Molekulargenetische Analyse und Charakterisierung von Tumorzellen bei Patientinnen mit operablem Brustkrebs:
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Jena
[2017]
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
KURZFASSUNG..............................................................................................................................3
ABSTRACT.....................................................................................................................................
4
INHALTSVERZEICHNIS...................................................................................................................5
ABBILDUNGSVERZEICHNIS...........................................................................................................
7
TABELLENVERZEICHNIS................................................................................................................9
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.......................................................................................................
10
1
EINLEITUNG...................................................................................................................
15
1.1
BRUSTKREBS....................................................................................................................
15
1.2 KARZINOGENESE UND METASTATISCHE
PROGRESSION........................................................16
1.3 ZIRKULIERENDE EPITHELIALE TUMORZELLEN (C ETC )
......................................................
17
1.4 VORSTELLUNG DER UNTERSUCHTEN G
ENE..........................................................................
19
1.4.1
RPL13A.......................................................................................................................
19
1.4.2
GREMLIN........................................................................................................................
19
1.4.3
VIMENTIN.....................................................................................................................
20
1.4.4 HER2/NEU
(ERBB2)....................................................................................................
20
1.4.5 EPCAM
.........................................................................................................................
21
1.4.6 N
ANOG.........................................................................................................................
23
2 ZIELE DER
ARBEIT.........................................................................................................
24
3 MATERIAL UND M
ETHODEN..........................................................................................
25
3.1
MATERIALIEN...................................................................................................................25
3.1.1
PATIENTENAUSWAHL........................................................................................................25
3.1.2
LABORGERAETE.................................................................................................................
25
3.1.3
VERBRAUCHSMATERIALIEN...............................................................................................
25
3.1.4
CHEMIKALIEN................................................................................................................
25
3.1.5 K ITS
..............................................................................................................................
26
3.1.6
DNA-OLIGONUKLEOTIDE...............................................................................................
26
3.1.7 PUFFER UND
LOESUNGEN.................................................................................................
27
3.2
METHODEN....................................................................................................................
27
3.2.1 AUFBEREITUNG DER
ZELLEN............................................................................................
27
3.2.2 SILANISIERUNG DER OBJEKTTRAEGER
..................................................................................
28
3.2.3
GERAETEEINSTELLUNG........................................................................................................28
3.2.4
SAMMELVORGANG..........................................................................................................29
3.3 DURCHFUEHRUNG DER REVERSEN-TRANSKRIPTION-POLYMERASEKETTENREAKTION
(RT-
PC R
)............................................................................................................................
35
3.3.1 L
YSE.............................................................................................................................
35
3.3.2 REVERSE TRANSKRIPTION
(RT).......................................................................................35
3.3.3 POLYMERASEKETTENREAKTION (PC R
).............................................................................
38
3.4 DURCHFUEHRUNG DER GELELEKTROPHORESE
.......................................................................
40
3.5 SILBERFARBUNG DES HAMSTOFFGELS
...............................................................................
41
4
ERGEBNISSE..................................................................................................................43
4.1 PATIENTINNEN MIT ABNAHME DER ZAHL DER IM BLUT ZIRKULIERENDEN ZELLEN
POSTOPERATIV................................................................................................................
43
4.1.1 GESTEIGERTE
EXPRESSION..............................................................................................
43
4.1.2 UNVERAENDERTE
EXPRESSION............................................................................................49
4.1.3 VERMINDERTE
EXPRESSION.............................................................................................51
4.2 PATIENTINNEN MIT ZUNAHME DER ZAHL DER IM BLUT ZIRKULIERENDEN ZELLEN
POSTOPERATIV.................................................................................................................53
4.2.1 VERMINDERTE
EXPRESSION.............................................................................................53
4.3 UEBERBLICK DER
ERGEBNISSE..........................................................................................
61
5
DISKUSSION...................................................................................................................64
5.1 UNTERSCHIEDE IM TUMORZELL VERLAUF IN ABHAENGIGKEIT VOM OPERATIVEN
V
ORGEHEN.....................................................................................................................66
5.2 EINFLUSS DER OPERATION AUF DIE TRANSKRIPTIONEILE A
KTIVITAET.....................................68
5.3 HETEROGENITAET ZIRKULIERENDER TUM ORZELLEN
..............................................................
70
5.4 NACHWEIS VON GENAKTIVITAET MIT BEDEUTUNG FUER EMT UND
TUMORPROGRESSION.... 71
5.5 NACHWEIS VON GENAKTIVITAET DER STAMMZELLAKTIVITAET
...............................................
73
6 SCHLUSSFOLGERUNG UND AUSBLICK
.............................................................................
75
7
LITERATURVERZEICHNIS................................................................................................
77
8
ANHANG........................................................................................................................
85
8.1
DANKSAGUNG.................................................................................................................
85
8.2
LEBENSLAUF...................................................................................................................86
8.3 EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG.........................................................................................87
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