Pilzassoziierte Rezeptoraktivierung in zellbasierten Assays:
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Jena
2019
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
............................................................................................................
6
1.
ABSTRACT
....................................................................................................................................
8
2.
ZUSAMMENFASSUNG
................................................................................................................
10
3.
EINLEITUNG
...............................................................................................................................
12
3.1
DAS
ANGEBORENE
IMMUNSYSTEM
..................................................................................
12
3.2
DIE
C-TYPE
LECTIN
REZEPTOREN
....................................................................................
14
3.2.1
DER
AUFBAU
DES
DECTIN
1
REZEPTORS
.......................................................................
14
3.2.2
DER
SIGNALWEG
DES
DECTIN
1
REZEPTORS
..................................................................
16
3.3
DIE
TOLL-LIKE
REZEPTOREN
..............................................................................................
17
3.3.1
DER
AUFBAU
DER
TOLL-LIKE
REZEPTOREN
................................................................
18
3.3.2
DER
SIGNALWEG
DER
TOLL-LIKE
REZEPTOREN
...........................................................
19
3.4
DIE
ROLLE
DER
ZYTOKINE
...............................................................................................
21
3.5
PILZSPEZIES
UND
IHRE
BEDEUTUNG
FUER
HUMANE
PILZINFEKTIONEN
................................
21
3.5.1
DIE
STRUKTURELLEN
EIGENSCHAFTEN
DER
PILZE
........................................................22
3.5.2
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
.....................................................................................24
3.5.3
CANDIDA
SPECIES
.....................................................................................................
25
3.6
SS-GLUCAN
-
EIN
WICHTIGES
POLYSACCHARID
BEI
DER
ERKENNUNG
FUNGALER
INFEKTIONEN
26
4.
ZIELE
DER
ARBEIT
.....................................................................................................................27
5.
MATERIAL-
UND
METHODENTEIL
...............................................................................................
29
5.1
MATERIAL
........................................................................................................................
29
5.1.1
CHEMIKALIEN
UND
REAGENZIEN
.............................................................................
29
5.1.2
PUFFER
UND
STAMMLOESUNGEN
.................................................................................
30
5.1.3
STIMULANTIEN
UND
INHIBITOREN
............................................................................
31
5.1.4
OLIGONUKLEOTIDE
....................................................................................................
32
5.1.5
VERWENDETE
PLASMIDE
...........................................................................................
34
5.1.6
MATERIALIEN
...........................................................................................................
34
5.1.7
GERAETE
....................................................................................................................
35
5.2
ZELLKULTUR
......................................................................................................................
36
5.2.1
ZELLKULTURSUBSTANZEN
...........................................................................................
36
5.2.2
ZELLKULTURGERATE
UND
-MATERIAL
..........................................................................
37
5.2.3
VERWENDETE
ZELLLINIEN
...........................................................................................
37
5.2.4
ZUSAMMENSETZUNG
DER
ZELLKULTURMEDIEN
.........................................................
38
5.3
METHODEN
............................................................................................................................
39
5.3.1
VERWENDETE
KITS
UND
-METHODEN
........................................................................
39
5.3.2
POLYMERASEKETTEN
REAKTION
...................................................................................
39
5.3.3
AGAROSEGEL
..............................................................................................................
40
5.3.4
KLONIERUNG
.............................................................................................................
41
5.3.5
ZELLLINIEN
UND
IHRE
STANDARDKULTIVIERUNG
........................................................
45
5.3.6
ERZEUGUNG
TRANSIENTER
UND
STABILER
ZELLLINIEN
................................................
45
5.3.8
ISOLATION
DER
GENOMISCHEN
DNA
........................................................................
51
5.3.9
MESSPRINZIPIEN
.......................................
52
5.3.10
MESSUNG
AM
LUMINOMETER
.................................................................................
53
5.3.11
MESSUNG
AM
PHOTOMETER
......................................................................................
54
5.3.12
HITZEINAKTIVIERUNG
DER
HEFEN
UND
HYPHEN
......................................................
54
5.3.13
CHEMISCHE
INAKTIVIERUNG
DER
HEFEN
UND
HYPHEN
...........................................
55
5.3.14
STATISTIK
..................................................................................................................
56
6.
ERGEBNISSE
..............................................................................................................................
57
6.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
DECTIN
1
B-LUC-ZELLLINIE
........................................................
57
6.1.1
INTEGRATION
DES
DECTINLB
IN
DIE
LUC-ZELLLINIE
..................................................
57
6.1.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
DECTIN
1
B-LUC-ZELLLINIE
AM
LUMINOMETER
................
58
6.1.3
KLONIERUNG
UND
INTEGRATION
DER
COFAKTOREN
CARD9,
BCLLO
UND
MALTL
IN
DIE
DECTIN
1
B-LUC-ZELLLINIE
.........................................................................................
60
6.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
DECTIN
1
B-SEAP-ZELLLINIE
AM
PHOTOMETER
.....................
62
6.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
DECTIN
1
B-SEAP-LUC-ZELLLINIE
AM
LUMINOMETER
...........
65
6.4
CHARAKTERISIERUNG
DER
TLR-ZELLLINIEN
.....................................................................
67
6.4.1
ISOLIERTE
FUNGALE
ZELLWANDBESTANDTEILE
..............................................................
67
6.4.3
HITZEINAKTIVIERTE
PILZLIGANDEN
.............................................................................
71
6.4
THIMEROSAL
ALS
AKTIVATOR
DES
NF-
K
B
SIGNALWEGS
........................................................
72
7.
DISKUSSION
..............................................................................................................................
74
7.1
DECTIN
LB
ALS
DETEKTOR
FUNGALER
SUBSTANZEN
UEBER
SS-GLUCANE
...................................
74
7.1.2
DIE
COFAKTOREN
DES
DECTINLB
.............................................................................
76
7.1.3
DIE
MORPHOLOGISCHE
PLASTIZITAET
VON
CANDIDA
ALBICANS
ALS
ERHOEHTER
GESUNDHEITLICHER
RISIKOFAKTOR
FUER
DEN
MENSCHEN
...........................................
77
7.1.4
DIE
WIRKUNG
VON
CANDIDA
SPECIES
UND
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
...............
78
7.2
TOLL-LIKE
REZEPTOREN
UND
IHRE
FUNKTION
BEI
DER
DETEKTION
FUNGALER
SUBSTANZEN
79
7.2.1
SS-GLUCAN
UND
SEINE
UNTERSCHIEDLICHEN
WIRKUNGEN
79
7.2.2
ZYMOSAN
-
EIN
AGONIST
DES
TOLL-
LIKE
REZEPTORS
5
81
7.3
INAKTIVIERUNG
VON
PILZLIGANDEN
82
7.4
EIGNUNG
DER
ZELLULAEREN
ASSAYS
FUER
DIE
DIAGNOSTIK
VON
HUMANEN
PILZINFEKTIONEN
83
8.
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
AUSBLICK
85
9.
LITERATURVERZEICHNIS
86
10.
ANHANG
90
10.1
ERGAENZENDE
INFORMATIONEN
90
10.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
94
10.3
TABELLENVERZEICHNIS
94
10.4
DANKSAGUNG
95
10.5
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
96
|
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