Untersuchung zur Gewinnung und Kryokonservierung caniner Nebenhodenspermien:
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| Language: | German |
| Published: |
Giessen
VVB Laufersweiler Verlag
2018
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| Edition: | 1. Auflage |
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis IV
Abkürzungsverzeichnis VIII
1 Einleitung 1
2 Literaturübersicht 2
2 1 Gewinnung von Nebenhodenspermien beim Hund 2
211 Aspiration von Nebenhodenspermien in vivo 2
212 Gewinnung von Nebenhodenspermien in vitro 2
2121 Zerkleinerung des Nebenhodens und Ausschwemmung der
Nebenhodenspermien 2
2122 Spülung des Nebenhodenschwanzes und des Ductus deferens 5
2123 Aspiration von Spermien aus dem Nebenhodenschwanz 7
2124 Ausmassieren des Nebenhodens zur Gewinnung von Spermien 7
2 2 Aufbereitung der Nebenhodenspermien 7
2 3 Eigenschaften nativer Nebenhodenspermien 8
2 4 Kryokonservierung von Nebenhodenspermien 22
2 5 Auftauen von Nebenhodenspermien 24
2 6 Charakterisierung von kryokonservierten Nebenhodenspermien 25
2 7 Verwendung von Nebenhodenspermien 35
3 Material und Methoden 36
3 1 Hunde 36
3 2 Nebenhodenspermiengewinnung 37
3 3 Untersuchung der Nebenhodenspermien 39
331 Untersuchung mittels computerassistierter Spermienanalyse
(AndroVision®) 39
332 Untersuchung der Plasmamembranintegrität durch Hypoosmotischen
Schwelltest (HOS-Test) 44
- IV-
333 Untersuchung der Vitalität und Pathomorphologie durch Eosinfärbung 45
3 4 Aufbereitung mit drei verschiedenen Verdünner-Systemen 46
341 Uppsala-Verdünner 46
342 Tris-Verdünner 47
343 Optixcell®-Verdünner 47
3 5 Kryokonservierung und Auftauen 48
3 6 Untersuchung der Tiefgefriernebenhodenspermien 48
3 7 Histologische Aufbereitung und Untersuchung des
Nebenhodenschwanzgewebes 48
371 Fixierung des Probenmaterials 48
372 Einbetten des Probenmaterials 48
373 Herstellung der Gewebeschnitte 49
374 Färbung der Gewebeschnittpräparate 49
375 Mikroskopische Untersuchung des Nebenhodenschwanzgewebes 50
3 8 Statistische Auswertung 54
4 Ergebnisse 55
4 1 Untersuchungsergebnisse der nativ gewonnenen Nebenhodenspermien 55
411 Computerassistierte Spemienanalyse (AndroVision®) 55
412 Hypoosmotischer Schwelltest 56
413 Lebend-Tot-Färbung 56
414 Pathomorphologische Untersuchung 56
4 2 Histologische Untersuchung der Nebenhodenschwanzreste 57
4 3 Untersuchungsergebnisse der Nebenhodenspermien nach dem
Tiefgefrieren 57
431 Protokoll 1:10 Minuten Ausschwemmungszeit 57
4311 Computerassistierte Spermienanalyse (AndroVision®) 57
4312 Hypoosmotischer Schwelltest 65
4313 Lebend-Tot-Färbung 65
-V-
4314 Pathomorphologische Untersuchung 65
432 Protokoll 2: 30 Minuten Ausschwemmungszeit 66
4321 Computerassistierte Spermienanalyse (AndroVision®) 66
4322 Hypoosmotischer Schwelltest 73
4323 Lebend-Tot-Färbung 74
4324 Pathomorphologische Untersuchung 74
4 4 Vergleich der Entnahmeprotokolle nach dem Tiefgefrieren 74
4 5 Statistische Unterschiede zwischen den Verdünnern 75
5 Diskussion 76
5 1 Diskussion der Fragestellung 76
5 2 Diskussion der Methodik 76
521 Auswahl der Probanden 76
522 Gewinnung der Nebenhodenspermien 77
523 Ausschwemmungsmedium 78
524 Spermatologische Untersuchung der Nebenhodenspermien 79
5241 Untersuchung mittels computerassistierter Spemienanalyse (AndroVision®)
79
5242 Untersuchung mittels hypoosmotischem Schwelltest 81
5243 Untersuchung der Vitalität und Pathomorphologie mittels Eosinfärbung 82
525 Aufbereitung mit drei verschiedenen Verdünnern 82
526 Kryokonservierung und Auftauen der Nebenhodenspermien 84
527 Histologische Untersuchung 84
528 Untersuchungszeitpunkte und Lagerungstemperatur der
Tiefgefriernebenhodenspermien 84
5 3 Diskussion der Ergebnisse 85
531 Native Nebenhodenspermien 85
5311 Ergebnisse der Motilitätsparameter und Gesamtnebenhodenspermienzahl
85
-VI -
5312 Ergebnisse der pathomorphologischen Untersuchung 87
5313 Ergebnisse des HOS-Test und der Lebend-/Totfärbung 87
532 Histologische Untersuchung der Nebenhodenschwanzreste 88
533 Kryokonservierte Nebenhodenspermien 88
5331 Ergebnisse der Motilitätsparameter 88
5332 Ergebnisse der pathomorphologischen Untersuchung 90
5333 Ergebnisse des HßS-Test und der Lebend-/Totfärbung 90
5334 Motilitätsveränderungen während Inkubation 91
534 Vergleich der Ausschwemmungszeiten 91
6 Schlussbetrachtung 92
7 Zusammenfassung 93
8 Summary 95
9 Literaturverzeichnis 97
Abbildungsverzeichnis 108
Tabellenverzeichnis 111
Anhang 112
Danksagung 116
|
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