Verfügbarkeit: Dysregulation der T- und B-Zellhomöostase bei Patienten nach Nierentransplantation unter Immunsuppression mit Calcineurin-Inhibitoren vs. mTOR-Inhibitoren

Dysregulation der T- und B-Zellhomöostase bei Patienten nach Nierentransplantation unter Immunsuppression mit Calcineurin-Inhibitoren vs. mTOR-Inhibitoren:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Brunk, Susanne Valentina (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Freiburg im Breisgau [2019]
Schlagworte:	Zelle Inhibitor Immunsuppression Ciclosporin Patient Hochschulschrift
Online-Zugang:	Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis
Beschreibung:	131 Blätter Diagramme 30 cm

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 4 INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG....................................................................................... 8 1.1 AUFBAU DES IMMUNSYSTEMS............................................................. 8 1.2 B-ZELLENTWICKLUNG........................................................................ 11 1.2.1 HUMORALE IMMUNITAET.................................................................... 13 1.2.2 CHARAKTERISIERUNG DER B-ZELLPOPULATIONEN IM PERIPHEREN BLUT..... 14 1.2.2.1 TRANSITIONALE B-ZELLEN.................................................................. 15 1.2.2.2 NAIVE B-ZELLEN............................................................................. 15 1.2.2.3 LGM POS B-GEDAECHTNISZELLEN............................................................ 16 1.2.2.4 KLASSENGEWECHSELTE GEDAECHTNIS B-ZELLEN................................... 16 1.2.2.5 PLASMABLASTEN / PLASMAZELLEN..................................................... 17 17 1.3 21 1.3.1 26 1.3.2 26 1.3.2.1 T-ZELLENTWICKLUNG... ZELLULAERE IMMUNITAET T-ZELLPOPULATIONEN IM PERIPHEREN BLUT NAIVE T-ZELLEN 1.3.2.2 EFFEKTOR T-ZELLEN ........................................................................... 27 1.3.2.3 GEDAECHTNIS T-ZELLEN .................................................................... 28 1.3.2.4 REGULATORISCHE T-ZELLEN ................................................................ 29 1.4 ALTERSABHAENGIGE SCHWANKUNGEN DER LYMPHOZYTENHOMOEOSTASE... 30 1.5 INTRAZELLULAERE SIGNALWEGE............................................................ 32 1.5.1 B-ZELLREZEPTOR............................................................................. 32 1.5.1.1 B-ZELL KOREZEPTOR.......................................................................... 33 1.5.2 CD40 ........................................................................................... 34 1.5.3 T-ZELLREZEPTOR .............................................................................. 35 1.5.3.1 T-ZELL KOREZEPTOREN...................................................................... 36 1.5.4 IL-2 REZEPTOR................................................................................ 37 1.5.5 MTOR SIGNALWEG........................................................................ 39 1.6 GRUNDLAGEN DER ORGANTRANSPLANTATION......................................... 39 1.6.1 ALLOGEN-ABHAENGIGE INKOMPATIBILITAET............................................... 40 1.6.2 ABSTOSSUNGSREAKTIONEN................................................................. 41 1.7 IMMUNSUPPRESSIVE THERAPIE ........................................................ 45 1.7.1 KORTIKOSTEROIDE............................................................................. 47 1.7.2 CALCINEURIN-INHIBITOREN................................................................. 48 1.7.3 MTOR-LNHIBITOREN ......................................................................... 50 1.7.4 GUANOSIDANALOGA (MYCOPHENOLAT MOFETIL - MMF)........................ 51 1.8 FRAGESTELLUNG UND ZIELSETZUNG ...................................................... 53 2 MATERIAL........................................................................................ 54 2.1 REAGENZIEN.................................................................................. 54 2.2 GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIAL ................................................... 54 2.3 ANWENDUNGSPAKETE / KITS ............................................................. 55 2.4 PUFFER UND NAEHRMEDIEN................................................................ 56 2.5 ANTIKOERPER ..................................................................................... 56 2.5.1 VERWENDETE ANTIKOERPER FUER DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN........................................................................... 56 2.5.2 VERWENDETE ANTIKOERPER FUER IN-VITRO STIMULATIONEN ......................... 57 3 METHODEN.................................................................................... 57 3.1 AUSWAHLKRITERIEN DER EINGESCHLOSSENEN PATIENTEN...................... 57 3.2 ISOLATION PERIPHERER BLUT-LEUKOZYTEN (PBL) MITTELS DICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION (FICOLL) ..................................... 58 3.3 OBERFLAECHENFAERBUNG FUER DUCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN........................................................................... 59 3.4 INTRAZELLULAERE FAERBUNG (INTRAPREP TM) FUER DURCHFLUSSZYTOMETRIE... 59 3.5 ZELLOBERFLAECHENFAERBUNG MIT ANNEXIN V FUER DURCHFLUSSZYTOMETRIE... 60 3.6 NEGATIV-ISOLATION CD19 P0S ISOLIERTER B-ZELLEN MITTELS MAGNETISCHER ZELLSEPARIERUNG (MACS) ........................................ 61 3.7 IN-VITRO STIMULATION CD 19 POS ISOLIERTER B-ZELLEN........................... 61 3.8 STATISTISCHE AUSWERTUNG ............................................................... 62 3.9 BENUTZTE PROGRAMME................................................................... 62 4 ERGEBNISSE.................................................................................. 63 4.1 ANALYSE DER LYMPHOZYTAEREN SUBPOPULATIONEN IM PERIPHEREN BLUT (PBL) MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE....................................... 63 4.1.1 LEUKOZYTEN, CD19 POS B-LYMPHOZYTEN UND CD3 POS T-LYMPHOZYTEN............................................................................ 63 4.2 CD19 POS B-ZELLHOMOEOSTASE UNTER VERSCHIEDENEN BEHANDLUNGSREGIMEN.................................................................. 66 4.2.1 CALCINEURININHIBITOREN CYCLOSPORIN A (CSA) UND TACROLIMUS (TACR) ........................................................................................... 66 4.2.2 MTOR-LNHIBITOR SIROLIMUS (SIR) .................................................... 70 4.2.3 INOSINMONOPHOSPHAT-DEHYDROGENASE-INHIBITOR (IMPDH) MYCOPHENOLAT MOFETIL (MMF) ........................................................ 71 4.2.4 VERGLEICH DER MONOTHERAPIEN UND KOMBINATIONSTHERAPIEN........... 72 4.3 VERAENDERUNG DER NAIVEN B-ZELLZAHL IN ABHAENGIGKEIT DER AKTUELLEN TAGESDOSIS UND SERUMSPIEGEL DES JEWEILIGEN IMMUNSUPPRESSIVUMS.................................................................. 74 4.3.1 KORRELATION FUER CALCINEURININHIBITOREN CYCLOSPORIN A (CSA) UND TACROLIMUS (TACR) ........................................................................ 74 4.3.2 KORRELATION FUER MTOR-LNHIBITOR SIROLIMUS (SIR) ............................. 76 4.3.3 KORRELATION FUER INOSINMONOPHOSPHAT-DEHYDROGENASE-INHIBITOR (IMPDH) MYCOPHENOLAT MOFETIL (MMF) ........................................ 77 4.4 STICHPROBENARTIGE WIEDERHOLUNGSMESSUNGEN ALS VERLAUFSBEOBACHTUNG.................................................................. 78 4.5 CD3 POS T-ZELLSUBPOPULATIONEN UNTER VERSCHIEDENEN BEHANDLUNGSREGIMEN.................................................................. 80 4.5.1 CALCINEURININHIBITOREN CYCLOSPORIN A (CSA) UND TACROLIMUS (TACR) ............................................................................................ 82 4.5.2 MTOR-LNHIBITOR SIROLIMUS (SIR) ..................................................... 85 4.5.3 INOSINMONOPHOSPHAT-DEHYDROGENASE-INHIBITOR (IMPDH) MYCOPHENOLAT MOFETIL (MMF) ........................................................ 86 4.5.4 VERGLEICH DER VERSCHIEDENEN IMMUNSUPPRESSIVEN REGIME ......... 88 4.6 IN VITRO VERSUCHE ZUR AUSWIRKUNG VON CYCLOSPORIN A AUF ISOLIERTE CD19 POS B-ZELLEN .......................................................................... 89 4.6.1 UNTERSUCHUNG DER PROLIFERATION.................................................... 89 4.6.2 UNTERSUCHUNG DER AKTIVIERUNG ..................................................... 91 4.6.3 UNTERSUCHUNG DER APOPTOSE ........................................................ 93 5 DISKUSSION................................................................................... 96 5.1 ANALYSE DER LEUKOZYTEN UND LYMPHOZYTEN DES PERIPHEREN BLUTES ........................................................................................... 97 5.2 IMMUNSUPPRESSIVE THERAPIE MIT CYCLOSPORIN A FUEHRT ZUR ERNIEDRIGUNG CD19 POS B-LYMPHOZYTEN......................................... 97 5.2.1 UEBERPROPORTIONALE ERNIEDRIGUNG NAIVER B-LYMPHOZYTEN UNTER CALCINEURININHIBITOR MONOTHERAPIE, NICHT ABER BEI KOMBINATIONSTHERAPIE MIT MYCOPHENOLAT MOFETIL .......................... 98 5.2.2 UNTERSUCHUNG VON PATIENTEN UNTER KOMBINATIONSTHERAPIE MIT SIROLIMUS UND MYCOPHENOLAT MOFETIL ZEIGEN UNVERAENDERTE ANTEILE NAIVER B-ZELLEN................................................................. 100 5.2.3 CALCINEURININHIBITOREN, MTOR-LNHIBITOREN UND MMF BEEINFLUSSEN DIE ANZAHL TRANSITIONALER B-ZELLEN........................... 101 5.2.4 PATIENTEN UNTER CALCINEURININHIBITOR MONOTHERAPIE UND SIROLIMUS KOMBINATIONSTHERAPIE ZEIGEN EINEN RELATIVEN SHIFT HIN ZU EINEM HOEHER DIFFERENZIERTEN B-ZELLPOOL .................... 102 5.3 ES BESTEHT KEINE KORRELATION ZWISCHEN DEN B ZELL- VERAENDERUNGEN UND DEM MEDIKAMENTENSPIEGEL UNTER IMMUNSUPPRESSIVER THERAPIE ...................................................... 103 5.4 ANALYSE DER CD3 POS T-LYMPHOZYTEN SOWIE DEREN SUBPOPULATIONEN.......................................................................... 103 5.4.1 TENDENZIELLE ERHOEHUNG DER CD3 P0S T-LYMPHOZYTEN UNTER CALCINEURININHIBITOR KOMBINATIONSTHERAPIE.................................. 104 5.4.2 CALCINEURININHIBITOR BASIERTE IMMUNSUPPRESSION BEEINFLUSST IN ERSTER LINIE CD8 POS T-LYMPHOZYTEN ......................................... 104 5.5 VERSUCHE ZUR AUSWIRKUNG VON CYCLOSPORIN A AUF DIE AKTIVIERUNG ISOLIERTER CD19 POS B-ZELLEN IN VITRO ............................ 106 5.5.1 CYCLOSPORIN A BEWIRKT EINE DOSISABHAENGIGE HEMMUNG DER PROLIFERATION BEI CD19 POS NAIVEN B-LYMPHOZYTEN IN VITRO ........... 106 5.5.2 DIE AKTIVIERBARKEIT CD19 POS NAIVER B-ZELLEN IST IN GEGENWART VON CYCLOSPORIN A DOSISABHAENGIG VERRINGERT ...................................... 108 5.5.3 HOHE KONZENTRATIONEN VON CYCLOSPORIN A INDUZIEREN APOPTOSE IN ISOLIERTEN CD19 POS B-ZELLEN UNABHAENGIG VON ANWESENHEIT EINES STIMULUS ............................................................................ 109 6 AUSBLICK .................................................................................... 111 7 ZUSAMMENFASSUNG.................................................................. 112 8 LITERATURVERZEICHNIS................................................................. 113 9 ANHANG ...................................................................................... 124 9.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS............................................................... 124 9.2 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adam_txt	INHALTSVERZEICHNIS 4 INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG. 8 1.1 AUFBAU DES IMMUNSYSTEMS. 8 1.2 B-ZELLENTWICKLUNG. 11 1.2.1 HUMORALE IMMUNITAET. 13 1.2.2 CHARAKTERISIERUNG DER B-ZELLPOPULATIONEN IM PERIPHEREN BLUT. 14 1.2.2.1 TRANSITIONALE B-ZELLEN. 15 1.2.2.2 NAIVE B-ZELLEN. 15 1.2.2.3 LGM POS B-GEDAECHTNISZELLEN. 16 1.2.2.4 KLASSENGEWECHSELTE GEDAECHTNIS B-ZELLEN. 16 1.2.2.5 PLASMABLASTEN / PLASMAZELLEN. 17 17 1.3 21 1.3.1 26 1.3.2 26 1.3.2.1 T-ZELLENTWICKLUNG. ZELLULAERE IMMUNITAET T-ZELLPOPULATIONEN IM PERIPHEREN BLUT NAIVE T-ZELLEN 1.3.2.2 EFFEKTOR T-ZELLEN . 27 1.3.2.3 GEDAECHTNIS T-ZELLEN . 28 1.3.2.4 REGULATORISCHE T-ZELLEN . 29 1.4 ALTERSABHAENGIGE SCHWANKUNGEN DER LYMPHOZYTENHOMOEOSTASE. 30 1.5 INTRAZELLULAERE SIGNALWEGE. 32 1.5.1 B-ZELLREZEPTOR. 32 1.5.1.1 B-ZELL KOREZEPTOR. 33 1.5.2 CD40 . 34 1.5.3 T-ZELLREZEPTOR . 35 1.5.3.1 T-ZELL KOREZEPTOREN. 36 1.5.4 IL-2 REZEPTOR. 37 1.5.5 MTOR SIGNALWEG. 39 1.6 GRUNDLAGEN DER ORGANTRANSPLANTATION. 39 1.6.1 ALLOGEN-ABHAENGIGE INKOMPATIBILITAET. 40 1.6.2 ABSTOSSUNGSREAKTIONEN. 41 1.7 IMMUNSUPPRESSIVE THERAPIE . 45 1.7.1 KORTIKOSTEROIDE. 47 1.7.2 CALCINEURIN-INHIBITOREN. 48 1.7.3 MTOR-LNHIBITOREN . 50 1.7.4 GUANOSIDANALOGA (MYCOPHENOLAT MOFETIL - MMF). 51 1.8 FRAGESTELLUNG UND ZIELSETZUNG . 53 2 MATERIAL. 54 2.1 REAGENZIEN. 54 2.2 GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIAL . 54 2.3 ANWENDUNGSPAKETE / KITS . 55 2.4 PUFFER UND NAEHRMEDIEN. 56 2.5 ANTIKOERPER . 56 2.5.1 VERWENDETE ANTIKOERPER FUER 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EINEN RELATIVEN SHIFT HIN ZU EINEM HOEHER DIFFERENZIERTEN B-ZELLPOOL . 102 5.3 ES BESTEHT KEINE KORRELATION ZWISCHEN DEN B ZELL- VERAENDERUNGEN UND DEM MEDIKAMENTENSPIEGEL UNTER IMMUNSUPPRESSIVER THERAPIE . 103 5.4 ANALYSE DER CD3 POS T-LYMPHOZYTEN SOWIE DEREN SUBPOPULATIONEN. 103 5.4.1 TENDENZIELLE ERHOEHUNG DER CD3 P0S T-LYMPHOZYTEN UNTER CALCINEURININHIBITOR KOMBINATIONSTHERAPIE. 104 5.4.2 CALCINEURININHIBITOR BASIERTE IMMUNSUPPRESSION BEEINFLUSST IN ERSTER LINIE CD8 POS T-LYMPHOZYTEN . 104 5.5 VERSUCHE ZUR AUSWIRKUNG VON CYCLOSPORIN A AUF DIE AKTIVIERUNG ISOLIERTER CD19 POS B-ZELLEN IN VITRO . 106 5.5.1 CYCLOSPORIN A BEWIRKT EINE DOSISABHAENGIGE HEMMUNG DER PROLIFERATION BEI CD19 POS NAIVEN B-LYMPHOZYTEN IN VITRO . 106 5.5.2 DIE AKTIVIERBARKEIT CD19 POS NAIVER B-ZELLEN IST IN GEGENWART VON CYCLOSPORIN A DOSISABHAENGIG VERRINGERT . 108 5.5.3 HOHE KONZENTRATIONEN VON CYCLOSPORIN A INDUZIEREN APOPTOSE IN ISOLIERTEN CD19 POS B-ZELLEN UNABHAENGIG VON ANWESENHEIT EINES STIMULUS . 109 6 AUSBLICK . 111 7 ZUSAMMENFASSUNG. 112 8 LITERATURVERZEICHNIS. 113 9 ANHANG . 124 9.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS. 124 9.2 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS. 126 9.3 EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG . 128 9.4 DANKSAGUNG. 129
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