Rezeptor-vermittelte RNAi-Therapie von nicht-kleinzelligen Bronchialkarzinomzellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Münster
2018
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| Beschreibung: | 98 Blätter Illustrationen 30 cm |
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 4
1.1 NICHT-KLEINZELLIGES LUNGENKARZINOM (NSCLC) 4
1.1.1 EPIDEMIOLOGIE, HISTOLOGIE & SYMPTOMATIK 4
1.1.2 THERAPIE DES NSCLC 5
1.1.3 VERAENDERUNG DER MOLEKULARGENETISCHEN ZUSAMMENSETZUNG
VON NSCLC-ZELLEN 8
1.2 RNA-INTERFERENZ 13
1.2.1 PRINZIP UND PERSPEKTIVEN 13
1.2.2 TRANSPORT VON SIRNAS IN EINE ZELLE 15
1.3 ZIELSETZUNG 19
2 MATERIAL UND METHODEN 20
2.1 MATERIAL 20
2.1.1 GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIAL 20
2.1.2 CHEMIKALIEN 23
2.1.3 ANTIKOERPER 25
2.1.4 SIRNAS/ESIRNAS 25
2.1.5 ZELLLINIEN 26
2.1.6 KITS 26
2.1.7 PLASMIDE 27
2.2 METHODEN BEZUEGLICH DER VERWENDUNG VON CETUXIMAB ALS CARRIER 28
2.2.1 BILDUNG DES CETUXIMAB-SULFO-SMCC-PROTAMIN-KOMPLEXES 28
2.2.2 INTERNALISIERUNGSANALYSE DES CETUXIMAB-SULFO-SMCC-PROTAMIN-
KOMPLEXES MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 29
2.2.3 KOPPLUNG DER SIRNAS AN DEN
EGFR-ANTIKOERPER-SULFO-SMCC-PROTAMIN-KOMPLEX 30
2.2.4 BANDSHIFT ZUR KONTROLLE DER SIRNA-KOPPLUNGSFAEHIGKEIT DES
EGFR-ANTIKOERPER-SULFO-SMCC-PROTAMIN-KOMPLEXES 32
2.2.5 SIRNA-LNTERNALISIERUNG 33
2.2.6 ERMITTLUNG DES KNOCK-DOWNS AUF MRNA-EBENE 35
2.2.7 COLONY FORMING ASSAY 36
2.3 METHODEN ZUR VERWENDUNG DES ANTIKOERPERS GR11L 38
2.3.1 BILDUNG DES GR11 L-SULFO-SMCC-PROTAMIN-KOMPLEXES UND
KOPPLUNG AN SIRNA 38
2.3.2 REZEPTOREXPRESSIONSANALYSE MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 38
2.3.3 SIRNA-LNTERNALISIERUNG 39
2.3.4 COLONY FORMING ASSAYS 40
2.4 TRANSFEKTION DER ZELLLINIE SKLU1 40
2.5 ZELLKULTUR 40
3 ERGEBNISSE 42
3.1 BEHANDLUNG VON NSCLC-ZELLLINIEN MIT CETUXIMAB-ESIRNA-KOMPLEXEN 42
3.1.1 INTERNALISIERUNG DES EGF-REZEPTORS NACH BEHANDLUNG MIT DEM
CETUXIMAB-SULFO-SMCC-PROTAMIN-KONJUGAT 42
3.1.2 ERMITTLUNG DER ESIRNA-KOPPLUNGSFAEHIGKEIT DES CETUXIMAB-SULFO-SMCC-
PROTAMIN-KONJUGATS 45
3.1.3 NACHWEIS DER ANTIKOERPER-VERMITTELTEN SIRNA-LNTERNALISIERUNG
IN NSCLC-ZELLEN 46
3.1.4 ERMITTLUNG DES KNOCK-DOWNS VON KRAS AUF MRNA-EBENE NACH
ANTIKOERPER-KRAS-ESIRNA-BEHANDLUNG 51
3.1.5 COLONY FORMING ASSAYS 53
3.1.6 UEBERPRUEFUNG DER CETUXIMAB-SENSITIVITAET DER ZELLLINIE HCC827 IM
COLONY FORMING ASSAY 59
3.2 NUTZUNG VON ANTI-IGF-1R-ANTIKOERPER-ESIRNA-KOMPLEXEN FUER DIE
BEHANDLUNG
VON NSCLC-ZELLEN 62
3.2.1 EXPRESSION DES IGF-1R REZEPTORS AUF DER NSCLC-ZELLLINIE HCC827 62
3.2.2 NACHWEIS DER IGF-1R-ANTIKOERPER-VERMITTELTEN SIRNA-LNTERNALISIERUNG
63
3.2.3 KNOCKDOWN VON EGFR MITTELS IGF-1R-ANTIKOERPER-ESIRNA-KOMPLEXEN 64
3.3 TRANSFEKTION DER ZELLLINIE SKLU1 MIT FLUORESZENZMARKERN 66
4 DISKUSSION 68
4.1 RNA-INTERFERENZ UND IHRE LOKALER EINSATZ BEI TUMORERKRANKUNGEN 68
4.2 SYSTEMISCHE ADMINISTRATION VON SIRNAS: HINDERNISSE UND MOEGLICHKEITEN
70
4.3 AKTUELLE STUDIENERGEBNISSE SYSTEMISCHER RNAI-BASIERTER
TUMORBEHANDLUNGEN:
TUMORZELL- UNSPEZIFISCHE UND -SPEZIFISCHE ANSAETZE 72
4.4 EIN ZELL-SPEZIFISCHER ANSATZ: REZEPTOR-VERMITTELTE RNAI-THERAPIE 75
4.5 DIE SUCHE NACH RNAI-ZIELGENEN 77
4.6 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 81
5 LITERATURVERZEICHNIS 83
6 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 94
7 TABELLENVERZEICHNIS 95
8 LEBENSLAUF 96
9 DANKSAGUNG 98
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