Die Funktion ungewöhnlicher Flavin-abhängiger Schlüsselenzyme des anaeroben Phthalat- und Naphthalinabbaus:
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Freiburg
September 2019
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INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
...................................................................................................
I
2
ZUSAMMENFASSUNG
...............................................................................................
III
3
SUMMARY
................................................................................................................
VI
4
EINLEITUNG
.................................................................................................................
1
4.1
AROMATISCHE
VERBINDUNGEN
IN
DER
UMWELT
.......................................................
1
4.2
AEROBER
ABBAU
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
...................................................
3
4.3
ANAEROBER
ABBAU
MONOZYKLISCHER
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
.....................
4
4.3.1
ANAEROBER
ABBAU
VON
O-PHTHALATESTERN
................................................................
6
4.3.2
UBID-AEHNLICHE
(DE)CARBOXYLASEN
IM
ANAEROBEN
AROMATENABBAU
.......................
6
4.4
ANAEROBER
ABBAU
POLYZYKLISCHER
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
.......................
8
4.5
FUNKTION
DER
NAPHTHOYL-RING
REDUKTASEN
AUS
N47
UND
VERGLEICH
MIT
KLASSISCHEN
*OLD
YELLOW
ENZYMES
*
...........................................................................
10
4.6
ZIELSETZUNG
......................................................................................................
13
5
ERGEBNISSE
.............................................................................................................
14
5.1
REINIGUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
PHTHALOYL-COA
DECARBOXYLASE
AUS
THAUERA
CHLOROBENZOICA
3C8-1
...............................................................................
14
5.2
AUFKLAERUNG
DER
ENANTIOSELEKTIVITAET
UND
HINWEISE
FUER
DIE
REAKTIONSMECHANISMEN
VON
NCR
UND
DHNCR
.....................................................
32
5.3
MOLEKULARE
BASIS
FUER
DEN
ENZYMATISCHEN
HYDRIDTRANSFER
DER
NCR
AM
BIOLOGISCHEN
REDOXPOTENTIAL-LIMIT
............................................................................
53
6
DISKUSSION
............................................................................................................
78
6.1
DIE
ROLLE
DER
PHTHALOYL-COA
DECARBOXYLASE
UND
AEHNLICHEN
(DE)CARBOXYLASEN
DER
UBID-ENZYMFAMILIE
IM
ANAEROBEN
AROMATENABBAU
..........
78
6.
1.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
PHTHTALOYL-COA
DECARBOXYLASE
AUS
THAUERA
CHLOROBENZOICA
.....................................................................................................................
78
6.1.2
DECARBOXYLIERUNGSREAKTIONEN
DURCH
UBID-AEHNLICHE
ENZYME
NEBEN
UNGESAETTIGTEN
BINDUNGEN
....................................................................................................
80
6.2 NCR
UND
DHNCR
ALS
MODELLENZYME
DES
ANAEROBEN
PAK-ABBAUS
.............
82
6.2.1
KATALYSE
DER
2-NAPHTHOYL-COA
REDUKTASE:
HYDRIDTRANSFER
AM
NEGATIVEN
BIOLOGISCHEN
REDOXPOTENTIAL-LIMIT
.....................................................................................
82
6.2.2
5,6-DIHYDRONAPHTHOYL-COA
REDUKTASE:
EIN
*OYE
*-ENZYM
MIT
EINEM
EINZIGARTIGEN
REAKTIONSMECHANISMUS
................................................................................
86
6.2.3
BIOTECHNOLOGISCHES
POTENTIAL
VON
ENZYMEN
DES
ANAEROBEN
AROMATENABBAUS91
6.2.4
EINE
POTENTIELL
ELEKTRONEN-BIFURKIERENDE
NADPH:FLAVIN
OXIDOREDUKTASE
ALS
NATUERLICHER
ELEKTRONENDONOR
FUER
DIE
2-NAPHTHOYL-COA
REDUKTION
IN
N47
.........................
95
I
6.2.5
ENERGIEKONSERVIERUNG
WAEHREND
DES
ANAEROBEN
AROMATENABBAUS
IN
SULFATREDUZIERERN
..................................................................................................................
98
6.2.6
VERGLEICH
DER
DEAROMATISIERUNG
MONOZYKLISCHER
UND
POLYZYKLISCHER
AROMATEN
..
103
7
LITERATURVERZEICHNIS
...........................................................................................
106
8
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.....................................................................................
114
9
DANKSAGUNG
........................................................................................................
117
II
|
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1
INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
.
I
2
ZUSAMMENFASSUNG
.
III
3
SUMMARY
.
VI
4
EINLEITUNG
.
1
4.1
AROMATISCHE
VERBINDUNGEN
IN
DER
UMWELT
.
1
4.2
AEROBER
ABBAU
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
.
3
4.3
ANAEROBER
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MONOZYKLISCHER
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
.
4
4.3.1
ANAEROBER
ABBAU
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O-PHTHALATESTERN
.
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4.3.2
UBID-AEHNLICHE
(DE)CARBOXYLASEN
IM
ANAEROBEN
AROMATENABBAU
.
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POLYZYKLISCHER
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
.
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4.5
FUNKTION
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NAPHTHOYL-RING
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N47
UND
VERGLEICH
MIT
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*OLD
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*
.
10
4.6
ZIELSETZUNG
.
13
5
ERGEBNISSE
.
14
5.1
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UND
CHARAKTERISIERUNG
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PHTHALOYL-COA
DECARBOXYLASE
AUS
THAUERA
CHLOROBENZOICA
3C8-1
.
14
5.2
AUFKLAERUNG
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ENANTIOSELEKTIVITAET
UND
HINWEISE
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REAKTIONSMECHANISMEN
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ROLLE
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PHTHALOYL-COA
DECARBOXYLASE
UND
AEHNLICHEN
(DE)CARBOXYLASEN
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UBID-ENZYMFAMILIE
IM
ANAEROBEN
AROMATENABBAU
.
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6.
1.1
CHARAKTERISIERUNG
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DECARBOXYLASE
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THAUERA
CHLOROBENZOICA
.
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UBID-AEHNLICHE
ENZYME
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UNGESAETTIGTEN
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ANAEROBEN
PAK-ABBAUS
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2-NAPHTHOYL-COA
REDUKTASE:
HYDRIDTRANSFER
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NEGATIVEN
BIOLOGISCHEN
REDOXPOTENTIAL-LIMIT
.
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6.2.2
5,6-DIHYDRONAPHTHOYL-COA
REDUKTASE:
EIN
*OYE
*-ENZYM
MIT
EINEM
EINZIGARTIGEN
REAKTIONSMECHANISMUS
.
86
6.2.3
BIOTECHNOLOGISCHES
POTENTIAL
VON
ENZYMEN
DES
ANAEROBEN
AROMATENABBAUS91
6.2.4
EINE
POTENTIELL
ELEKTRONEN-BIFURKIERENDE
NADPH:FLAVIN
OXIDOREDUKTASE
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ELEKTRONENDONOR
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N47
.
95
I
6.2.5
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WAEHREND
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ANAEROBEN
AROMATENABBAUS
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SULFATREDUZIERERN
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98
6.2.6
VERGLEICH
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DEAROMATISIERUNG
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UND
POLYZYKLISCHER
AROMATEN
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