Verfügbarkeit: Einfluss von Nanogelen auf Adhäsion und osteogene Differenzierung von Fibroblasten und Stammzellen

Einfluss von Nanogelen auf Adhäsion und osteogene Differenzierung von Fibroblasten und Stammzellen:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Kandt, Pierre 1987- (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Aachen [2018]
Schlagworte:	Hochschulschrift
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.........................................................................................................III 1. EINLEITUNG.................................................................................................................................1 1.1 NANOGELE ............................................................................................................................ 1 1.2 RGD-KOPPLUNG ........................................................ 1.3 ZUSAMMENSETZUNG DER NANOGELE DIESER ARBEIT. 1.4 DERMALE FIBROBLASTEN ............................................. 1.5 STAMMZELLEN ............................................................ 1.6 PROBLEME IN DER IMPLANTAT-TECHNIK. ............................................................................. 11 1.7 ZIEL DER ARBEIT .................................................................................................................. 13 2. M ATERIAL..................................................................................................................................14 2.1 GERAETE ................................................................................................................................ 14 2.2 SOFTWARE ............................................................................................................................ 15 2.3 GLASWAREN ......................................................................................................................... 15 2.4 VERBRAUCHSMATERIALIEN ................................................................................................... 15 2.5 GEBRAUCHSCHEMIKALIEN ................................................................................................... 16 2.6 GEBRAUCHSLOESUNGEN ........................................................................................................ 17 2.7 LOESUNGSMITTEL ................................................................................................................... 17 2.8 KITS ..................................................................................................................................... 17 2.9 MOLEKULARBIOLOGISCHE CHEMIKALIEN .............................................................................. 17 2.10 ZELLKULTURMEDIEN ............................................................................................................ 18 2.11 ANTIKOERPER ....................................................................................................................... 19 2.12 PROTEINE/PEPTIDE .......................................................................................................... 19 2.13 PRIMER (FIRMA MWG-BIOTECH) ..................................................................................... 19 2.14 ZELLEN .............................................................................................................................. 20 2.15 NANOGELE FUER ZELLVERSUCHE .......................................................................................... 20 2.16 NANOGELE FUERCRGD-KOPPLUNG .................................................................................... 21 3. METHODEN............................................................................................................................... 22 3.1 ZELLKULTURTECHNIK .............................................................................................................. 22 3.1.1 ISOLATION VON MESENCHYMALEN STAMMZELLEN AUS DEM KNOCHENMARK ........... 22 3.1.2 KULTIVIERUNG VON MESENCHYMALEN STAMMZELLEN UND FIBROBLASTEN ................ 22 3.1.3 EINFRIEREN VON ZELLEN..............................................................................................23 3.1.4 AUFTAUEN VON ZELLEN............................................................................................... 23 3.1.5 ZELLZAHLBESTIMMUNG............................................................................................... 24 3.1.6 INDUKTION VON OSTEOGENER DIFFERENZIERUNG MESENCHYMALER STAMMZELLEN... 24 3.2 PROTEINCHEMISCHE METHODEN ........................................................................................ 25 3.2.1 NACHWEIS OSTEOGENER DIFFERENZIERUNG MITTELS ALIZARIN ROT FAERBUNG ............. 25 3.2.2 ELEKTRONENMIKROSKOPISCHER NACHWEIS OSTEOGENER DIFFERENZIERUNG ............... 25 3.2.3 VITALITAETS-TEST.......................................................................................................... 25 3.2.4 ZYTOTOXIZITAETS-TEST.................................................................................................. 26 3.2.5 SYNTHESEPROZESS DER NANOGELE .......................................................................... 27 3.2.6 CRGD-KOPPLUNG AUF NANOGELEN .......................................................................... 28 3.2.7 CRGD-LMMUNOGOLDMARKIERUNG.............................................................................29 3.3 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN ................................................................................... 30 3.3.1 RNA-ISOLATION...........................................................................................................30 3.3.2 RNA-QUANTIFIZIERUNG..............................................................................................31 3.3.3 CDNA-SYNTHESE....................................................................................................... 31 3.3.4 POLYMERASE KETTENREAKTION (PCR)....................................................................... 32 4. ERGEBNISSE............................................................................................................................33 4.1 LEBEND/TOT-FAERBUNG VON L929-ZELLEN, DERMALEN FIBROBLASTEN UND HUMANEN MESENCHYMALEN STAMMZELLEN AUF NANOGELEN ................................................................ 33 4.1.1 L929-ZELLEN AUF NANOGELEN...................................................................................33 4.1.2 DERMALE FIBROBLASTEN AUF NANOGELEN ................................................................. 36 4.1.3 STAMMZELLEN AUF NANOGELEN................................................................................ 39 CO ^ 00 O) 4.1.4 ZELLEN AUF MIT ISOEUGENOL GEKOPPELTEN NANOGELEN ...................................... 43 4.2 METABOLISCHE AKTIVITAET DER ZELLEN AUF GETESTETEN NANOGELEN ................................. 45 4.3 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHER NACHWEIS DER CRGD-KOPPLUNG AUF DEN NANOGELEN ............................................................................................................................... 48 4.4 NACHWEIS DER OSTEOGENEN DIFFERENZIERUNG VON MSC AUF NANOGELEN MIT UND OHNE CRGD-KOPPLUNG ..................................................................................................................... 52 4.5 MOLEKULARBIOLOGISCHER NACHWEIS OSTEOGENER DIFFERENZIERUNG AUF NANOGELEN MIT UND OHNE CRGD-KOPPLUNG ................................................................................................... 57 5. DISKUSSION................................................................................................................... 65 5.1 ZYTOKOMPATIBILITAET VON FIBROBLASTEN UND MESENCHYMALEN STAMMZELLEN AUF PVCL-NANOGELEN GEKOPPELT MIT UNTERSCHIEDLICHEN KOMONOMEREN ............................. 65 5.2 ZYTOKOMPATIBILITAET VON FIBROBLASTEN UND MESENCHYMALEN STAMMZELLEN MIT ISOEUGENOL GEKOPPELTEN PVCL NANOGELEN UND UNTERSCHIEDLICHEN SPACERLAENGEN.... 69 5.3 METABOLISCHEN ZELLAKTIVITAET AUF DEN GETESTETEN NANOGELEN ..................................... 70 5.4 NACHWEIS VON GEBUNDENEM CRGD MITTELS IMMUNOGOLDFAERBUNG ............................ 72 5.5 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNGSEIGENSCHAFT VON MESENCHYMALEN STAMMZELLEN AUF PVCL-NANOGELEN ................................................................................................................... 73 6. ZUSAMMENFASSUNG..................................................................................................... 78 7. ABSTRACT.........................................................................................................................79 LITERATURVERZEICHNIS.......................................................................................................... V ANHANG X
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