Zell- und Gewebekultur: allgemeine Grundlagen und spezielle Anwendungen
Gespeichert in:
| Hauptverfasser: | , |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
Springer Spektrum
[2021]
|
| Ausgabe: | 8. Auflage |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis Klappentext |
| Beschreibung: | Aus dem Vorwort: Die vorliegende ... 8. Auflage ... wurde wieder gründlich überarbeitet und auf den letzten Stand von Wissenschaft und Technik gebracht |
| Beschreibung: | XVI, 433 Seiten Illustrationen, Diagramme |
| ISBN: | 9783662626054 |
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| 856 | 4 | 2 | |m Digitalisierung UB Augsburg - ADAM Catalogue Enrichment |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=032505572&sequence=000003&line_number=0002&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Klappentext |
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis I Allgemeine Grundlagen der Zell-und Gewebekultur 1 1.1 1.2 1.3 Das Zellkulturlabor: Räumliche und apparative Voraussetzungen..................... Der Reinigungsbereich.................................................................................................. Der Vorbereitungs-und Verarbeitungsbereich.............................................................. Der Sterilbereich............................................................................................................ Weiterführende Literatur.............................................................................................. 3 5 5 5 14 2 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 Steriltechnik-Kontaminationen.............................................................................. Der Sterilbereich............................................................................................................ Laborreinigung.............................................................................................................. Hygiene......................................................................................................................... „Aseptische Arbeitstechnik.......................................................................................... Sterilisationsverfahren.................................................................................................. Antibiotika (Verwendung von Antibiotika in der Zellkuitur)........................................
Mycoplasmen................................................................................................................ Kreuzkontaminationen................................................................................................. Weiterführende Literatur.............................................................................................. 15 16 18 18 18 21 29 32 43 49 3 3.1 3.2 3.3 Sicherheit in der Zellkultur....................................................................................... Sicherheitsvorschriften................................................................................................. Gesetzliche Regelwerke................................................................................................ Entsorgung................................................................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 53 54 55 58 60 II Die Zelle und ihre Umgebung 4 Zellbiologische Grundlagen der Zell-und Gewebekultur..................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 63 65 5 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 Kulturgefäße und ihre Behandlung......................................................................... Züchtung von Zellen auf Glas....................................................................................... Züchtung von Zellen auf
Plastikmaterial....................................................................... Züchtung von Zellen auf anderen Materialien.............................................................. Spezielle Kulturgefäße.................................................................................................. Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren............................................................ Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Polylysin oder mit Komponenten der extrazeliulären Matrix zur Modifizierung der Oberflächeneigenschaften.................... Weiterführende Literatur............................................................................................... 67 68 69 71 71 76 79 85 6 6.1 6.2 6.3 Zellkulturmedien........................................................................................................ 87 Zusammensetzung der Medien.................................................................................... 92 Kurze Beschreibung der gebräuchlichsten Kulturmedien............................................. 104 Herstellung gebrauchsfertiger Medien.......................................................................... 107 Weiterführende Literatur............................................................................................... 113 7 7.1 7.2 7.3 7.4 Serumfreie Zellkultur................................................................................................ Grundmedien................................................................................................................. Zusätze zu serumfreien
Medien.................................................................................... Modularer Aufbau serumfreier Medien........................................................................ Übergang von serumhaltigen zu serumfreien Medien.................................................. 115 118 118 119 120
X Inhaltsverzeichnis 7.5 Serumfreie und proteinfreie Kulturmedien.................................................................. 123 Weiterführende Literatur............................................................................................. 123 8 8.1 8.2 8.3 8.4 Physiologische Zellkulturparameter....................................................................... Osmolarität.................................................................................................................. Temperatur.................................................................................................................. Oxygenierung.............................................................................................................. pH-Wert und Pufferung................................................................................................ Weiterführende Literatur............................................................................................. 125 126 126 126 122 129 9 9.1 9.2 9.3 9.4 Reinstwasser für Zell-und Gewebekulturen.......................................................... Verfahren der Aufbereitung, Vorbehandlung.............................................................. Reinstwasseraufbereitungssysteme............................................................................. Lagerung von Reinstwasser......................................................................................... Wasser für Reinigungszwecke...................................................................................... Weiterführende
Literatur............................................................................................. 131 132 133 134 134 135 III Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen 10 10.1 10.2 Mediumwechsel und Fütterungszyklen................................................................. Mediumwechsel bei Monolayerkulturen...................................................................... Mediumwechsel bei Suspensionskulturen................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 139 140 142 143 11 11.1 11.2 Subkultivierung/Passagieren................................................................................... Subkultivierung von Monolayerkulturen...................................................................... Subkultivierung von Suspensionskulturen................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 145 146 153 154 12 12.1 12.2 12.3 12.4 Bestimmung allgemeiner Wachstumsparameter................................................... Mikroskopische Betrachtung der Kulturen.................................................................... Bestimmung der Zellzahl (und Zellmasse)................................................................... Bestimmung allgemeiner Stoffwechselparameter.......................................................
Vitalitätstests................................................................................................................ Weiterführende Literatur.............................................................................................. 155 156 156 165 165 172 13 13.1 13.2 13.3 13.4 Einfrieren, Lagerung und Versand von Zellen....................................................... Einfrieren von Zellen.................................................................................................... Lagerung der Zellen..................................................................................................... Auftauen von Zellen..................................................................................................... Versand von Zellen....................................................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 173 174 177 178 179 181 14 14.1 14.2 Qualitätskontrolle und Cell Banking........................................................................ Qualitätskontrolle........................................................................................................ Cell Banking.................................................................................................................. Weiterführende Literatur.............................................................................................. 183 184 185 185 15 Standardisierung in der Zellkultur (Good Cell Culture
Practice)........................... 187 Weiterführende Literatur.............................................................................................. 189
XI Inhaltsverzeichnis IV Spezielle Methoden und Anwendungen 16 16.1 16.2 16.3 16.4 Allgemeine Aspekte der Primärkultur..................................................................... Anlegen einer Primärkultur.......................................................................................... Etablierung einer Zelllinie, Zellalterung und Seneszenz................................................ Apoptose in der Zellkultur........................................................................................... Transformation und Immortalisierung......................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 193 194 197 201 202 206 17 17.1 17.2 17.3 17.4 Spezielle Primärkulturen.......................................................................................... Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens..................................................... Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen............................... Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs............. Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut mittels Dichtegradientenzentrifugation.................................................................................. Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn)......................................................... Primärkulturen von Hepatocyten ................................................................................. Isolierung und
Primärkultur von Endothelzellen.......................................................... Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren............................................. Gewinnung von Keratinocyten..................................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 209 210 211 212 17.5 17.6 17.7 17.8 17.9 18 18.1 18.2 18.3 18.4 212 214 216 219 222 224 226 Kultivierung spezieller Zelllinien.............................................................................. Mammaliazelllinien....................................................................................................... Kaltblütige Vertebraten................................................................................................ Invertebraten................................................................................................................. Insektenzellen für die biotechnologische Produktion rekombinanter Proteine (Sf9-Zellen aus Spodoptera frugiperda).......................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 229 232 244 245 19 19.1 19.2 19.3 19.4 19.5 19.6 19.7 19.8 Spezielle zellbiologische Methoden in der Zellkultur........................................... Transfektion..................................................................................................................
Klonieren...................................................................................................................... Zellfusion, Hybridomatechnik....................................................................................... Zellsynchronisation ...................................................................................................... Cytometrie/Cell Sorting................................................................................................ Versuche zur /n-v/fro-Toxizität....................................................................................... Migrationsassays.......................................................................................................... Chromosomenpräparation........................................................................................... Weiterführende Literatur.............................................................................................. 251 253 259 262 269 274 280 294 299 300 20 Organkulturen, 3D-Kulturen, Organoide und mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips)........................................................................................ Organkulturen............................................................................................................... Dreidimensionale (3D-)Kulturen, Organoide und 3D-Biodruck.................................... Mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips).......................................................... Weiterführende
Literatur.............................................................................................. 303 304 311 321 324 Stammzellen............................................................................................................... Embryonale Stammzellen............................................................................................. Induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC)................................................................ Adulte Stammzellen...................................................................................................... Embryonaler-Stammzell-Test (EST) (Spezies: Maus)...................................................... Weiterführende Literatur............................................................................................... 327 328 329 330 336 346 20.1 20.2 20.3 21 21.1 21.2 21.3 21.4 246 249
XII Inhaltsverzeichnis 22 Zellkultur im großen Maßstab, Automatisierung...................................................... 349 22.1 22.2 22.3 Monolayerkulturen für große Zellmengen....................................................................... Suspensionskultur für große Zellmengen......................................................................... Automatisierung in der Zellkultur..................................................................................... Weiterführende Literatur.................................................................................................... V 23 23.1 23.2 23.3 23.4 23.5 23.6 23.7 350 355 358 360 Pflanzenzellkultur Pflanzenzell- und Gewebekultur.................................................................................. Herstellung von Kulturmedien.......................................................................................... Kalluskulturen..................................................................................................................... Suspensionskulturen.......................................................................................................... Isolierung von Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen.................................................... Antherenkultur................................................................................................................... Embryonenkultur................................................................................................................. Einfrieren und Lagerung von
Pflanzenzellkulturen......................................................... Weiterführende Literatur.................................................................................................... 365 366 370 373 374 378 380 380 382 Serviceteil A Glossar (Kleines Zell-und Gewebekulturlexikon)......................................................... 386 В Anhang............................................................................................................................. 406 C Lieferfirmen und Hersteller.............................................................................................. 419 Stichwortverzeichnis.......................................................................................................... 427
Zell- und Gewebekultur Dieses Lehr- und Methodenbuch soll Studierenden der Biologie, Medizin, Pharmazie oder Biotechnologie wie auch Wissenschaftler*innen und technischen Assistentinnen einen um fassenden Einblick in die Zell- und Gewebekultur vermitteln. Praktische Tipps und Tricks in einer labor- und leserfreundlichen Aufmachung dienen dazu, die tägliche Routine im Zellkulturlabor zu erleichtern. Es sind vor allem die leicht nachvollziehbaren „Man-nehme“-Vorschriften, die den praktischen Wert des Buches ausmachen und zu weiterführenden experimentellen Ansätzen anregen. Exemplarisch werden die wichtigsten Grundoperationen in der Zellkultur behandelt, sodass sich auch Anfänger bei der Kultivierung tierischer und pflanzlicher Zellen gut mithilfe des Buches einarbeiten und informieren können. Der Info-Anhang enthält stöchiometrische Rechenbeispiele, ein umfangreiches Glossar, weiterführende Literaturhinweise und Adressen von Lieferfirmen mit Internetadressen. Die 8. Auflage wurde wieder gründlich überarbeitet und auf den letzten Stand von Wissen und Technik gebracht. Die theoretischen Grundlagen wurden verstärkt herausgearbeitet und relevante Gesetzesvorschriften aktualisiert. Beibehalten wurde auch die Grundstruktur dieses Labor„Klassikers“, mit folgenden wichtigen Themen: • • • • • Allgemeine Grundlagen der Zell- und Gewebekultur Die Zelle und ihre Umgebung Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen Spezielle Methoden und Anwendungen Pflanzenzellkultur Die neuesten Entwicklungen in der Zell- und Gewebekultur, die dreidimensionale Zellkultur, die
Kultivierung von Organoiden und Miniorganen wie auch mikrophysiologische Systeme „on Chips“ werden in einem neu gestalteten Kapitel ausführlich beschrieben. Ebenfalls neu gestaltet und aktualisiert wurde der Abschnitt zur Kultivierung von Stammzellen. Der Abschnitt über die in vftro-toxikologischen Ansätze wurde ergänzt und aktualisiert. Bereits in der 7. Auflage wurde auf die Einhaltung höchster Qualitätsstandards in der Zell- und Gewebekultur besonders hingewiesen. Leider finden sich bis heute immernoch die altbekannten „offenen Baustellen“: zum einen die immer noch fehlende Authentifizierung humaner Zelllinien, verbunden mit einem Qualitätsmanagement, um Kontaminationen mit Mycoplasmen und Kreuzkontami nationen zu vermeiden bzw. rechtzeitig zu entdecken, zum anderen die weitere Verwendung von fetalem Kälberserum endlich zu reduzieren oder gänzlich zu vermeiden. Hierzu finden sich ausführliche praktische Anleitungen. Die Autoren Univ.-Prof. Dr. Gerhard Gstraunthaler war jahrelang als Titularprofessor am Institut für Physiolo gie der Medizinischen Universität Innsbruck tätig. Seine Spezialgebiete sind: Zellphysiologie, epitheliale Zell- und Gewebekultur, Nierenbiochemie, Alternativen zum fetalen Kälberserum, serumfreie Zellkultur, induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC), Ersatzmethoden zu Tier versuchen. Prof. Dr.Toni Lindi lehrte an der Fachhochschule Weihenstephan und gründete bereits 1981 das private Institut für angewandte Zellkultur (I-A-Z, Dr. T. Lindi, GmbH) in München. Zu seinen Spezialgebieten gehört: Pflanzenzellkulturen, tierische und humane Zellkulturen,
Zellphysio logie und Zelltoxikologie, Alternativmethodenentwicklung zum Tierversuch, Alternativen zum fetalen Kälberserum, serumfreie Medien, humane Thrombocytenlysate.
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Inhaltsverzeichnis I Allgemeine Grundlagen der Zell-und Gewebekultur 1 1.1 1.2 1.3 Das Zellkulturlabor: Räumliche und apparative Voraussetzungen. Der Reinigungsbereich. Der Vorbereitungs-und Verarbeitungsbereich. Der Sterilbereich. Weiterführende Literatur. 3 5 5 5 14 2 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 Steriltechnik-Kontaminationen. Der Sterilbereich. Laborreinigung. Hygiene. „Aseptische" Arbeitstechnik. Sterilisationsverfahren. Antibiotika (Verwendung von Antibiotika in der Zellkuitur).
Mycoplasmen. Kreuzkontaminationen. Weiterführende Literatur. 15 16 18 18 18 21 29 32 43 49 3 3.1 3.2 3.3 Sicherheit in der Zellkultur. Sicherheitsvorschriften. Gesetzliche Regelwerke. Entsorgung. Weiterführende Literatur. 53 54 55 58 60 II Die Zelle und ihre Umgebung 4 Zellbiologische Grundlagen der Zell-und Gewebekultur. Weiterführende Literatur. 63 65 5 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 Kulturgefäße und ihre Behandlung. Züchtung von Zellen auf Glas. Züchtung von Zellen auf
Plastikmaterial. Züchtung von Zellen auf anderen Materialien. Spezielle Kulturgefäße. Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren. Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Polylysin oder mit Komponenten der extrazeliulären Matrix zur Modifizierung der Oberflächeneigenschaften. Weiterführende Literatur. 67 68 69 71 71 76 79 85 6 6.1 6.2 6.3 Zellkulturmedien. 87 Zusammensetzung der Medien. 92 Kurze Beschreibung der gebräuchlichsten Kulturmedien. 104 Herstellung gebrauchsfertiger Medien. 107 Weiterführende Literatur. 113 7 7.1 7.2 7.3 7.4 Serumfreie Zellkultur. Grundmedien. Zusätze zu serumfreien
Medien. Modularer Aufbau serumfreier Medien. Übergang von serumhaltigen zu serumfreien Medien. 115 118 118 119 120
X Inhaltsverzeichnis 7.5 Serumfreie und proteinfreie Kulturmedien. 123 Weiterführende Literatur. 123 8 8.1 8.2 8.3 8.4 Physiologische Zellkulturparameter. Osmolarität. Temperatur. Oxygenierung. pH-Wert und Pufferung. Weiterführende Literatur. 125 126 126 126 122 129 9 9.1 9.2 9.3 9.4 Reinstwasser für Zell-und Gewebekulturen. Verfahren der Aufbereitung, Vorbehandlung. Reinstwasseraufbereitungssysteme. Lagerung von Reinstwasser. Wasser für Reinigungszwecke. Weiterführende
Literatur. 131 132 133 134 134 135 III Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen 10 10.1 10.2 Mediumwechsel und Fütterungszyklen. Mediumwechsel bei Monolayerkulturen. Mediumwechsel bei Suspensionskulturen. Weiterführende Literatur. 139 140 142 143 11 11.1 11.2 Subkultivierung/Passagieren. Subkultivierung von Monolayerkulturen. Subkultivierung von Suspensionskulturen. Weiterführende Literatur. 145 146 153 154 12 12.1 12.2 12.3 12.4 Bestimmung allgemeiner Wachstumsparameter. Mikroskopische Betrachtung der Kulturen. Bestimmung der Zellzahl (und Zellmasse). Bestimmung allgemeiner Stoffwechselparameter.
Vitalitätstests. Weiterführende Literatur. 155 156 156 165 165 172 13 13.1 13.2 13.3 13.4 Einfrieren, Lagerung und Versand von Zellen. Einfrieren von Zellen. Lagerung der Zellen. Auftauen von Zellen. Versand von Zellen. Weiterführende Literatur. 173 174 177 178 179 181 14 14.1 14.2 Qualitätskontrolle und Cell Banking. Qualitätskontrolle. Cell Banking. Weiterführende Literatur. 183 184 185 185 15 Standardisierung in der Zellkultur (Good Cell Culture
Practice). 187 Weiterführende Literatur. 189
XI Inhaltsverzeichnis IV Spezielle Methoden und Anwendungen 16 16.1 16.2 16.3 16.4 Allgemeine Aspekte der Primärkultur. Anlegen einer Primärkultur. Etablierung einer Zelllinie, Zellalterung und Seneszenz. Apoptose in der Zellkultur. Transformation und Immortalisierung. Weiterführende Literatur. 193 194 197 201 202 206 17 17.1 17.2 17.3 17.4 Spezielle Primärkulturen. Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens. Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen. Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs. Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut mittels Dichtegradientenzentrifugation. Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn). Primärkulturen von Hepatocyten . Isolierung und
Primärkultur von Endothelzellen. Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren. Gewinnung von Keratinocyten. Weiterführende Literatur. 209 210 211 212 17.5 17.6 17.7 17.8 17.9 18 18.1 18.2 18.3 18.4 212 214 216 219 222 224 226 Kultivierung spezieller Zelllinien. Mammaliazelllinien. Kaltblütige Vertebraten. Invertebraten. Insektenzellen für die biotechnologische Produktion rekombinanter Proteine (Sf9-Zellen aus Spodoptera frugiperda). Weiterführende Literatur. 229 232 244 245 19 19.1 19.2 19.3 19.4 19.5 19.6 19.7 19.8 Spezielle zellbiologische Methoden in der Zellkultur. Transfektion.
Klonieren. Zellfusion, Hybridomatechnik. Zellsynchronisation . Cytometrie/Cell Sorting. Versuche zur /n-v/fro-Toxizität. Migrationsassays. Chromosomenpräparation. Weiterführende Literatur. 251 253 259 262 269 274 280 294 299 300 20 Organkulturen, 3D-Kulturen, Organoide und mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips). Organkulturen. Dreidimensionale (3D-)Kulturen, Organoide und 3D-Biodruck. Mikrophysiologische Systeme (Organ-on-Chips). Weiterführende
Literatur. 303 304 311 321 324 Stammzellen. Embryonale Stammzellen. Induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC). Adulte Stammzellen. Embryonaler-Stammzell-Test (EST) (Spezies: Maus). Weiterführende Literatur. 327 328 329 330 336 346 20.1 20.2 20.3 21 21.1 21.2 21.3 21.4 246 249
XII Inhaltsverzeichnis 22 Zellkultur im großen Maßstab, Automatisierung. 349 22.1 22.2 22.3 Monolayerkulturen für große Zellmengen. Suspensionskultur für große Zellmengen. Automatisierung in der Zellkultur. Weiterführende Literatur. V 23 23.1 23.2 23.3 23.4 23.5 23.6 23.7 350 355 358 360 Pflanzenzellkultur Pflanzenzell- und Gewebekultur. Herstellung von Kulturmedien. Kalluskulturen. Suspensionskulturen. Isolierung von Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen. Antherenkultur. Embryonenkultur. Einfrieren und Lagerung von
Pflanzenzellkulturen. Weiterführende Literatur. 365 366 370 373 374 378 380 380 382 Serviceteil A Glossar (Kleines Zell-und Gewebekulturlexikon). 386 В Anhang. 406 C Lieferfirmen und Hersteller. 419 Stichwortverzeichnis. 427
Zell- und Gewebekultur Dieses Lehr- und Methodenbuch soll Studierenden der Biologie, Medizin, Pharmazie oder Biotechnologie wie auch Wissenschaftler*innen und technischen Assistentinnen einen um fassenden Einblick in die Zell- und Gewebekultur vermitteln. Praktische Tipps und Tricks in einer labor- und leserfreundlichen Aufmachung dienen dazu, die tägliche Routine im Zellkulturlabor zu erleichtern. Es sind vor allem die leicht nachvollziehbaren „Man-nehme“-Vorschriften, die den praktischen Wert des Buches ausmachen und zu weiterführenden experimentellen Ansätzen anregen. Exemplarisch werden die wichtigsten Grundoperationen in der Zellkultur behandelt, sodass sich auch Anfänger bei der Kultivierung tierischer und pflanzlicher Zellen gut mithilfe des Buches einarbeiten und informieren können. Der Info-Anhang enthält stöchiometrische Rechenbeispiele, ein umfangreiches Glossar, weiterführende Literaturhinweise und Adressen von Lieferfirmen mit Internetadressen. Die 8. Auflage wurde wieder gründlich überarbeitet und auf den letzten Stand von Wissen und Technik gebracht. Die theoretischen Grundlagen wurden verstärkt herausgearbeitet und relevante Gesetzesvorschriften aktualisiert. Beibehalten wurde auch die Grundstruktur dieses Labor„Klassikers“, mit folgenden wichtigen Themen: • • • • • Allgemeine Grundlagen der Zell- und Gewebekultur Die Zelle und ihre Umgebung Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen Spezielle Methoden und Anwendungen Pflanzenzellkultur Die neuesten Entwicklungen in der Zell- und Gewebekultur, die dreidimensionale Zellkultur, die
Kultivierung von Organoiden und Miniorganen wie auch mikrophysiologische Systeme „on Chips“ werden in einem neu gestalteten Kapitel ausführlich beschrieben. Ebenfalls neu gestaltet und aktualisiert wurde der Abschnitt zur Kultivierung von Stammzellen. Der Abschnitt über die in vftro-toxikologischen Ansätze wurde ergänzt und aktualisiert. Bereits in der 7. Auflage wurde auf die Einhaltung höchster Qualitätsstandards in der Zell- und Gewebekultur besonders hingewiesen. Leider finden sich bis heute immernoch die altbekannten „offenen Baustellen“: zum einen die immer noch fehlende Authentifizierung humaner Zelllinien, verbunden mit einem Qualitätsmanagement, um Kontaminationen mit Mycoplasmen und Kreuzkontami nationen zu vermeiden bzw. rechtzeitig zu entdecken, zum anderen die weitere Verwendung von fetalem Kälberserum endlich zu reduzieren oder gänzlich zu vermeiden. Hierzu finden sich ausführliche praktische Anleitungen. Die Autoren Univ.-Prof. Dr. Gerhard Gstraunthaler war jahrelang als Titularprofessor am Institut für Physiolo gie der Medizinischen Universität Innsbruck tätig. Seine Spezialgebiete sind: Zellphysiologie, epitheliale Zell- und Gewebekultur, Nierenbiochemie, Alternativen zum fetalen Kälberserum, serumfreie Zellkultur, induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC), Ersatzmethoden zu Tier versuchen. Prof. Dr.Toni Lindi lehrte an der Fachhochschule Weihenstephan und gründete bereits 1981 das private Institut für angewandte Zellkultur (I-A-Z, Dr. T. Lindi, GmbH) in München. Zu seinen Spezialgebieten gehört: Pflanzenzellkulturen, tierische und humane Zellkulturen,
Zellphysio logie und Zelltoxikologie, Alternativmethodenentwicklung zum Tierversuch, Alternativen zum fetalen Kälberserum, serumfreie Medien, humane Thrombocytenlysate. |
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