Identifikation funktionsrelevanter Transmembranproteine in Drosophila Nephrozyten:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2017]
|
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| Beschreibung: | VI, 125 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
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|---|---|
| adam_text | 1. INHALT
1.
INHALT....................................................................................................................................
IV
2.
EINLEITUNG..............................................................................................................................1
2.1 DER MODELLORGANISMUS DROSOPHILA
MELANOGASTER.................................................1
2.2 NEPHROZYTEN ALS MODELL DER
PODOZYTEN..................................................................2
2.3 STUFENWEISER SCREEN IN D. MELANOGASTER
..............................................................
7
2.4
TRANSMEMBRANPROTEINE...........................................................................................
11
2.5 GENETISCHE W
ERKZEUGE...........................................................................................
13
2.5.1 GAL4/U
AS-SYSTEM..............................................................................................13
2.5.2
RNA-INTERFERENZ.................................................................................................
15
2.5.3 KOMBINATION VON GAL4/UAS UND RNAI IN D.
MELANOGASTER.......................17
2.6 ZIELSETZUNG DER
ARBEIT...............................................................................................18
3.
ERGEBNISSE........................................................................................................................19
3.1 ENDOGENER UPTAKE-VERSUCH, ETABLIERUNG UND
VALIDIERUNG...............................19
3.1.1 AUSWAHL DES
REPORTERSTAMMS........................................................................19
3.1.2 AUSWAHL DER OPTIMALEN
LARVENGROESSE............................................................
21
3.1.3 AUSWAHL DER
LOCHBLENDENGROESSE....................................................................
22
3.1.4 KONFOKALE BILDER- EIN ERSTER EINDRUCK DES IN VIVO
UPTAKE-VERSUCHES.... 24
3.2 T E M
.............................................................................................................................
27
3.3 ENDOGENER UPTAKE-VERSUCH, QUANTIFIZIERUNG
.....................................................
39
3.3.1 QUANTIFIZIERUNG MIT CELLPROFILER
.......................................................................
39
3.3.2 DER GESAMTE ENDOGENE UPTAKE-SCREEN IM UEBERBLICK
...............................
42
3.3.3 ENTSCHEIDUNG FUER DIE DARSTELLUNG MIT TAGESKONTROLLEN
..............................
49
3.3.4 LARVENGROESSE- VALIDIERUNG ANHAND QUANTIFIZIERTER DATEN
.............................
55
3.3.5 UNTERSCHIEDLICHE RNAI-STAEMME GEGEN EIN G E N
.........................................57
3.3.6 EINFLUSS DER
TEMPERATUR...................................................................................58
3.4 SEM
.....................................................
60
3.5 GEPULSTER UPTAKE-VERSUCH
.....................................................................................
62
3.6 ZUSAMMENFASSUNGEN DER KONTROLLEN UND HITS
....................................................
64
3.6.1 WILDTYP
BERLIN.....................................................................................................
65
3.6.2 W 1 1 1 8
.................................................................................................................
66
3.6.3
KIRRE.....................................................................................................................
68
3.6.4 SNS......................................................... 69
3.6.5 SYNTAXIN 5
...........................................................................................................
72
3.6.6 TRAPPED IN ENDODERM
1....................................................................................
74
3.6.7
MAPMODULIN........................................................................................................76
4.
DISKUSSION.......................................................................................................................
78
4.1 INTERESSANTE TRANSMEMBRANPROTEINE MIT FUNKTIONSRELEVANZ
...........................
78
4.1.1 SYNTAXIN 5
...........................................................................................................
78
4.1.2 TRAPPED IN ENDODERM
1....................................................................................
79
4.1.3
MAPMODULIN........................................................................................................81
4.1.4 C G 4 0 1 7 8
............................................................................................................
83
4.1.5 RIBOSOMAL PROTEIN 8 7
......................................................................................
84
4.1.6 CG 13 7 4 3
............................................................................................................
84
4.1.7 VACUOLAR H+ATPASE SUBUNIT
100-1................................................................ 85
4.2 VOR-UND NACHTEILE DES RNAI-SCREENS IN D. MELANOGASTER
..............................
86
4.3 FAZIT DES SCREENS TRANSMEMBRANPROTEIN-KODIERENDER G
ENE..........................89
5. MATERIAL UND
METHODEN.................................................................................................
90
5.1
MATERIALIEN...................................................................................................................
90
5.1.1 VERBRAUCHSMATERIALIEN UND G
ERAETE.................................................................90
5.1.2 CHEMIKALIEN
...........................................
91
5.1.3 MEDIEN UND
LOESUNGEN.....................................................................................
92
5.1.4
SOFTWARE..............................................................................................................
93
5.1.5
FLIEGENSTAEMME..................................................................................................93
5.2.1
FLIEGENHALTUNG...................................................................................................
97
5.2.2 GESCHLECHTSMERKMALE UND ANSATZ VON
KREUZUNGEN..................................97
5.2.3 UNTERSCHEIDUNG VON ENTWICKLUNGSSTADIEN
....................................................
98
5.2.4 GAL4/UAS-SYSTEM
.............................................................................................
98
5.2.5
RNA-INTERFERENZ.................................................................................................98
5.2.6 KOMBINATION BEIDER WERKZEUGE IM STUFENWEISEN
SCREEN.........................99
5.2.7 PROTOKOLL ENDOGENER IN VIVO UPTAKE-VERSUCH
..............................................
99
5.2.8 PRAEPARATION VON GARLAND-ZELLEN
...................................................................
101
5.2.9 PROBENVORBEREITUNG FUER DAS TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOP
........
102
5.2.10 PROBENVORBEREITUNG FUER DAS RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
....................
104
5.2.11 PROTOKOLL GEPULSTER
UPTAKE-VERSUCH.........................................................105
5.2.12 QUANTIFIZIERUNG MIT
CELLPROFILER.................................................................
106
5.2.13 STATISTISCHE AUSWERTUNG MIT GRAPHPAD PRISM
.......................................107
6.
ZUSAMMENFASSUNG........................................................................................................108
7.
LITERATURVERZEICHNIS.......................................................................................................109
8.
ANHANG............................................................................................................................
117
8.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS..........................................................................................
117
8.2
TABELLENVERZEICHNIS................................................................................................120
8.3
ABBILDUNGSVERZEICHNIS...........................................................................................
120
8.4
DANKSAGUNG............................................................................................................
122
8.5
LEBENSLAUF................................................................................................................123
8.6 ERKLAERUNG ZUM
EIGENANTEIL....................................................................................
124
8.7 EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG................................................................................125
|
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