Funktionelle Analysen des tumorrelevanten Faktors Osteopontin in gynäkologischen Tumoren:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg i. Br.
2017
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| Beschreibung: | 121 Blätter Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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|---|---|
| adam_text | INHALT
INHALT
........................................................................
ABKUERZUNGEN.......................................................
TABELLEN
.................................................................
ABBILDUNGEN
.........................................................
1 EINLEITUNG.....................................................
1.1 BEDEUTUNG GYNAEKOLOGISCHER TUMOREN
1.1.1 DAS MAMMAKARZINOM
...............
1.1.2 DAS ENDOMETRIUMKARZINOM......
1.1.3 DAS OVARIALKARZINOM
.................
1.1.4 DAS ZERVIXKARZINOM
1.2 ZELLULAERE STRESSFAKTOREN....
1.2.1 HYPOXIE UND AZIDOSE
..........................................
1.2.2 HYPERTHERMIE
.........................................................
1.3 ALTERNATIVES
SPLEISSEN.......................................................
1.3.1 PRAE-MRNA PROZESSIERUNG
..................................
1.3.2 DIE SPLEISSREAKTION
................................................
1.3.3 SPLEISSMUSTER
.........................................................
1.3.4 BEDEUTUNG DES ALTERNATIVEN SPLEISSENS
............
1.3.5 PATHOLOGISCHE BEDEUTUNG
..................................
1.4
OSTEOPONTIN.......................................................................
1.4.1 HINTERGRUND
...........................................................
1.4.2 STRUKTURELLER A UFBAU.............................................
1.4.3 OSTEOPONTIN UND ALTERNATIVES SPLEISSEN
...........
1.4.4 POSTTRANSLATIONALE MODIFIKATIONEN......................
1.4.5 PHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG
.................................
1.4.6 PATHOLOGISCHE BEDEUTUNG
..................................
1.4.7 OSTEOPONTIN IN GYNAEKOLOGISCHEN TUMOREN
......
1.4.8 OSTEOPONTIN IN ANDEREN TUMOREN
......................
1.4.9 OPN: POTENTIELLER BIOMARKER UND THERAPIEZIEL
1.5 ZIELE DER VORLIEGENDEN ARBEIT
.........................................
2 MATERIAL UND M ETHO DEN
................................................
2.1
MATERIALIEN..........................................................................
2.1.1 VERBRAUCHSMATERIALIEN
........................................
2.1.2 TECHNISCHE GERAETE...............................................
2.1.3 REAGENZIEN UND CHEMIKALIEN
...........................
2.1.4 PUFFER UND LOESUNGEN............................................
2.1.5 ZELLLINIEN
.................................................................
.III
.VI
.IX
..X
11
11
11
14
17
18
21
21
23
24
24
25
27
28
30
33
33
33
35
37
38
40
42
44
45
47
48
48
48
49
51
54
56
2.1.6 PRIM
ER................................................................................................57
2.1.7
ANTIKOERPER..........................................................................................
57
2.1.8
SOFTWARE............................................................................................
58
2.2
METHODEN.....................................................................................................
59
2.2.1 DIE
ZELLKULTUR....................................................................................
59
2.2.1.1
STRESSZUSTAENDE..................................................................59
2.2.2
RNA-ISOLIERUNG.................................................................................60
2.2.3 REVERSE
TRANSKRIPTION....................................................................
61
2.2.4 POLYMERASE
KETTENREAKTION...........................................................61
2.2.5
GELELEKTROPHORESE...........................................................................
62
2.2.6
SEQUENZIERUNG.................................................................................63
2.2.6.1 AMPLIFIKATION DES ZIELGENS
..............................................
63
2.2.6.2 LIGATION VON DNA-FRAGMENTEN IN PLASMIDE
................
63
2.2.6.3 TRANSFORMATION VON E. COLI
ZELLEN..................................64
2.2.6.4
PLASMIDISOLIERUNG.............................................................
64
2.2.6.5 SEQUENZANALYSE
...............................................................
65
2.2.7 QUANTITATIVE REAL-TIME P C R
..........................................................65
2.2.3
PROTEIN-EXTRAKTION............................................................................67
2.2.9 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG (BCA-METHODE)
.............................
63
2.2.10
SDS-GELELEKTROPHORESE.................................................................68
2.2.11 WESTERN
BLOT.....................................................................................
69
2.2.12 IMMUNDETEKTION
...............................................................................
69
2.2.13
IMMUNZYTOCHEMIE...........................................................................70
3
ERGEBNISSE.......................................................................................................72
3.1 EXPRESSION VON OPN AUF M RNA-EBENE
................................................
73
3.1.1 AUSWIRKUNG ZELLULAERER
STRESSFAKTOREN..........................................76
3.1.2 EXPRESSIONSANALYSEN MITTELS REAL-TIME P C R
............................78
3.1.2.1
OPN-GESAMT....................................................................80
3.1.2.2 ISOFORM O PNB
............................................................
82
3.1.2.3 ISOFORM O PN C
............................................................
84
3.1.2.4 ISOFORM OPN V 4
........................................................86
3.2 EXPRESSION VON OPN AUF
PROTEINEBENE..................................................83
3.2.1 PROTEINEXPRESSION VON OPN IM WESTERN
BLOT............................68
3.2.2 PROTEINEXPRESSION VON OPN IN DER IMMUNZYTOCHEMIE
............
90
4 DISKUSSIO
N........................................................................................................
92
4.1 EXPRESSION UND ALTERNATIVES SPLEISSEN VON O P N
...................................
93
4.1.1 IDENTIFIZIERUNG DER OSTEOPONTIN-TRANSKRIPTVARIANTE 4
...............
93
4.2 EXPRESSIONSMUSTER VON OPN UNTER STRESSBEDINGUNGEN
.....................
95
4.2.1 VERAENDERUNGEN AUF M RNA-EBENE
..............................................
95
4.2.2 VERAENDERUNGEN AUF PROTEINEBENE
.............................................
100
4.3 LIMITATIONEN DES
ZELLKULTURMODELLS.........................................................103
5 AUSB LICK
............................................................................................................104
6 ZUSA M M ENFASSU N G
.....................................................................................106
7
LITERATUR.........................................................................................................
107
8
ANHANG...............................................................................................................
116
8.1 NUKLEOTIDSEQUENZEN DER OPN-SPLEISSVARIANTEN
...................................
116
8.2
DANKSAGUNG...............................................................................................120
8.3 EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG..................................................................
121
|
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