"Die Fahrt über den See war prachtvoll.": Paul Klee in Lindau und am Bodensee
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2017
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DIE ZELLULAERE IMMUNITAET 1
1.2 PHYTOCANNABINOIDE 2
1.3 ENDOGENE CANNABINOIDE 3
1.3.1 ANANDAMID 4
1.3.2 2-ARACHIDONYLGLYCERIN 6
1.4 CANNABINOID-REZEPTOREN 8
1.4.1 SIGNALTRANSDUKTION VON CANNABINOIDREZEPTOREN 9
1.5 FUNKTIONEN DER CANNABINOIDE IM IMMUNSYSTEM 10
1.6 ZIEL DER UNTERSUCHUNG UND FRAGESTELLUNGEN 11
2 MATERIAL UND METHODEN 12
2.1 MATERIAL 12
2.2 METHODEN 13
2.2.1 ZELLKULTUR 13
2.2.2 WACHSTUMSASSAYS 13
2.2.3 WACHSTUMSASSAY VON JURKAT-ZELLEN UNTER CANNABINIODEN 13
2.2.4 MTT-TEST ZUR MESSUNG VON LEBENSFAEHIGKEIT UND WACHSTUM
VON JURKAT-ZELLEN UNTER CANNABINOIDEN. 13
2.2.5 JURKAT-ZELLEN IM MTT-TEST UNTER PHA-L +/-LPS 14
2.2.6 MTT-TEST UNTER LPS 14
2.2.7 ARACHLDONSAEUREFREISETZUNG UNTER CANNABINOIDEN 14
2.2.8 EXTRAKTION VON ARACHIDONSAEUREMETABOLITEN DURCH AUSSCHUETTELN
MIT ETHYLACETAT BZW. CHLOROFORM/METHANOL 2:1 15
2.2.9 DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE AUFTRENNUNG 15
2.2.10 BEEINFLUSSUNG DER 2-ARACHIDONYLGLYCERIN-BIIDUNG IN JURKAT-
ZELLEN UNTER CANNABINOIDEN. 15
2.2.11 HPLC-TRENNUNG VON ARACHIDONSAEUREMETABOLITEN 17
2.2.12 BEEINFLUSSUNG DER 2-ARCHIDONYLGLYCERIN-BILDUNG IN JURKAT-
ZELLEN UNTER A23187 UND HU-210 17
2.2.13 BEEINFLUSSUNG DER ARACHIDONSAEURE-METABOLITENBILDUNG IN
JURKATZELLEN UNTER CANNABINOIDEN MITTELS PRAEINKUBATION MIT
LPS + PHA-L 17
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INHALTSVERZEICHNIS
2.2.14 ARCHIDONSAEUREMETABOLITE IN JURKAT-ZELLEN UNTER HU-210 BEI
PRAEINKUBATION MITTELS LPS+PHA-L 18
2.2.15 GC-MS ANALYSE VON 2-BZW. 1-ARACHIDONYLGLYCERIN 18
2.2.16 RT-PCR 21
2.2.17 RT-PCR AM LIGHT CYCLER 22
2.2.18 PHOSPHOLIPASE-A2-AKTIVITAET VON JURKAT-ZELLEN 23
2.2.19 CAMP-BESTIMMUNG IM KONZENTRAT DER JURKAT-ZELLEN UNTER
CANNABINOIDEN 23
2.2.20 GESAMT-CAMP AUS JURKAT-ZELLEN NACH PRAEINKUBATION MIT
LPS+PHA-L UNTER CANNABINOIDEN 24
2.2.21 GESAMT-CAMP VON JURKAT-ZELLEN UNTER HU-210+/-LPS+PHA-
L 24
2.2.22 INTRAZELLULAERES CAMP VON JURKAT-ZELLEN 24
2.2.23 ZELLDIFFERENZIERUNG VON JURKAT-ZELLEN UNTER CANNABINOIDEN 24
2.2.24 IL-2 FREISETZUNG VON JURKAT-ZELLEN UNTER HU-210+/-PHA-L 25
3 ERGEBNISSE 26
3.1 CANNABINOID-REZEPTOREN IN JURKAT-ZELLEN 26
3.1.1 NACHWEIS VON CANNABINOIDREZEPTOR MRNA 26
3.2 CB
2
-REZEPTOR-EXPRESSION UNTER MITOGENER
STIMULATION 28
3.3 ENDOGENE CANNABINOIDSYNTHESE IN JURKAT-ZELLEN 30
3.3.1 RADIOAKTIVE MARKIERUNG DER ARACHIDONSAEUREMETABOLITE 30
3.3.2 EXTRAKTION VON ARACHIDONSAEUREMETABOLITEN 31
3.3.3 NACHWEIS VON ENDOGENEN CANNABINOIDEN DURCH HPLC 33
3.4 IDENTIFIZIERUNG VON 2-ARACHIDONYLGLYCERIN DURCH GC-MS 35
3.5 REGULATION DER 2-AG-SYNTHESE 37
3.5.1 HU-210 37
3.5.2 CP-55,940 38
3.5.3 2-ARACHIDONYLGLYCERIN 39
3.5.4 WIRKUNG VON LPS/PHA-L AUF DIE BASALE UND HU-210-STIMULIERTE
2-AG SYNTHESE 41
3.5.5 EFFEKT DES KALZIUM-IONOPHORS A23187 AUF DIE 2-AG-SYNTHESE 43
3.6 BIOLOGISCHE EFFEKTE VON
CANNABINOIDEN AUF JURKAT-ZELLEN 44
3.6.1 EFFEKT VON CANNABINOIDEN AUF DIE PROIIFERATION VON JURKAT-
ZELLEN 44
INHALTSVERZEICHNIS
3.6.2 HEMMUNG DER FORSKOLINSTIMULIERTEN CAMP-SYNTHESE DURCH
CANNABINOIDREZEPTORAKTIVIERUNG 45
3.6.3 WIRKUNG VON CANNABINOIDEN NACH PRAEINKUBATION MIT LPS UND
PHA-L AUF DIE FORSKOLIN-STIMULIERTE CAMP-SYNTHESE 46
3.6.4 MODULATION DER LNTERLEUKIN-2-FREISETZUNG DURCH CANNABINOIDE 46
3.6.5 CANNABINOID (HU-210) HEMMT DIE DURCH MITOGENE SUBSTANZEN
(PHA-L) INDUZIERTE STIMULATION DER LNTERLEUKIN-2-SYNTHESE 47
3.6.6 ZELLDIFFERENZIERUNG VON JURKAT-T-LYMPHOMZELLEN UNTER
CANNABINOIDEN
48
4 DISKUSSION
50
5 ZUSAMMENFASSUNG
56
6 LITERATURVERZEICHNIS
58
7 LEBENSLAUF
68
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