TGFβ-induzierte Regulation der Fcγ-Rezeptor-vermittelten mikroglialen Phagozytose:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
2020
|
Schlagworte: | |
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Beschreibung: | Im Titel ist "γ" tiefgestellt |
Beschreibung: | 102 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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---|---|
adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
..........................................................................
1
1.1
MIKROGLIA
.........................................................................................
1
1.1.1
DEFINITION
UND
ENTDECKUNG
...................................................................
1
1.1.2
ENTWICKLUNG
.........................................................................................
2
1.1.3
MORPHOLOGIE
........................................................................................
3
1.1.4
FUNKTION
..............................................................................................
4
1.1.5
REGULATION
UND
AKTIVIERUNG
.................................................................
6
1.1.6
ROLLE
IN
ERKRANKUNGEN
........................................................................8
1.2
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
SS
(TGFSS)
.......................................
13
1.3
FCY-REZEPTOREN.........................................................................
17
1.3.1
FCY-REZEPTOREN
ALS
TEIL
EFFEKTIVER
IMMUNITAET
...................................
17
1.3.2
SYSTEMATIK
UND
AUFBAU
....................................................................
18
1.3.3
SIGNALWEG
.........................................................................................
20
1.3.4
FUNKTION
UND
REGULATION
..................................................................
21
2.
ZIEL
DER
ARBEIT
.................................................................
24
3.
MATERIAL............................................................................
25
3.1
MAEUSE
UND
ZELLEN
.....................................................................
25
3.2
CHEMIKALIEN
.............................................................................
25
3.3
ZYTOKINE,
ENZYME,
INHIBITOREN
....................................................
26
3.4
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
KITS
........................................................
26
3.5
ANTIKOERPER
.................................................................................
26
3.5.1
IMMUNZYTOCHEMIE.............................................................................
26
3.5.1.1
PRIMAERE
ANTIKOERPER
...................................................................
26
3.5.1.2
SEKUNDAERE
ANTIKOERPER
..............................................................
26
3.5.2
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.......................................................................
21
3.6
VERBRAUCHSMATERIALIEN
..............................................................
27
3.7
GERAETE
......................................................................................
27
3.8
SOFTWARE
...................................................................................
28
4.
METHODEN........................................................................
29
4.1
ZELLKULTUREN
...............................................................................
29
4.1.1
PRIMAERE
MIKROGLIAKULTUR......................................................................
29
4.1.2
MLEC
ZELLKULTUR
.................................................................................
31
4.2
IMMUNZYTOCHEMIE.....................................................................
31
4.2.1
FIXIERUNG
UND
TGFSS-1-BEHANDLUNG
PRIMAERER
MIKROGLIA
....................
32
4.2.2
VORBEREITUNG
DER
FEUCHTKAMMER
ALS
ARBEITSUNTERLAGE
.....................
34
4.2.3
BLOCKING
UND
AUFTRAEGEN
DES
PRIMAEREN
ANTIKOERPERS
............................
34
4.2.4
AUFTRAEGEN
DES
SEKUNDAEREN
ANTIKOERPERS
UND
UEBERTRAGUNG
AUF
OBJEKTTRAEGER
......................................................................................
35
4.3
CHEMOLUMINESZENZ
-
LUZIFERASE-ASSAY
..................................
36
4.3.1
VORBEREITUNG
DER
ZELLEN
....................................................................
37
4.3.2
BEHANDLUNG
DER
ZELLEN
MIT
DEM
TESTMEDIUM
...................................
38
4.3.3
BESTIMMUNG
DER
LUZIFERASE-AKTIVITAET
................................................
40
4.4
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
................................................................
40
4.4.1
IN-VITRO
ANSATZ
..................................................................................
42
4.4.1.1
VORBEREITUNG
UND
BEHANDLUNG
DER
MIKROGLIA
.............................
42
4.4.1.2
FAERBUNG
DER
ZELLEN
..................................................................
43
4.4.1.3
AUSWERTUNG
UND
PROTOKOLLIERUNG
DER
ERGEBNISSE
MITTELS
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
...............................................................
45
4.4.2
IN-VIVO
ANSATZ
....................................................................................
45
4.4.2.1
ISOLATION
DER
ZELLEN
..................................................................
46
4.4.2.2
DURCHFUEHRUNG
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
..................................
47
4.5
PHAGOZYTOSE-ASSAY
..................................................................
47
5.
ERGEBNISSE
......................................................................
49
5.1
IMMUNZYTOCHEMIE.....................................................................
49
5.1.1
BEHANDLUNG
PRIMAERER
MIKROGLIA
MIT
TGFSS-1
INDUZIERT
EINE
NUKLEAERE
TRANSLOKATION
DES
SMAD/COSMAD
KOMPLEXES
................................
49
5.2
LUZIFERASE-ASSAY
......................................................................
52
5.3
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
................................................................
55
5.3.1
IN-VITRO
ANSATZ
...................................................................................
55
5.3.2
IN-VIVO
ANSATZ
....................................................................................
65
5.4
PHAGOZYTOSE-ASSAY
..................................................................
70
6.
DISKUSSION
......................................................................
74
ANHANG
LITERATURVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG
LEBENSLAUF
DANKSAGUNG
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
|
adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
MIKROGLIA
.
1
1.1.1
DEFINITION
UND
ENTDECKUNG
.
1
1.1.2
ENTWICKLUNG
.
2
1.1.3
MORPHOLOGIE
.
3
1.1.4
FUNKTION
.
4
1.1.5
REGULATION
UND
AKTIVIERUNG
.
6
1.1.6
ROLLE
IN
ERKRANKUNGEN
.8
1.2
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
SS
(TGFSS)
.
13
1.3
FCY-REZEPTOREN.
17
1.3.1
FCY-REZEPTOREN
ALS
TEIL
EFFEKTIVER
IMMUNITAET
.
17
1.3.2
SYSTEMATIK
UND
AUFBAU
.
18
1.3.3
SIGNALWEG
.
20
1.3.4
FUNKTION
UND
REGULATION
.
21
2.
ZIEL
DER
ARBEIT
.
24
3.
MATERIAL.
25
3.1
MAEUSE
UND
ZELLEN
.
25
3.2
CHEMIKALIEN
.
25
3.3
ZYTOKINE,
ENZYME,
INHIBITOREN
.
26
3.4
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
KITS
.
26
3.5
ANTIKOERPER
.
26
3.5.1
IMMUNZYTOCHEMIE.
26
3.5.1.1
PRIMAERE
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.
26
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.
26
3.5.2
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
"21
3.6
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
27
3.7
GERAETE
.
27
3.8
SOFTWARE
.
28
4.
METHODEN.
29
4.1
ZELLKULTUREN
.
29
4.1.1
PRIMAERE
MIKROGLIAKULTUR.
29
4.1.2
MLEC
ZELLKULTUR
.
31
4.2
IMMUNZYTOCHEMIE.
31
4.2.1
FIXIERUNG
UND
TGFSS-1-BEHANDLUNG
PRIMAERER
MIKROGLIA
.
32
4.2.2
VORBEREITUNG
DER
FEUCHTKAMMER
ALS
ARBEITSUNTERLAGE
.
34
4.2.3
BLOCKING
UND
AUFTRAEGEN
DES
PRIMAEREN
ANTIKOERPERS
.
34
4.2.4
AUFTRAEGEN
DES
SEKUNDAEREN
ANTIKOERPERS
UND
UEBERTRAGUNG
AUF
OBJEKTTRAEGER
.
35
4.3
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-
LUZIFERASE-ASSAY
.
36
4.3.1
VORBEREITUNG
DER
ZELLEN
.
37
4.3.2
BEHANDLUNG
DER
ZELLEN
MIT
DEM
TESTMEDIUM
.
38
4.3.3
BESTIMMUNG
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LUZIFERASE-AKTIVITAET
.
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4.4
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.
40
4.4.1
IN-VITRO
ANSATZ
.
42
4.4.1.1
VORBEREITUNG
UND
BEHANDLUNG
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MIKROGLIA
.
42
4.4.1.2
FAERBUNG
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ZELLEN
.
43
4.4.1.3
AUSWERTUNG
UND
PROTOKOLLIERUNG
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ERGEBNISSE
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DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
45
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ANSATZ
.
45
4.4.2.1
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46
4.4.2.2
DURCHFUEHRUNG
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DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
47
4.5
PHAGOZYTOSE-ASSAY
.
47
5.
ERGEBNISSE
.
49
5.1
IMMUNZYTOCHEMIE.
49
5.1.1
BEHANDLUNG
PRIMAERER
MIKROGLIA
MIT
TGFSS-1
INDUZIERT
EINE
NUKLEAERE
TRANSLOKATION
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SMAD/COSMAD
KOMPLEXES
.
49
5.2
LUZIFERASE-ASSAY
.
52
5.3
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
55
5.3.1
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.
55
5.3.2
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ANSATZ
.
65
5.4
PHAGOZYTOSE-ASSAY
.
70
6.
DISKUSSION
.
74
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