Analyse der Genexpression von Mitgliedern des Komplex I der mitochondrialen Elektronentransportkette beim klarzelligen Nierenzellkarzinom:
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Bonn
2017
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS................................................................................................................
7
1.
EINLEITUNG.................................................................................................................................9
1.1
NIERENZELLKARZINOM........................................................................................................9
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE..........................................................................................................
9
1.1.2
AETIOLOGIE...................................................................................................................10
1.1.3
KLASSIFIKATION.........................................................................................................
11
1.1.4 KLINIK UND
DIAGNOSE..............................................................................................14
1.1.5 THERAPIE UND
PROGNOSE......................................................................................
16
1.2 MITOCHONDRIALE ELEKTRONENTRANSPORTKETTE
.................................................................
19
1.2.1 AUFBAU UND
FUNKTION............................................................................................19
1.2.2 KOMPLEX I:
NADH-UBIQUINON-OXIREDUKTASE...................................................21
1.2.3 ELEKTRONENTRANSPORTKETTE IM NIERENZELLKARZINOM
..........................................
22
1.3
ZIELSETZUNG.....................................................................................................................23
2. MATERIAL UND M
ETHODEN.....................................................................................................
25
2.1 M
ATERIAL...........................................................................................................................25
2.1.1 G E RAE TE
.....................................................................................................................25
2.1.2
LABORMATERIALIEN....................................................................................................26
2.1.3
CHEMIKALIEN...........................................................................................................
27
2.1.4 LOESUNGEN
.........
.
.....................................................................................................28
2.1.5
KITS...........................................................................................................................29
2.1.6
PRIMER......................................................................................................................29
2.1.7
ANTIKOERPER...............................................................................................................31
2.1.8
SOFTWARE.................................................................................................................
31
2.2
METHODEN.......................................................................................................................
31
2.2.1 REEVALUATION VON
MICROARRAY-STUDIEN..............................................................31
2.2.2
PRIMERDESIGN.........................................................................................................
32
2.2.3 GEWEBEPROBEN FUER DIE MRNA
AUFREINIGUNG..................................................33
2.2.4 ISOLIERUNG VON
RNA...............................................................................................34
2.2.5 CDNA
SYNTHESE.....................................................................................................35
2.2.6 QUANTITATIVE REAL-TIME P C R
.............................................................................
36
2.2.7 BERECHNUNG UND QUANTIFIZIERUNG DER MESSERGEBNISSE
................................
41
2.2.8 STATISTISCHE
AUSWERTUNG.....................................................................................
42
2.2.9 TISSUE
MICROARRAYS...............................................................................................43
2.2.10 IMMUNOHISTOCHEMISCHE
FAERBUNG.................................................................
45
2.2.11 MIKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG...........................................................................
46
2.2.12 PROBEN WESTERN BLOT
.......................................................................................
47
2.2.13 PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG NACH BRADFORD
...................................
47
2.2.14 WESTERN
BLOT.......................................................................................................48
3.
ERGEBNISSE............................................................................................................................
50
3.1 METAANALYSE
MICROARRAY-STUDIEN.............................................................................50
3.2 MRNA
EXPRESSION........................................................................................................
52
3.2.1
SCREENING-KOHORTE................................................................................................52
3.2.2
VALIDIERUNGS-KOHORTE...........................................................................................
54
3.3
PROTEINEXPRESSION........................................................................................................
58
3.3.1 ERGEBNISSE DER
IMMUNOHISTOCHEMIE...............................................................53
3.3.2
WESTERNBLOT............................................................................................................63
4.
DISKUSSION..............................................................................................................................66
5.
ZUSAMMENFASSUNG.............................................................................................................71
6.
LITERATURVERZEICHNIS.............................................................................................................
73
7. DANKSAGUNG
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