........................................................................................
14
2.5.1
DIE
REGULATION
VON
RHO-GTPASEN
............................................................................
16
2.5.2
RHO-EFFEKTOREN
IN
DER
REGULATION
DES
ZYTOSKELETTS
...............................................
17
2.6
RHO-GTPASEN
-
EIN
ANGRIFFSPUNKT
BAKTERIELLER
TOXINE
...............................................19
2.7
RHO-GTPASEN
IM
TUMORGESCHEHEN
................................................................................
21
2.7.1
DIE
AKTUELLE
STUDIENLAGE
VON
RHOA
UND
RHOC
IM
MALIGNEN
KONTEXT
...................
22
2.8
DIE
ZIELSETZUNG
DIESER
STUDIE
..........................................................................................
26
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
....................................................................................................
27
3.1
MATERIALIEN
......................................................................................................................
27
3.1.1
VERBRAUCHSMATERIALIEN
..............................................................................................27
3.1.2
CHEMIKALIEN
UND
REAGENZIEN
....................................................................................27
3.1.2.1
REAGENZIEN
UND
REAGENZIENSAETZE
(KITS)
...............................................................
27
3.1.2.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
..............................................................................................
28
3.1.3
ENZYME
........................................................................................................................
30
3.1.4
VEKTOREN
UND
PLASMIDE
.............................................................................................
30
3.1.5
OLIGONUKLEOTIDE
..........................................................................................................32
3.1.5.1
KLONIERUNGSVEKTOREN
..............................................................................................
32
3.1.5.2
SEQUENZIERPRIMER
....................................................................................................32
3.1.5.3
REAL-TIME
PCR-PRIMER
............................................................................................
33
3.1.6
ANTIKOERPER
...................................................................................................................33
3.1.7
ZELLKULTUR-REAGENZIEN
................................................................................................
34
3.1.8
ZELLKULTUR-MEDIEN
.....................................................................................................35
3.1.9
PHARMAKOLOGISCHE
INHIBITOREN
.................................................................................35
3.1.10
BAKTERIENSTAEMME
....................................................................................................
36
3.1.11
BAKTERIEN-WACHSTUMSMEDIEN
................................................................................
36
3.1.12
LB-ZUSAETZE
.................................................................................................................
36
3.1.13
GERAETE
........................................................................................................................
37
3.1.14
SOFTWARE
....................................................................................................................
37
3.2
METHODEN
........................................................................................................................
39
3.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
............................................................................39
3.2.1.1
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(POLYMERASE
CHAIN
REACTION,
PCR)
.......................
39
3.2.1.2
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
UND
GELEXTRAKTION
.................................................
40
3.2.1.3
KLONIERUNG
VON
PCR-GENERIERTEN
DNA-FRAGMENTEN
...........................................
40
3.2.1.4
RESTRIKTIONSVERDAU
UND
VEKTOR-LINEARISIERUNG
...................................................
40
3.2.1.5
DEPHOSPHORYLIERUNG
...............................................................................................
41
3.2.1.6
DNA-LIGATION
............................................................................................................
41
3.2.1.7
TRANSFORMATIONEN
VON
PLASMID-DNA
IN
E.
COLI
....................................................
41
3.2.1.8
PLASMID-AUFREINIGUNGEN
........................................................................................
42
3.2.1.9
DNA-SEQUENZIERUNG
................................................................................................
42
3.2.1.10
GENERIERUNG
VON
PTET/RHOA
BZW.
PTET/RHOC-IRES-GFP-BSR.......................
42
3.2.1.11
GENERIERUNG
VON
PTRIPZ
RHOA
UND
PTRIPZ
RHOC
............................................
42
3.2.1.12
GENERIERUNG
VON
PTRIPZ
RAEL
UND
PTRIPZ
CDC42
...........................................
43
3.2.1.12
GENERIERUNG
VON
PMIBERRY/P53
R175H
.................................................................
43
3.2.1.13
RNA-ISOLATION
AUS
3D-KULTUREN
...........................................................................
43
3.2.1.14
REVERSE
TRANSKRIPTION
..........................................................................................
43
3.2.1.15
QUANTITATIVE
REAL-TIME-PCR
(QRT-PCR)
.............................................................
44
3.2.1.16
KOMPARATIVE
TRANSKRIPTOMANALYSE
....................................................................
45
3.2.2
PROTEIN-BIOCHEMISCHE
METHODEN
.........................................................................
46
3.2.2.1
HERSTELLUNG
VON
ZELLLYSATEN
...................................................................................
46
3.2.2.2
EFFEKTOR-PU//DOWN-ASSAY
........................................................................................
46
3.2.2.3
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SODIUM
DODECYLSULFATE
POLYACRYLAMIDE
GEL
ELECTROPHORESIS,
SDS-PAGE).............................................................
47
3.2.2.4
WESTERNBLOT-ANALYSEN
...........................................................................................
47
3.2.2.5
COOMASSIE-FAERBUNG
................................................................................................
48
3.2.2.6
BICINCHONINSAEURE-ASSAY
(BCA)
..............................................................................
48
3.2.3
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
........................................................................................
48
3.2.3.1
ZELLLINIEN
.................................................................................................................
48
3.2.3.2
ZELLKULTIVIERUNG
50
3.2.3.3
ZELLZAEHLUNG
50
3.2.3.4
KRYOKONSERVIERUNG
DER
ZELLLINIEN
50
3.2.3.5
INDUZIERBARE
GENEXPRESSION
DURCH
DAS
TET-SYSTEM
50
3.2.3.6
ELEKTROPORATION
ZUR
GENERIERUNG
VON
STABIL
TRANSFIZIERTEN,
INDUZIERBAREN
RHOA/RHOC-MCFTET-ZELLLINIEN
51
3.2.3.7
RETRO
UND
LENTIVIRALE
INFEKTIONEN
52
3.2.3.8
INDUKTION
DER
TRANSGEN
ODER
SHRNA-EXPRESSION
52
3.2.3.9
DURCHFLUSSZYTOMETRIE/FACS-ANALYSE
53
3.2.3.10
ANALYSEN
DER
GFP
UND
RFP-EXPRESSION
UEBER
FACS-MESSUNG
UND
ISOLIERUNG
POSITIVER
TRANSFEKTANTEN
UEBER
ZELLSORTIERUNG
53
3.2.3.11
KOLONIE-FORMATIONSANALYSE
53
3.2.3.12
2D-SPALTSCHLUSS-MIGRATIONSANALYSE
54
3.2.3.13
MIGRATIONS
UND
INVASIONSANALYSE
MITTELS
IMPEDANZMESSUNG
(XCELLIGENCE)
54
3.2.3.14
SENESZENZENZ-FAERBUNG
54
3.2.3.15
APO-ONE-ASSAY
55
3.2.3.16
TUNEL-FAERBUNG
55
3.2.3.17
DREI-DIMENSIONALE
(3D-)
ORGANOTYPISCHE
KULTUR
VON
BRUSTEPITHEL
UND
BRUSTKREBS-ZELLLINIEN
55
3.2.3.18
IMMUNFLUORESZENZ
UND
AKTIN-FAERBUNG
VON
3D-KULTUREN
56
3.2.3.19
KONFOKALE
MIKROSKOPIE
57
3.2.3.20
SEMI-AUTOMATISIERTE
INVASIVITAETSANALYSE
VON
ORGANOTYPISCHEN
3D-KULTUREN
57
4.
ERGEBNISSE
59
4.1.
DER
PRO-INVASIVE
EFFEKT
BAKTERIELLER
CNF-TOXINE
AUF
BRUSTEPITHELZELLEN
59
4.1.1
VALIDIERUNG
DES
MODELLSYSTEMS
MCF10A
-
EINER
NICHT-MALIGNEN
BRUSTEPITHEL
ZELLLINIE
59
4.1.2
CNF-TOXINE
BEWIRKEN
EINEN
INVASIVEN
PHAENOTYP
IN
MCFIOA-ZELLEN
60
4.1.3
DIE
CNF-INDUZIERTE
INVASIVITAET
BEI
MCFIOA-ZELLEN
GEHT
MIT
EINER
AKTIVIERUNG
DER
KLEINEN
GTPASEN
RHOA
UND
RHOC
EINHER
63
4.2
DIE
RHOC-GTPASE
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
CNF-VERMITTELTE
INVASIVITAET
66
4.2.1
DIE
GENERIERUNG
STABILER
RHOA
UND
RHOC-KNOCKDOWN-MCFLOA-VARIANTEN
....
66
4.2.2
RHOC-DEPLETION
VERMINDERT,
RHOA-DEPLETION
VERSTAERKT
DIE
CNF-INDUZIERTE
INVASIVITAET
VON
MCFIOA-ZELLEN
67
4.3
DIE
RHOC-GTPASE
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
INVASIVITAET
VON
AGGRESSIVEN,
TRIPLE
NEGATIVEN
BRUSTKREBSZELLEN
67
4.3.1
DIE
GENERIERUNG
STABILER
INDUZIERBARER
RHOA
UND
RHOC-KNOCKDOWN-SUM159
UND
SUM149PT-ZELLLINIEN
...................................................................................................
69
4.3.2
RHOC-DEPLETION
VERMINDERT
-
RHOA-DEPLETION
VERSTAERKT
DIE
INTRINSISCHE
INVASIVITAET
VON
AGGRESSIVEN,
TR/P/E-NEGATIVEN
BRUSTKREBSZELLEN
....................................69
4.4
DIE
UEBEREXPRESSION
VON
RHOC
IN
BRUSTEPITHELZELLEN
IST
NICHT
HINREICHEND
FUER
EINE
INVASIVE
TRANSFORMATION
.......................................................................................................
71
4.4.1
DIE
GENERIERUNG
VON
KONDITIONELL
RHOA
UND
RHOC-UEBEREXPRIMIERENDEN
MCFTET-ZELLEN
.......................................................................................................................73
4.4.2
DIE
RHOC-UEBEREXPRESSION
BEWIRKT
EINE
PRAEMALIGNE
TRANSFORMATION
OHNE
DEFINIERTE
INVASIVITAETSMERKMALE
IM
ORGANOTYPISCHEN
3D-ASSAY
...................................
74
4.4.3
DIE
BEEINFLUSSUNG
WEITERER
ZELLBIOLOGISCHER
PROZESSE
IN
BRUSTEPITHELZELLEN
DURCH
RHOA
UND
RHOC-UEBEREXPRESSION
UND
CNF-BEHANDLUNG
...................................75
4.5
DIE
RHOC-DOMINIERTE
GENSIGNATUR
.................................................................................
78
4.5.1
DIE
CNF-BEHANDLUNG
INDUZIERT
EIN
RHOC-DOMINIERTES,
MIT
EMT-ASSOZIIERTES
GENEXPRESSIONSPROFIL
...........................................................................................................
78
4.5.2
DIE
EVALUATION
RHOC-ABHAENGIGER,
CNF-INDUZIERTER
PRO-INVASIVER
KANDIDATENGENE
....................................................................................................................
81
4.6
DER
RHOC-P38
MAPK
-COX-2-SIGNALWEG
IST
POTENTIELL
BETEILIGT
AN
DER
CNF
VERMITTELTEN
INVASIVITAET
.........................................................................................................
83
4.6.1
DIE
RHOC-INDUZIERTE
COX-2-EXPRESSION
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
INVASIVITAET
DURCH
CNF-TOXINE
............................................................................................................................83
4.6.2
DIE
P38
MAPK
ALS
POTENTIELLES
BINDEGLIED
ZWISCHEN
RHOC
UND
COX-2
...................
86
4.7
DIE
SUCHE
NACH
KOOPERIERENDEN
PRO-INVASIVEN
FAKTOREN
..........................................
88
4.7.1
DIE
ROLLE
DER
RAEL
UND
CDC42-AKTIVIERUNG
IN
DER
CNF-INDUZIERTEN
INVASIVITAET
VON
MCFIOA-ZELLEN
..............................................................................................................
88
4.7.2
DIE
KOEXPRESSION
VON
MUTIERTEM
P53
IN
RHOC-UEBEREXPRIMIERENDEN
BRUSTEPITHELZELLEN
................................................................................................................
91
5.
DISKUSSION.............................................................................................................................
93
5.1
ZUR
CNF1
UND
CNFY-INDUZIERTEN
INVASIVITAET
IN
EINEM
NICHT-TUMORIGENEN
BRUSTEPITHEL-MODELL
...............................................................................................................
93
5.2
RHOA
UND
RHOC
IN
DEN
MODELLSYSTEMEN
ZUR
BRUSTKREBSENTSTEHUNG
UND
-
PROGRESSION
...............................................................................................................................
97
5.3
DER
COX-2-SIGNALWEG
ALS
POTENTIELLER
VERMITTLER
DER
RHOC-ABHAENGIGEN
INVASIVITAET
101
5.4
IMPLIKATIONEN
FUER
DIE
ROLLE
VON
RHO-GTPASEN
IM
KREBSGESCHEHEN.......................
103
5.5
IMPLIKATIONEN
FUER
DIE
ROLLE
VON
CNF-TOXINEN
IM
KREBSGESCHEHEN.........................
106
6.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.....................................................................................................
110
7.
LITERATURVERZEICHNIS
...........................................................................................................
114
8.
ANHANG
................................................................................................................................
142
9.
VEROEFFENTLICHUNGEN
.........................................................................................................
153
10.
DANKSAGUNG
.....................................................................................................................
155
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
2.
EINLEITUNG
.
3
2.1
CHARAKTERISTIKA
VON
TUMORERKRANKUNGEN
.
3
2.2
DAS
MAMMAKARZINOM
-
EPIDEMIOLOGIE
UND
KLINIK
.
4
2.3
DIE
MOLEKULARE
PATHOGENESE
VON
BRUSTKREBS
.
5
2.4
ZELLMIGRATIONEN
ALS
GRUNDLAGE
DER
METASTASIERUNG
.7
2.4.1
MODELLIERUNG
DES
AKTINZYTOSKELETTS
UND
ZELLULAERER
FORTSAETZE
ALS
GRUNDLAGE
VON
ZELLMOTILITAET
.
8
2.4.2
MESENCHYMALE
MIGRATION
.10
2.4.3
AMOEBOIDE
MIGRATION
.
11
2.4.4
KOLLEKTIVE
MIGRATION
.
11
2.4.5
PLASTIZITAET
UND
UEBERGAENGE
DER
ZELLMIGRATIONSART
WAEHREND
DER
METASTASIERUNGLZ
2.5
DIE
FAMILIE
DER
RHO-GTPASEN
.
14
2.5.1
DIE
REGULATION
VON
RHO-GTPASEN
.
16
2.5.2
RHO-EFFEKTOREN
IN
DER
REGULATION
DES
ZYTOSKELETTS
.
17
2.6
RHO-GTPASEN
-
EIN
ANGRIFFSPUNKT
BAKTERIELLER
TOXINE
.19
2.7
RHO-GTPASEN
IM
TUMORGESCHEHEN
.
21
2.7.1
DIE
AKTUELLE
STUDIENLAGE
VON
RHOA
UND
RHOC
IM
MALIGNEN
KONTEXT
.
22
2.8
DIE
ZIELSETZUNG
DIESER
STUDIE
.
26
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
27
3.1
MATERIALIEN
.
27
3.1.1
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.27
3.1.2
CHEMIKALIEN
UND
REAGENZIEN
.27
3.1.2.1
REAGENZIEN
UND
REAGENZIENSAETZE
(KITS)
.
27
3.1.2.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
28
3.1.3
ENZYME
.
30
3.1.4
VEKTOREN
UND
PLASMIDE
.
30
3.1.5
OLIGONUKLEOTIDE
.32
3.1.5.1
KLONIERUNGSVEKTOREN
.
32
3.1.5.2
SEQUENZIERPRIMER
.32
3.1.5.3
REAL-TIME
PCR-PRIMER
.
33
3.1.6
ANTIKOERPER
.33
3.1.7
ZELLKULTUR-REAGENZIEN
.
34
3.1.8
ZELLKULTUR-MEDIEN
.35
3.1.9
PHARMAKOLOGISCHE
INHIBITOREN
.35
3.1.10
BAKTERIENSTAEMME
.
36
3.1.11
BAKTERIEN-WACHSTUMSMEDIEN
.
36
3.1.12
LB-ZUSAETZE
.
36
3.1.13
GERAETE
.
37
3.1.14
SOFTWARE
.
37
3.2
METHODEN
.
39
3.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.39
3.2.1.1
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(POLYMERASE
CHAIN
REACTION,
PCR)
.
39
3.2.1.2
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
UND
GELEXTRAKTION
.
40
3.2.1.3
KLONIERUNG
VON
PCR-GENERIERTEN
DNA-FRAGMENTEN
.
40
3.2.1.4
RESTRIKTIONSVERDAU
UND
VEKTOR-LINEARISIERUNG
.
40
3.2.1.5
DEPHOSPHORYLIERUNG
.
41
3.2.1.6
DNA-LIGATION
.
41
3.2.1.7
TRANSFORMATIONEN
VON
PLASMID-DNA
IN
E.
COLI
.
41
3.2.1.8
PLASMID-AUFREINIGUNGEN
.
42
3.2.1.9
DNA-SEQUENZIERUNG
.
42
3.2.1.10
GENERIERUNG
VON
PTET/RHOA
BZW.
PTET/RHOC-IRES-GFP-BSR.
42
3.2.1.11
GENERIERUNG
VON
PTRIPZ
RHOA
UND
PTRIPZ
RHOC
.
42
3.2.1.12
GENERIERUNG
VON
PTRIPZ
RAEL
UND
PTRIPZ
CDC42
.
43
3.2.1.12
GENERIERUNG
VON
PMIBERRY/P53
R175H
.
43
3.2.1.13
RNA-ISOLATION
AUS
3D-KULTUREN
.
43
3.2.1.14
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
43
3.2.1.15
QUANTITATIVE
REAL-TIME-PCR
(QRT-PCR)
.
44
3.2.1.16
KOMPARATIVE
TRANSKRIPTOMANALYSE
.
45
3.2.2
PROTEIN-BIOCHEMISCHE
METHODEN
.
46
3.2.2.1
HERSTELLUNG
VON
ZELLLYSATEN
.
46
3.2.2.2
EFFEKTOR-PU//DOWN-ASSAY
.
46
3.2.2.3
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SODIUM
DODECYLSULFATE
POLYACRYLAMIDE
GEL
ELECTROPHORESIS,
SDS-PAGE).
47
3.2.2.4
WESTERNBLOT-ANALYSEN
.
47
3.2.2.5
COOMASSIE-FAERBUNG
.
48
3.2.2.6
BICINCHONINSAEURE-ASSAY
(BCA)
.
48
3.2.3
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
.
48
3.2.3.1
ZELLLINIEN
.
48
3.2.3.2
ZELLKULTIVIERUNG
50
3.2.3.3
ZELLZAEHLUNG
50
3.2.3.4
KRYOKONSERVIERUNG
DER
ZELLLINIEN
50
3.2.3.5
INDUZIERBARE
GENEXPRESSION
DURCH
DAS
TET-SYSTEM
50
3.2.3.6
ELEKTROPORATION
ZUR
GENERIERUNG
VON
STABIL
TRANSFIZIERTEN,
INDUZIERBAREN
RHOA/RHOC-MCFTET-ZELLLINIEN
51
3.2.3.7
RETRO
UND
LENTIVIRALE
INFEKTIONEN
52
3.2.3.8
INDUKTION
DER
TRANSGEN
ODER
SHRNA-EXPRESSION
52
3.2.3.9
DURCHFLUSSZYTOMETRIE/FACS-ANALYSE
53
3.2.3.10
ANALYSEN
DER
GFP
UND
RFP-EXPRESSION
UEBER
FACS-MESSUNG
UND
ISOLIERUNG
POSITIVER
TRANSFEKTANTEN
UEBER
ZELLSORTIERUNG
53
3.2.3.11
KOLONIE-FORMATIONSANALYSE
53
3.2.3.12
2D-SPALTSCHLUSS-MIGRATIONSANALYSE
54
3.2.3.13
MIGRATIONS
UND
INVASIONSANALYSE
MITTELS
IMPEDANZMESSUNG
(XCELLIGENCE)
54
3.2.3.14
SENESZENZENZ-FAERBUNG
54
3.2.3.15
APO-ONE-ASSAY
55
3.2.3.16
TUNEL-FAERBUNG
55
3.2.3.17
DREI-DIMENSIONALE
(3D-)
ORGANOTYPISCHE
KULTUR
VON
BRUSTEPITHEL
UND
BRUSTKREBS-ZELLLINIEN
55
3.2.3.18
IMMUNFLUORESZENZ
UND
AKTIN-FAERBUNG
VON
3D-KULTUREN
56
3.2.3.19
KONFOKALE
MIKROSKOPIE
57
3.2.3.20
SEMI-AUTOMATISIERTE
INVASIVITAETSANALYSE
VON
ORGANOTYPISCHEN
3D-KULTUREN
57
4.
ERGEBNISSE
59
4.1.
DER
PRO-INVASIVE
EFFEKT
BAKTERIELLER
CNF-TOXINE
AUF
BRUSTEPITHELZELLEN
59
4.1.1
VALIDIERUNG
DES
MODELLSYSTEMS
MCF10A
-
EINER
NICHT-MALIGNEN
BRUSTEPITHEL
ZELLLINIE
59
4.1.2
CNF-TOXINE
BEWIRKEN
EINEN
INVASIVEN
PHAENOTYP
IN
MCFIOA-ZELLEN
60
4.1.3
DIE
CNF-INDUZIERTE
INVASIVITAET
BEI
MCFIOA-ZELLEN
GEHT
MIT
EINER
AKTIVIERUNG
DER
KLEINEN
GTPASEN
RHOA
UND
RHOC
EINHER
63
4.2
DIE
RHOC-GTPASE
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
CNF-VERMITTELTE
INVASIVITAET
66
4.2.1
DIE
GENERIERUNG
STABILER
RHOA
UND
RHOC-KNOCKDOWN-MCFLOA-VARIANTEN
.
66
4.2.2
RHOC-DEPLETION
VERMINDERT,
RHOA-DEPLETION
VERSTAERKT
DIE
CNF-INDUZIERTE
INVASIVITAET
VON
MCFIOA-ZELLEN
67
4.3
DIE
RHOC-GTPASE
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
INVASIVITAET
VON
AGGRESSIVEN,
TRIPLE
NEGATIVEN
BRUSTKREBSZELLEN
67
4.3.1
DIE
GENERIERUNG
STABILER
INDUZIERBARER
RHOA
UND
RHOC-KNOCKDOWN-SUM159
UND
SUM149PT-ZELLLINIEN
.
69
4.3.2
RHOC-DEPLETION
VERMINDERT
-
RHOA-DEPLETION
VERSTAERKT
DIE
INTRINSISCHE
INVASIVITAET
VON
AGGRESSIVEN,
TR/P/E-NEGATIVEN
BRUSTKREBSZELLEN
.69
4.4
DIE
UEBEREXPRESSION
VON
RHOC
IN
BRUSTEPITHELZELLEN
IST
NICHT
HINREICHEND
FUER
EINE
INVASIVE
TRANSFORMATION
.
71
4.4.1
DIE
GENERIERUNG
VON
KONDITIONELL
RHOA
UND
RHOC-UEBEREXPRIMIERENDEN
MCFTET-ZELLEN
.73
4.4.2
DIE
RHOC-UEBEREXPRESSION
BEWIRKT
EINE
PRAEMALIGNE
TRANSFORMATION
OHNE
DEFINIERTE
INVASIVITAETSMERKMALE
IM
ORGANOTYPISCHEN
3D-ASSAY
.
74
4.4.3
DIE
BEEINFLUSSUNG
WEITERER
ZELLBIOLOGISCHER
PROZESSE
IN
BRUSTEPITHELZELLEN
DURCH
RHOA
UND
RHOC-UEBEREXPRESSION
UND
CNF-BEHANDLUNG
.75
4.5
DIE
RHOC-DOMINIERTE
GENSIGNATUR
.
78
4.5.1
DIE
CNF-BEHANDLUNG
INDUZIERT
EIN
RHOC-DOMINIERTES,
MIT
EMT-ASSOZIIERTES
GENEXPRESSIONSPROFIL
.
78
4.5.2
DIE
EVALUATION
RHOC-ABHAENGIGER,
CNF-INDUZIERTER
PRO-INVASIVER
KANDIDATENGENE
.
81
4.6
DER
RHOC-P38
MAPK
-COX-2-SIGNALWEG
IST
POTENTIELL
BETEILIGT
AN
DER
CNF
VERMITTELTEN
INVASIVITAET
.
83
4.6.1
DIE
RHOC-INDUZIERTE
COX-2-EXPRESSION
IST
ESSENTIELL
FUER
DIE
INVASIVITAET
DURCH
CNF-TOXINE
.83
4.6.2
DIE
P38
MAPK
ALS
POTENTIELLES
BINDEGLIED
ZWISCHEN
RHOC
UND
COX-2
.
86
4.7
DIE
SUCHE
NACH
KOOPERIERENDEN
PRO-INVASIVEN
FAKTOREN
.
88
4.7.1
DIE
ROLLE
DER
RAEL
UND
CDC42-AKTIVIERUNG
IN
DER
CNF-INDUZIERTEN
INVASIVITAET
VON
MCFIOA-ZELLEN
.
88
4.7.2
DIE
KOEXPRESSION
VON
MUTIERTEM
P53
IN
RHOC-UEBEREXPRIMIERENDEN
BRUSTEPITHELZELLEN
.
91
5.
DISKUSSION.
93
5.1
ZUR
CNF1
UND
CNFY-INDUZIERTEN
INVASIVITAET
IN
EINEM
NICHT-TUMORIGENEN
BRUSTEPITHEL-MODELL
.
93
5.2
RHOA
UND
RHOC
IN
DEN
MODELLSYSTEMEN
ZUR
BRUSTKREBSENTSTEHUNG
UND
-
PROGRESSION
.
97
5.3
DER
COX-2-SIGNALWEG
ALS
POTENTIELLER
VERMITTLER
DER
RHOC-ABHAENGIGEN
INVASIVITAET
101
5.4
IMPLIKATIONEN
FUER
DIE
ROLLE
VON
RHO-GTPASEN
IM
KREBSGESCHEHEN.
103
5.5
IMPLIKATIONEN
FUER
DIE
ROLLE
VON
CNF-TOXINEN
IM
KREBSGESCHEHEN.
106
6.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
110
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
114
8.
ANHANG
.
142
9.
VEROEFFENTLICHUNGEN
.
153
10.
DANKSAGUNG
.
155 |
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| spelling | Lang, Sarah Verfasser (DE-588)1235414108 aut Von bakteriellen Toxinen und maligner Transformation der Beitrag von Rho-GTPasen zum Krebsgeschehen vorgelegt von Sarah Lang Freiburg im Breisgau Dezember 2020 155 Seiten Illustrationen, Diagramme 30 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Dissertation Albert-Ludwigs-Universität Freiburg 2021 4\p Rho-Proteine (DE-588)4681926-5 gnd 5\p Invasives Wachstum (DE-588)4193964-5 gnd 6\p Zelle (DE-588)4067537-3 gnd 7\p Transformation Genetik (DE-588)4268828-0 gnd 8\p Epithelzelle (DE-588)4259648-8 gnd (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content B:DE-101 application/pdf https://d-nb.info/1235252280/04 Inhaltsverzeichnis DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=032899612&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis 1\p aepkn 0,95056 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepkn 2\p dnb 20210714 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#dnb 3\p dnb 20210714 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#dnb 4\p aepgnd 0,16024 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepgnd 5\p aepgnd 0,03410 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepgnd 6\p aepgnd 0,02721 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepgnd 7\p aepgnd 0,02642 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepgnd 8\p aepgnd 0,02298 20210630 DE-101 https://d-nb.info/provenance/plan#aepgnd |
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Inhaltsverzeichnis