Wirkung pflanzlicher Injektionspräparate aus Onopordum, Hyoscyamus, Primula, Chelidonium und Rosmarin auf die Viabilität von T-Zellen und die Aktivität intrazellulärer Signalwege in Lymphozyten:
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Freiburg im Breisgau
[2018]
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DANKSAGUNG..............................................................................................................................................
3
INHALTSVERZEICHNIS.....................................................................................................................................
4
ZUSAMMENFASSUNG....................................................................................................................................
7
1.
EINFUEHRUNG........................................................................................................................................
8
1.1. DAS
IMMUNSYSTEM...................................................................................................................
8
1.2.
CARDIODORON................................................................
9
1.3.
CHELIDONIUM...........................................................................................................................10
1.4.
ROSMARIN................................................................................................................................
11
1.4.1.
ROSMANOL........................................................................................................................13
1.4.2.
CAMOSOLSAEURE.................................................................................................................13
1.4.3.
CAMOSOL.........................................................................................................................14
1.4.4.
TRANS-CAFFESAEURE...........................................................................................................
14
1.5.
SIGNALTRANSDUKTION.................................................................................................................
15
1.5.1.
AKT..................................................................................................................................
15
1.5.2.
NF-KAPPAB.....................................................................................................................16
1.5.3.
ERK1/2...........................................................................................................................17
1.5.4.
STAT3............................................................................................................................17
1.6. ZIELE DER
ARBEIT.......................................................................................................................18
2. MATERIAL UND
METHODEN.................................................................................................................
19
2.1.
PRUEFPRAEPARATE..........................................................................................................................19
2.1.1.
INJEKTIONSLOESUNGEN........................................................................................................
19
2.1.2. CARDIODORON 5 %
............................................................................................................
19
2.1.3. CHELIDONIUM FERRO CULTUM RH
D2................................................................................
19
2.1.4. ROSMARINUS INFUSUM 5%
...............................................................................................
20
2.1.5. BESTIMMUNG DES ENDOTOXINGEHALTS
.............................................................................
20
2.2.
LYOPHILISIERUNG.....................................................................................................................
21
2.3. ISOLATION VON
PBMC...............................................................................................................21
2.4.
ZELLZAHLBESTIMMUNG..............................................................................................................22
2.5. T-ZELLEN
23
2.5.1.
CFSE-FAERBUNG...............................................................................................................
23
2.5.2. AKTIVIERUNG DER
ZELLEN..................................................................................................23
2.5.3.
KONTROLLPROBEN..............................................................................................................
23
2.5.4. ANSATZ DER ZU UNTERSUCHENDEN
STOFFE...........................................................................24
2.5.5. BESTIMMUNG DER APOPTOSE- UND
NEKROSERATE..............................................................24
2.5.6. BESTIMMUNG DER EXPRESSION VON AKTIVIERUNGSMARKERN
.............................................
25
2.5.7. BESTIMMUNG DER
PROLIFERATIONSRATE...............................................................................25
2.6. INTRAZELLULAERES
SIGNALING.........................................................................................................
26
2.6.1. ANSATZ UND
KONTROLLPROBEN...........................................................................................26
2.6.2. AKTIVIERUNG DER
ZELLEN.................................................................................................
26
2.6.3. FIXIERUNG DER
ZELLEN......................................................................................................27
2.6.4. FAERBUNG DER INTRAZELLULAEREN
SIGNALMOLEKUELE...............................................................27
2.7. STATISTISCHE
ANALYSE...............................................................................................................28
3.
ERGEBNISSE......................................................................................................................................29
3.1.
CARDIODORON...........................................................................................................................
29
3.1.1. CARDIODORON STIMULIERT DIE PROLIFERATION VON PBMC UND CD4+
T-ZELLEN
................
29
3.1.2. CARDIODORON HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE APOPTOSE- UND
NEKROSEINDUKTION VON
LYMPHOZYTEN..................................................................................................................................30
3.1.3. CARDIODORON HAT KEINEN EINDEUTIGEN EFFEKT AUF DIE DIE EXPRESSION
VON CD69 UND
CD25 AUF CD4+ UND CD8+
T-ZELLEN............................................................................................
31
3.2.
CHELIDONIUM..........................................................................................................................
33
3.2.1. CHELIDONIUM BEEINFLUSST DIE PROLIFERATION VON PBMC UND CD4+
T-ZELLEN NICHT.... 33
3.2.2. CHELIDONIUM HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE APOPTOSE- UND
NEKROSEINDUKTION VON
LYMPHOZYTEN..................................................................................................................................34
3.2.3. CHELIDONIUM ZEIGT KEINEN EINFLUSS AUF DIE EXPRESSION VON CD69 UND
CD25 AUF CD4+
UND CD8+
T-ZELLEN........................................................................................................................
35
3.3.
ROSMARIN...............................................................................................................................
36
3.3.1. EINFLUSS VON ROSMARINEXTRAKTEN UND SEINEN INHALTSSTOFFEN AUF DIE
VIABILITAET UND
FUNKTION VON LYMPHOZYTEN
.............................................................
36
3.3.2. ANALYSE DES ROSMARINEXTRAKTS AUF SEINE INHALTSSTOFFE
...............................................
45
3.3.3. INDUKTION DER APOPTOSE DURCH ROSMARINEXTRAKT BEI ZWEISTUENDIGER
INKUBATION
......
45
3.3.4. EINFLUSS VON ROSMARINEXTRAKT UND TRANS-CAFFESAEURE AUF DIE
AKTIVITAET VON
INTRAZELLULAEREN SIGNALWEGEN IN B- UND
T-ZELLEN..........................................................................46
4. DISKUSSION UND
AUSBLICK...............................................................................................................
51
4.1. ZUR EIGNUNG DER GEWAEHLTEN
METHODEN................................................................................51
4.2. WIRKUNG VON CARDIODORON AUF LYMPHOZYTEN
.....................................................................
52
4.3. WIRKUNG VON CHELIDONIUM MAJUS AUF LYMPHOZYTEN
...........................................................
52
4.4. WIRKUNG VON
ROSMARINUS OFFICINALIS AUF
LYMPHOZYTEN.....................................................53
4.5.
AUSBLICK.................................................................................................................................
57
5.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.................................................................................................................
59
6.
LITERATURVERZEICHNIS........................................................................................................................62
7.
PUBLIKATION.....................................................................................................................................
70
8. EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG.........................................................................................................71
9. ERKLAERUNG ZUM
EIGENANTEIL............................................................................................................
72
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