Die Rolle des endogenen TLR4-Liganden S100A12 für die IL-17A-Expression durch T-Zellen in der systemischen juvenilen idiopathischen Arthritis (sJIA):
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Münster
2020
|
Schlagworte: | |
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---|---|
adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
........................................................................................................
1
1.1.
AUFBAU
UND
FUNKTION
DES
IMMUNSYSTEMS...............................................................................
1
1.2.
AUTOINFLAMMATION
..................................................................................................................
2
1.3.
SYSTEMISCHE
JUVENILE
IDIOPATHISCHE
ARTHRITIS
(SJIA)
.................................................................
3
1.4.
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
SJIA
.......................................................................................................
3
1.4.1.
DIE
ROLLE
DES
ANGEBORENEN
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
SJIA
...........................................................
4
1.4.2.
DIE
ROLLE
DES
ADAPTIVEN
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
SJIA
................................................................
6
1.4.3.
YOET-ZELLEN
ALS
VERBINDENDES
ELEMENT
....................................................................................
8
1.5.
WINDOW
OFOPPORTUNITY
.........................................................................................................
8
2.
ZIELSETZUNG
...................................................................................................
10
3.
MATERIAL
.........................................................................................................
11
3.1.
AUSSTATTUNG
..........................................................................................................................
11
3.2.
VERBRAUCHSMATERIAL
..............................................................................................................
12
3.3.
KITS
........................................................................................................................................
12
3.4.
CHEMIKALIEN,
STIMULANZIEN
UND
PUFFER
..................................................................................
13
3.4.1.
HERSTELLUNG
VON
HEXAMEREM
S100A12
..................................................................................
14
3.4.2.
HERSTELLUNG
DES
FACS-PUFFERS
...............................................................................................
14
3.4.3.
HERSTELLUNG
DES
RPMI-MEDIUMS...........................................................................................
14
3.4.4.
HERSTELLUNG
VON
HBSS
...........................................................................................................
15
3.5.
ANTIKOERPER
............................................................................................................................
15
3.6.
BLUTMATERIAL
................................................................
15
4.
METHODEN
.......................................................................................................
18
4.1.
ZELLDICHTE
BESTIMMEN
...........................................................................................................
18
4.2.
ZELLSEPARATION
.......................................................................................................................
18
4.2.1.
PERIPHERAL
BLOOD
MONONUCLEAR
CELIS
(PBMCS)
......................................................................
18
4.2.2.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD3
+
ZELLEN.........................................................................
18
4.2.3.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD4
+
T-ZELLEN
.....................................................................
19
4.2.4.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD8
+
ZELLEN.........................................................................
19
4.2.5.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
MONOZYTEN
........................................................................
19
4.3.
ZELLKULTUREN
..........................................................................................................................
20
4.3.1.
STIMULATION
VON
PERIPHERAL
BLOOD
MONONUCLEAR
CELIS
(PBMCS)
............................................
20
4.3.2.
KO-KULTUR
VON
MONOZYTEN
UND
T-ZELLEN
................................................................................
20
4.3.3.
CD8
+
T-ZELL-TRANSFER
EXPERIMENT
...........................................................................................
21
4.3.4.
MONOZYTEN-UEBERSTANDTRANSFER
EXPERIMENT......................................................
22
4.4.
FLUORESZENZ-DURCHFLUSSZYTOMETRIE.......................................................................................
23
4.4.1.
AUSWERTUNG
..........................................................................................................................
25
4.5.
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
......................................................................
25
4.6.
LUMINEX
................................................................................................................................
26
4.7.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
COMPUTERPROGRAMME
............................................................
27
5.
ERGEBNISSE
....................................................................................................
28
5.1.
S100A12
IST
WIE
LPS
IN
DER
LAGE
IN
PBMCS
IL-17-SEKRETION
ZU
INDUZIEREN
............................
28
5.2.
MONOZYTEN
UND
CD3
+
T-ZELLEN
SIND
AN
DER
INDUKTION
DER
IL-17-SEKRETION
BETEILIGT
.............
29
5.3.
S100A12
HAT
AUF
CD8
+
T-ZELL-AKTIVITAET
UND
-PROLIFERATION
EINEN
STAERKEREN
EFFEKT
ALS
LPS
......
30
5.4.
EIN
MANGEL
CD8
+
T-ZELLEN
FUEHRT
ZU
EINER
DYSREGULIERTEN
T
H
17-ANTWORT
.................................
34
5.5.
CD8
+
T-ZELLEN
SIND
IN
DER
LAGE
DIE
TH17-ANTWORT
ZU
MODIFIZIEREN
.........................................
35
5.6.
S100A12
VERSUS
LPS
STIMULIERTE
CD8
+
T-ZELLEN
UNTERSCHEIDEN
SICH
IN
IHREM
PHAENOTYP.........
36
5.7.
CD8
+
T-ZELLEN
SIND
IN
DER
SJIA
UNTERREPRAESENTIERT,
ABER
IN
BESONDEREM
MASSE
AKTIVIERT
.......
39
6.
DISKUSSION.....................................................................................................
41
7.
LITERATURVERZEICHNIS................................................................................
52
8.
DANKSAGUNG
..................................................................................................
61
9.
LEBENSLAUF
....................................................................................................
62
10.
ANHANG
...............................................................................................................
I
10.1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS............................................................................................................
*
10.2.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS...........................................................................................................
IV
10.3.
ERGAENZENDE
ERGEBNISSE
...........................................................................................................
V
10.3.1.
S100A12
UNTERSCHEIDET
SICH
NICHT WESENTLICH
VON
LPS
IN
SEINEM
EFFEKT
AUF
MONOZYTAERE
DIFFERENZIERUNG
...................................................................................................................
VI
10.3.2.
DIE
ZYTOKINE
IL-6,
IL-LSS
UND
IFNY
SIND
UNTER
LPS-STIMULATION,
IM
VERGLEICH
ZUR
S100A12-
STIMULATION,
DEUTLICH
ERHOEHT
................................................................................................
VII
10.3.3.
UNTERSCHIEDE
IN
DER
IL-15RA-EXPRESSION
AUF
MONOZYTEN,
UNTER
STIMULATIONEN
MIT
S100A12
VERSUS
LPS,
KONNTEN
NICHT
BESTAETIGT
WERDEN
.......................................................
VIII
10.3.4.
YOET-ZELLEN
SPIELEN
EINE
UNTERGEORDNETE
ROLLE
......................................................................
IX
10.4.
GENEHMIGUNGEN
DER
ETHIK-KOMMISSION
X
|
adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
AUFBAU
UND
FUNKTION
DES
IMMUNSYSTEMS.
1
1.2.
AUTOINFLAMMATION
.
2
1.3.
SYSTEMISCHE
JUVENILE
IDIOPATHISCHE
ARTHRITIS
(SJIA)
.
3
1.4.
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
SJIA
.
3
1.4.1.
DIE
ROLLE
DES
ANGEBORENEN
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
SJIA
.
4
1.4.2.
DIE
ROLLE
DES
ADAPTIVEN
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
SJIA
.
6
1.4.3.
YOET-ZELLEN
ALS
VERBINDENDES
ELEMENT
.
8
1.5.
WINDOW
OFOPPORTUNITY
.
8
2.
ZIELSETZUNG
.
10
3.
MATERIAL
.
11
3.1.
AUSSTATTUNG
.
11
3.2.
VERBRAUCHSMATERIAL
.
12
3.3.
KITS
.
12
3.4.
CHEMIKALIEN,
STIMULANZIEN
UND
PUFFER
.
13
3.4.1.
HERSTELLUNG
VON
HEXAMEREM
S100A12
.
14
3.4.2.
HERSTELLUNG
DES
FACS-PUFFERS
.
14
3.4.3.
HERSTELLUNG
DES
RPMI-MEDIUMS.
14
3.4.4.
HERSTELLUNG
VON
HBSS
.
15
3.5.
ANTIKOERPER
.
15
3.6.
BLUTMATERIAL
.
15
4.
METHODEN
.
18
4.1.
ZELLDICHTE
BESTIMMEN
.
18
4.2.
ZELLSEPARATION
.
18
4.2.1.
PERIPHERAL
BLOOD
MONONUCLEAR
CELIS
(PBMCS)
.
18
4.2.2.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD3
+
ZELLEN.
18
4.2.3.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD4
+
T-ZELLEN
.
19
4.2.4.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
CD8
+
ZELLEN.
19
4.2.5.
IMMUNMAGNETISCHE
SEPARATION:
MONOZYTEN
.
19
4.3.
ZELLKULTUREN
.
20
4.3.1.
STIMULATION
VON
PERIPHERAL
BLOOD
MONONUCLEAR
CELIS
(PBMCS)
.
20
4.3.2.
KO-KULTUR
VON
MONOZYTEN
UND
T-ZELLEN
.
20
4.3.3.
CD8
+
T-ZELL-TRANSFER
EXPERIMENT
.
21
4.3.4.
MONOZYTEN-UEBERSTANDTRANSFER
EXPERIMENT.
22
4.4.
FLUORESZENZ-DURCHFLUSSZYTOMETRIE.
23
4.4.1.
AUSWERTUNG
.
25
4.5.
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
.
25
4.6.
LUMINEX
.
26
4.7.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
COMPUTERPROGRAMME
.
27
5.
ERGEBNISSE
.
28
5.1.
S100A12
IST
WIE
LPS
IN
DER
LAGE
IN
PBMCS
IL-17-SEKRETION
ZU
INDUZIEREN
.
28
5.2.
MONOZYTEN
UND
CD3
+
T-ZELLEN
SIND
AN
DER
INDUKTION
DER
IL-17-SEKRETION
BETEILIGT
.
29
5.3.
S100A12
HAT
AUF
CD8
+
T-ZELL-AKTIVITAET
UND
-PROLIFERATION
EINEN
STAERKEREN
EFFEKT
ALS
LPS
.
30
5.4.
EIN
MANGEL
CD8
+
T-ZELLEN
FUEHRT
ZU
EINER
DYSREGULIERTEN
T
H
17-ANTWORT
.
34
5.5.
CD8
+
T-ZELLEN
SIND
IN
DER
LAGE
DIE
TH17-ANTWORT
ZU
MODIFIZIEREN
.
35
5.6.
S100A12
VERSUS
LPS
STIMULIERTE
CD8
+
T-ZELLEN
UNTERSCHEIDEN
SICH
IN
IHREM
PHAENOTYP.
36
5.7.
CD8
+
T-ZELLEN
SIND
IN
DER
SJIA
UNTERREPRAESENTIERT,
ABER
IN
BESONDEREM
MASSE
AKTIVIERT
.
39
6.
DISKUSSION.
41
7.
LITERATURVERZEICHNIS.
52
8.
DANKSAGUNG
.
61
9.
LEBENSLAUF
.
62
10.
ANHANG
.
I
10.1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.
*
10.2.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS.
IV
10.3.
ERGAENZENDE
ERGEBNISSE
.
V
10.3.1.
S100A12
UNTERSCHEIDET
SICH
NICHT WESENTLICH
VON
LPS
IN
SEINEM
EFFEKT
AUF
MONOZYTAERE
DIFFERENZIERUNG
.
VI
10.3.2.
DIE
ZYTOKINE
IL-6,
IL-LSS
UND
IFNY
SIND
UNTER
LPS-STIMULATION,
IM
VERGLEICH
ZUR
S100A12-
STIMULATION,
DEUTLICH
ERHOEHT
.
VII
10.3.3.
UNTERSCHIEDE
IN
DER
IL-15RA-EXPRESSION
AUF
MONOZYTEN,
UNTER
STIMULATIONEN
MIT
S100A12
VERSUS
LPS,
KONNTEN
NICHT
BESTAETIGT
WERDEN
.
VIII
10.3.4.
YOET-ZELLEN
SPIELEN
EINE
UNTERGEORDNETE
ROLLE
.
IX
10.4.
GENEHMIGUNGEN
DER
ETHIK-KOMMISSION
X |
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