Die Rab-abhängige Endozytose ist unerlässlich für die Integrität der Nephrozyten-Schlitzmembran bei Drosophila melanogaster:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Münster
2020
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DANKSAGUNG
................................................................................................................................
46
INHALTSVERZEICHNIS
...........................................................................................................................
I
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.................................................................................................................
III
TABELLENVERZEICHNIS
.....................................................................................................................
IV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
................................................................................................................
V
1
EINLEITUNG
.................................................................................................................
1
1.1
DIE
MENSCHLICHE
NIERE
....................................................................................................
1
1.1.1
FUNKTION
UND
AUFBAU
...........................................................................................
1
1.1.2
DIE
FILTERBARRIERE
..................................................................................................
4
1.2
ENDOZYTOSE
IN
PODOZYTEN
................................................................................................
6
1.3
AKTIVITAETSZYKLUS
VON
RAB-PROTEINEN
................................................................................
8
1.4
DROSOPH/7A-NEPHROZYTEN
................................................................................................
10
1.5
VORTEILE
VON
D.
MELANOGASTER
ALS
MODELLORGANISMUS
..................................................
12
1.6
ZIEL
DER
ARBEIT
.................................................................................................................
12
2
MATERIAL
...................................................................................................................
13
2.1
AUSSTATTUNG
....................................................................................................................
13
2.2
VERBRAUCHSMATERIAL
.......................................................................................................
14
2.3
SOFTWARE
..........................................................................................................................
14
2.4
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.....................................................................................................
14
2.5
FLIEGENFUTTER
...................................................................................................................
15
2.6
PRIMAERE
ANTIKOERPER
........................................................................................................
16
2.7
SEKUNDAERE
ANTIKOERPER
....................................................................................................
16
2.8
FLIEGENSTAEMME
...............................................................................................................
16
3
METHODEN
................................................................................................................
18
3.1
FLIEGENHALTUNG
................................................................................................................
18
3.2
GENETISCHE
WERKZEUGE
IN
D.
MELANOGASTER
................................................................
18
3.2.1
UAS-GAL4-SY
STERN
.............................................................................................
18
3.2.2
INTERFERENZ-RNA
.................................................................................................
18
3.2.3
BALANCER-CHROMOSOMEN
...................................................................................
19
3.3
FILTRATIONS-ASSAY
.............................................................................................................
19
3.4
QUANTIFIZIERUNG
DES
FILTRATIONS-ASSAYS
........................................................................
20
3.4.1
WGA-555-FAERBEPROTOKOLL
................................................................................
20
3.4.2
AUSWERTUNG
DES
FILTRATIONS-ASSAYS
UND
STATISTIK
...........................................
21
3.5
IMMUNHISTOCHEMISCHE
FAERBUNG
VON
DROSOPH/7A-NEPHROZYTEN
................................
22
3.6
LYSOTRACKER-FAERBEPROTOKOLL
...........................................................................................
22
3.7
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPIE
........................................................................
23
4
ERGEBNISSE
............................................................................................................
24
4.1
DIFFERENZIELLER
EINFLUSS
VON
ENDOZYTOSE-PROTEINEN
AUF
DIE
FILTERLEISTUNG
VON
DROSOPH//A-NEPHROZYTEN
.........................................................................................................
24
4.1.1
EINFLUSS
VON
RAB5,
RAB7,
RAB11
UND
SHIBIRE
AUF
DIE
ZELLMORPHOLOGIE
UND
FUNKTION
VON
NEPHROZYTEN
............................................................................................
26
4.1.2
QUANTIFIZIERUNG
DES
FILTRATIONS-ASSAYS
........................................................... 28
4.2
DIFFERENZIELLER
EINFLUSS
VON
ENDOZYTOSE-PROTEINEN
AUF
DIE
NEPHROZYTEN-
SCHLITZMEMBRAN
.......................................................................................................................
30
4.3
WEITERFUEHRENDE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SUBZELLULAEREN
LOKALISATION
VON
ANF-GFP-
GFP
IN
NEPHROZYTEN
................................................................................................................34
4.4
FEINSTRUKTURELLE
ANALYSE
VON
RA 7-KNOCKDOWN-LARVEN
........................................... 35
5
DISKUSSION
.............................................................................................................
37
5.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
HAUPTERGEBNISSE
..................................................................
37
5.2
DISKUSSION
DES
FILTRATIONS-ASSAYS
...............................................................................37
5.3
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
...........................................................................................38
5.3.1
EINFLUSS
VON
ENDOZYTOSE-PROTEINEN
AUF
DIE
FUNKTION
UND
ARCHITEKTUR
DER
NEPHROZYTEN-SCHLITZMEMBRAN
.......................................................................................39
5.3.2
KNOCKDOWN
VON
RAB7
BEEINFLUSST
DEN
ENDOSOMALEN
TRANSPORT
ZU
LYSOSOMEN
......................................................................................................................
42
5.4
BEDEUTUNG
DER
ERGEBNISSE
IN
UEBERTRAGUNG
AUF
PODOZYTEN
VON
SAEUGETIEREN
........
43
5.5
AUSBLICK
..........................................................................................................................
43
6
LITERATURVERZEICHNIS
............................................................................................
45
7
DANKSAGUNG
..........................................................................................................
49
8
LEBENSLAUF
.............................................................................................................
50
|
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.
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.
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.
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.
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
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EINLEITUNG
.
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1.1
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MENSCHLICHE
NIERE
.
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UND
AUFBAU
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FILTERBARRIERE
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PODOZYTEN
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.
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QUANTIFIZIERUNG
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FILTRATIONS-ASSAYS
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3.4.1
WGA-555-FAERBEPROTOKOLL
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3.4.2
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FILTRATIONS-ASSAYS
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STATISTIK
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FAERBUNG
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DROSOPH/7A-NEPHROZYTEN
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.
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ERGEBNISSE
.
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EINFLUSS
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ENDOZYTOSE-PROTEINEN
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DROSOPH//A-NEPHROZYTEN
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ZELLMORPHOLOGIE
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. 28
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EINFLUSS
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NEPHROZYTEN-
SCHLITZMEMBRAN
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ERGEBNISSE
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