Identifikation und Charakterisierung renaler Keratine in Nierenerkrankungen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Aachen
2020
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ERKLAERUNG
ZUR
VORVEROEFFENTLICHUNG
...........................................................................
II
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
...........................................................................................
V
1
EINLEITUNG
............................................................................................................
1
1.1
DIE
NIEREN
....................................................................................................
1
1.2
AKUTE
UND
CHRONISCHE
NIERENINSUFFIZIENZ
..................................................
2
1.3
NIERENFIBROSE
..............................................................................................
3
1.4
KERATINE
.......................................................................................................
5
1.5
AKTUELLER
FORSCHUNGSSTAND
.........................................................................
8
2
ZIELSETZUNG
.......................................................................................................
10
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.....................................................................................
11
3.1
VERBRAUCHSMATERIALIEN
..............................................................................
11
3.2
CHEMIKALIEN
UND
KITS
................................................................................
12
3.3
GERAETE
........................................................................................................
14
3.4
SOFTWARE
.....................................................................................................
15
3.5
PRIMER
........................................................................................................
16
3.6
ANTIKOERPER
..................................................................................................
16
3.7
MAUSEXPERIMENTE
.....................................................................................
18
3.7.1
UNILATERALE
URETER
OBSTRUKTION
.............................................................
19
3.7.2
ISCHAEMIE-REPERFUSIONS-SCHADEN
.........................................................
19
3.7.3
ADENIN-NEPHROPATHIE
............................................................................
19
3.7.4
FOLSAEURE
NEPHROPATHIE
.........................................................................20
3.7.5
ALPORT
MODEL
..........................................................................................
20
3.8
HUMANE
GEWEBEPROBEN
..........................................................................20
3.8
IMMUNHISTOCHEMIE
...................................................................................20
3.9
IMMUNFLUORESZENZ
...................................................................................
22
3.10
RNA-ISOLATION
AUS
GEWEBE
.................................................................22
3.11
GENERIERUNG
VON
CDNA
........................................................................23
3.12
QUANTITATIVE
RT-PCR
............................................................................24
3.13
ANFERTIGUNG
VON
PROTEINLYSATEN
AUS
FRISCHGEWEBE
..............................25
3.14
KOLORIMETRISCHER
BICHINONSAEURE-ASSAY
(BCA)
....................................
26
3.15
SDS-PAGE
............................................................................................
26
3.16
WESTERN
BLOT
..........................................................................................27
3.17
ARRAY-ANALYSEN
......................................................................................28
3.18
ERSTELLEN
DER
ABBILDUNGEN
....................................................................
31
3.19
STATISTIK
...................................................................................................
31
4
ERGEBNISSE
.......................................................................................................
32
4.1
QUALITATIVE
ANALYSE
DER
RENALEN
SCHAEDIGUNG
IN
DEN
VERWENDETEN
MAUSMODELLEN
.....................................................................................................
32
4.2
BESTAETIGUNG
DER
REGULATION
DER
HAUPTKERATINE
IN
DER
NIERE
.................
32
4.2.1
HAUPTKERATINE
IM
ISCHAEMIE-REPERFUSIONS-SCHADEN
............................33
4.2.2
HAUPTKERATINE
IM
ADENIN-NEPHROPATHIE-MODELL
...................................34
4.2.3
HAUPTKERATINE
IM
FOLSAEURE-NEPHROPATHIE-MODELL
...............................35
4.2.3
HAUPTKERATINE
IM
ALPORT-MODELL
............................................................35
4.3
ANALYSE
OEFFENTLICH
ZUGAENGLICHER
MICROARRAYS
..........................................36
4.4
VALIDATION
DER
EXPRESSION
VON
K10,
K14
UND
K17
IM
UUO
MODEL
......38
4.5
EXPRESSION
VON
K17
IM
I/R-MODELL,
SOWIE
IN
DER
ADENIN-NEPHROPATHIE
39
4.6
UNTERSUCHUNG
DER
GEWEBEVERTEILUNG
VON
KL
7
IN
DER
NIERE
MITTELS
IMMUNHISTOCHEMIE
.............................................................................................
41
4.7
BESTIMMUNG
DES
TUBULUSABSCHNITTES,
IN
DEM
KL
7
EXPRIMIERT
WIRD
.....42
4.8
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IN
VERSCHIEDENEN
MAUSMODELLEN
....................................................................................................
46
4.8.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
UUO-MODELL
............
46
4.6.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
I/R-MODELL
................
48
4.8.3
QUANTIFIZIERUNG
DER
KL
7-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
ADENIN-MODELL
........
50
4.9
KL
7
KOFAERBUNG
MIT
NGAL
.......................................................................52
4.10
DETEKTION
VON
KL
7
IN
MURINEM
URIN
......................................................52
5
DISKUSSION
........................................................................................................54
6
ZUSAMMENFASSUNG
..........................................................................................
59
6.1
DEUTSCHE
ZUSAMMENFASSUNG
...................................................................59
6.2
ENGLISCHE
ZUSAMMENFASSUNG
..................................................................
60
7
LITERATUR
............................................................................................................
61
8
ANHANG
.............................................................................................................
67
8.1
DANKSAGUNG
.............................................................................................
67
8.2
VEROEFFENTLICHUNGEN
....................................................................................
68
8.3
ERKLAERUNG
ZUR
DATENAUFBEWAHRUNG
.........................................................70
8.4
ERKLAERUNG
UEBER
DEN
EIGENANTEIL
................................................................
71
8.5
LEBENSLAUF
.................................................................................................72
IV
|
| adam_txt |
INHALT
ERKLAERUNG
ZUR
VORVEROEFFENTLICHUNG
.
II
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
V
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
DIE
NIEREN
.
1
1.2
AKUTE
UND
CHRONISCHE
NIERENINSUFFIZIENZ
.
2
1.3
NIERENFIBROSE
.
3
1.4
KERATINE
.
5
1.5
AKTUELLER
FORSCHUNGSSTAND
.
8
2
ZIELSETZUNG
.
10
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
11
3.1
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
11
3.2
CHEMIKALIEN
UND
KITS
.
12
3.3
GERAETE
.
14
3.4
SOFTWARE
.
15
3.5
PRIMER
.
16
3.6
ANTIKOERPER
.
16
3.7
MAUSEXPERIMENTE
.
18
3.7.1
UNILATERALE
URETER
OBSTRUKTION
.
19
3.7.2
ISCHAEMIE-REPERFUSIONS-SCHADEN
.
19
3.7.3
ADENIN-NEPHROPATHIE
.
19
3.7.4
FOLSAEURE
NEPHROPATHIE
.20
3.7.5
ALPORT
MODEL
.
20
3.8
HUMANE
GEWEBEPROBEN
.20
3.8
IMMUNHISTOCHEMIE
.20
3.9
IMMUNFLUORESZENZ
.
22
3.10
RNA-ISOLATION
AUS
GEWEBE
.22
3.11
GENERIERUNG
VON
CDNA
.23
3.12
QUANTITATIVE
RT-PCR
.24
3.13
ANFERTIGUNG
VON
PROTEINLYSATEN
AUS
FRISCHGEWEBE
.25
3.14
KOLORIMETRISCHER
BICHINONSAEURE-ASSAY
(BCA)
.
26
3.15
SDS-PAGE
.
26
3.16
WESTERN
BLOT
.27
3.17
ARRAY-ANALYSEN
.28
3.18
ERSTELLEN
DER
ABBILDUNGEN
.
31
3.19
STATISTIK
.
31
4
ERGEBNISSE
.
32
4.1
QUALITATIVE
ANALYSE
DER
RENALEN
SCHAEDIGUNG
IN
DEN
VERWENDETEN
MAUSMODELLEN
.
32
4.2
BESTAETIGUNG
DER
REGULATION
DER
HAUPTKERATINE
IN
DER
NIERE
.
32
4.2.1
HAUPTKERATINE
IM
ISCHAEMIE-REPERFUSIONS-SCHADEN
.33
4.2.2
HAUPTKERATINE
IM
ADENIN-NEPHROPATHIE-MODELL
.34
4.2.3
HAUPTKERATINE
IM
FOLSAEURE-NEPHROPATHIE-MODELL
.35
4.2.3
HAUPTKERATINE
IM
ALPORT-MODELL
.35
4.3
ANALYSE
OEFFENTLICH
ZUGAENGLICHER
MICROARRAYS
.36
4.4
VALIDATION
DER
EXPRESSION
VON
K10,
K14
UND
K17
IM
UUO
MODEL
.38
4.5
EXPRESSION
VON
K17
IM
I/R-MODELL,
SOWIE
IN
DER
ADENIN-NEPHROPATHIE
39
4.6
UNTERSUCHUNG
DER
GEWEBEVERTEILUNG
VON
KL
7
IN
DER
NIERE
MITTELS
IMMUNHISTOCHEMIE
.
41
4.7
BESTIMMUNG
DES
TUBULUSABSCHNITTES,
IN
DEM
KL
7
EXPRIMIERT
WIRD
.42
4.8
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IN
VERSCHIEDENEN
MAUSMODELLEN
.
46
4.8.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
UUO-MODELL
.
46
4.6.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
K17-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
I/R-MODELL
.
48
4.8.3
QUANTIFIZIERUNG
DER
KL
7-LMMUNHISTOCHEMIE
IM
ADENIN-MODELL
.
50
4.9
KL
7
KOFAERBUNG
MIT
NGAL
.52
4.10
DETEKTION
VON
KL
7
IN
MURINEM
URIN
.52
5
DISKUSSION
.54
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
59
6.1
DEUTSCHE
ZUSAMMENFASSUNG
.59
6.2
ENGLISCHE
ZUSAMMENFASSUNG
.
60
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LITERATUR
.
61
8
ANHANG
.
67
8.1
DANKSAGUNG
.
67
8.2
VEROEFFENTLICHUNGEN
.
68
8.3
ERKLAERUNG
ZUR
DATENAUFBEWAHRUNG
.70
8.4
ERKLAERUNG
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EIGENANTEIL
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8.5
LEBENSLAUF
.72
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