Identifikation von Anergie-assoziierter Genexpression CD4+ T-Zellen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2018]
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| Beschreibung: | 95 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS IMMUNSYSTEM 1
1.2 STUFEN DER T-ZELL AKTIVIERUNG 3
1.3 KOSTIMULATION 5
1.4 ANTIKOERPER ANTI-B7.1 UND ANTI-B7.2 5
1.5 IMMUNOLOGISCHE TOLERANZ 6
1.6 PERIPHERE TOLERANZ 7
1.7 ANERGIE 8
1.8 IMMUNSUPPRESSION BEI ALLOGENER STAMMZELLTRANSPLANTATION 9
1.9 ARBEITSHYPOTHESE UND ZIELSETZUNG 13
2 MATERIAL 14
2.1 VERWENDETE ZELLEN 14
2.2 MEDIEN, LOESUNGEN, PUFFER 14
2.3 ZELLKULTURFLASCHEN, -PLATTEN, -ROEHRCHEN, ETC. 15
2.4 FARBSTOFFE 16
2.5 VERWENDETE ANTIKOERPER 16
2.6 VERWENDETE BEADS 18
2.7 ZYTOKINE 18
2.8 3H-THYMIDIN 18
2.9 QPCR 19
2.10 KITS 19
2.11 GERAETE 19
2.12 SOFTWARE 20
3 METHODEN 21
3.1 GEWINNUNG VON PBMCS AUS BUFFY COATS 21
3.2 ERMITTLUNG DER ZEITZAHL MITTELS TRYPANBLAU-ZAEHLUNG 21
3.3 MAGNETISCHE SEPARATION 22
3.3.1 ZELLSEPARATION CD4+ ZELLEN 22
3.3.2 DEPLETION CD3* ZELLEN 23
3.4 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 24
3.5 BESTRAHLUNG VON ZELLMATERIAL MITTELS GAMMA-STRAHLUNG 26
3.6 ZELLKULTIVIERUNG 26
3.6.1 STIMULATION 26
3.6.2 PROLIFERATIONSTEST MITTELS 3H-THYMIDIN-LNKORPORATION 27
3.7 RESTIMULATION 29
3.7.1 RESTIMULATION MITTELS PBMCS 29
3.7.2 RESTIMULATION MITTELS OKT3 29
3.7.3 RESTIMULATION MITTELS ANTI-CD3/CD28-GECOATETEN MACSIBEADS 30
3.8 BINDUNGSANALYSE DER ANTIKOERPER ANTI-B7.1 UND ANTI-B7.2 30
3.9 LNTERLEUKIN-2-PRODUKTIONSMESSUNG 32
3.10 KRYOKONSERVIERUNG VON ZELLEN 32
3.11 RNA-ISOLATION 33
3.12 EXPRESSIONSANALYSE FUE R MRNA M IT QUANTITATIVER REAL-TIME-PCR 33
3.13 GENEARRAYS 33
3.14 STATISTISCHE DATENAUSWERTUNG 34
4 ERGEBNISSE 35
4.1 ERMITTLUNG DER OPTIMALEN INKUBATIONSDAUER UND ZELLZAHL PRO WELL 35
4.2 TITRATION DER ANTIKOERPER 36
4.3 VERGLEICH STIMULATION M IT PBMCS ZU STIMULATION M IT
CD3-DEPLETIERTEN PBMCS 37
4.4 WIRKUNG DER ANTIKOERPER ANTI B7.1 UND ANTI B7.2 41
4.4.1 UNTERSCHIEDE BEZUEGLICH DER PROLIFERATIONSINHIBITION 41
4.4.2 SPEZIFITAET DER ANTIKOERPER 43
4.4.3 CD25-EXPRESSIONSMESSUNG 45
4.5 RESTIMULATION 47
4.5.1 RESTIMULATION DURCH OKT3 48
4.5.2 RESTIMULATION DURCH CD3/CD28-BELADENE MACSIBEADS 48
4.5.3 RESTIMULATION DURCH CD3-DEPLETIERTE PBMCS 48
4.6 GENEARRAYS 51
5 DISKUSSION 37
5.1 ETABLIERUNG EINES MODELLS ZUR HERSTELLUNG HUMANER ANERGER T-ZELLEN
57
5.2 SCHWAECHEN UND KRITISCHE AUSEINANDERSETZUNG M IT DEM ERSTELLTEN
T-ZELL-MODELL 57
5.3 UMSETZTUNG DER ZIELE UND VORTEILE DES MODELLS 58
5.4 FUNKTION DER B7-MOLEKUELE 59
5.5 BEDEUTUNG DER DURCHGEFUEHRTEN MIRCROARRAYS 62
5.6 ZUKUNFTSPERSPEKTIVE 55
ZUSAMMENFASSUNG 67
LITERATURVERZEICHNIS
68
A
NHANG
78
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
88
DANKSAGUNG 91
LEBENSLAUF
92
EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG
94
|
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