Magnetresonanztomographischer semiquantitativer Nachweis von kontrastmittelmarkierten mesenchymalen Stammzellen in chondralen Defekten am Kniegelenk des Hundes:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2016
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS 1
ABKUERZUNQSVERZEICHNIS
V
ABBILDUNQSVERZEICHNIS
IX
TABELLENVERZEICHNIS
XVI
1 EINLEITUNQ
1
2 LITERATURUEBERSICHT
3
2.1 DIE MAQNETRESONANZTOMOQRAPHIE
3
2.1.1 EINLEITUNQ
3
2.1.2 KLINISCHER EINSATZ
3
2.1.3 PHYSIKALISCHE GRUNDLAGEN
5
2.1.3.1 PROTONEN IM MAGNETFELD
5
2.1.3.2 TI - RELAXATION
8
2.1.3.3 T2 - RELAXATION
10
2.1.3.4 BILDKONTRAST IN DER MRT
11
2.1.3.5 REOETITIONSZEIT (TR)
11
2.1.3.6 ECHOZEIT (TE)
12
2.1.3.7 PROTONENDICHTE GEWICHTETE BILDER
12
2.1.3.8 SAETTIGUNG
13
2.1.3.9 PULSWINKEL UND VORSAETTIGUNG
13
2.1.3.10 ORTSKODIERUNG
14
2.1.3.11 ARTEFAKTE
17
2.1.4 MRT - KONTRASTMITTEL
16
2.1.4.1 KLINISCHER EINSATZ
18
2.1.4.2 MAGNETISCHE SUSZEPTIBILITAET
19
2.1.4.3 EINTEILUNG DER KONTRASTMITTEL
21
2.1.4.4 FERUMOXIDE: ENDOREM
23
2.2 STAMMZELLEN
26
2.2.1 URSPRUNG UND DEFINITION
26
2.2.2 GESCHICHTLICHER RUECKBLICK
28
2.2.3 MESENCHYMALE STAMMZELLEN
26
2.2.4 STAMMZELLTHERAPIE
________________
31
2.2.5 ZELLMARKIERUNG
_____________________________________________
31
2.3 ANATOMISCHE GRUNDLAGEN KNIEGELENK HUND
____________________
34
2.3.1 EINTEILUNG
____________
34
2.3.2 KNIEKEHLGELENK
____________________________________________
34
2.3.2.1 AUFBAU UND FUNKTIONELLE EIGENSCHAFTEN
_____________________
34
2.3.2 2 GELENKKAPSEL_________________________________________ 35
2.3.3 KNIESCHEIBENGELENK
_________________________________________
36
2.3.3.1 AUFBAU UND FUNKTIONELLE EIGENSCHAFTEN
_____________________
36
2.3.3.2 GELENKKAPSEL
__________________________________________
36
2.3.4 BANDVERBINDUNGEN
__________________________________________
36
2.3.4.1 BAENDER DES KNIEKEHLGELENKES
____________________________
36
2.3.4.2 BAENDER DES KNIESCHEIBENGELENKES
________________________
37
2.3.4.3 MENSIKENHALTEBAENDER ___________________________________ 38
2.3.5 SYNOVIA ___________________________________________________ 39
2.3.6 GELENKKNORPEL
_____________________________________________
40
2.3.6.1 BESTANDTEILE UND EIGENSCHAFTEN
__________________________
40
2.3.6.2 KNORPELZONEN
_________________________________________
41
2.3.6.3 CHONDRALE OSSIFIKATION___________________________________ 43
2.3.6.4 KNORPELDEFEKTE
_________________________________________
44
3 MATERIAL UND METHODEN__________________________________________ 51
3.1 MATERIAL _______________________________________________________ 51
3.1.1 PROBENGEWINNUNG FETTGEWEBE _________________________________ 51
3.1.2 MATRIX______________________________________________________ 51
3.2 METHODEN______________________________________________________ 52
3.2.1 ZELLKULTUR
__________________________________________________
52
3.2.1.1 GEWINNUNG ADULTER MESENCHYMALER STAMMZELLEN
(ADMSCS) AUS DEM FETTGEWEBE
___________________________
52
3.2.1.2 KULTIVIERUNG DER ADMSCS _________________________________ 53
3.2.1.3 PASSAGE DER KULTIVIERTEN ADMSCS
__________________________
54
3.2.1.4 KRYOKONSERVIERUNG DER ADMSCS
___________________________
54
3.2.1.5 AUFTAUEN DER ADMSCS____________________________________ 55
3.2.1.6 ENDOREM ZELLMARKIERUNG _________________________________ 55
3.2.1.7 EISENNACHWEIS: BERLINER BLAU FAERBUNG
______________________
56
3.2.1.8 VITALITAETSTESTS __________________________________________ 57
3.2.1.8.1 DIE PHALLOIDIN FLUORESZENZFAERBUNG
_______________________
57
3.2.1.8.2 M IT T EST
___________________________________________
59
3.2.1.8.3 LIFE CELL IMAGING _____________________________________ 60
3.2.1.9 ELEKTRONENMIKROSKOPIE____________________________________ 62
3.2.1.10 UEBERSICHT VERLAUFSPLAN ZELLKULTUR
__________________________
64
3.2.2 MRT MESSUNG (KADAVERSTUDIE)_________________________________ 66
3.2.2.1 KNORPELDEFEKT
___________________________________________
66
3.2.2.2 HERSTELLUNG DES ZELLHALTIGEN KOLLAGENGELS
_____________________
67
3.2.2.3 IMPLANTATION DES ZELL - GELGEMISCHES
________________________
69
3.2.2.4 WUNDVERSCHLUSS
_________________________________________
69
3.2.2.5 MAGNETRESONANZTOMOGRAPHISCHE MESSUNG
____________________
69
3.2.3 ERGAENZENDE UNTERSUCHUNGEN___________________________________ 73
3.2.3.1 ZELLAUSWANDERUNG AUS DEM GELPELLET IM LIFE CELL IMAGING
_______
73
3.2.3.2 ZYTOTOXIZITAETSTEST IM LIFE CELL IMAGING (20GNL)________________
75
3.2.3.3 MTT VERGLEICHSTEST
_______________________________________
76
3.2.4 STATISTISCHE PLANUNG UND AUSWERTUNG
___________________________
77
3.2.4.1 MTT TEST ________________________________________________ 77
3.2.4.2 LIFE CELL IMAGING
__________________________________________
78
3.2.4.3 MRT ____________________________________________________ 79
3.2.4.4 MTT VERGLEICHSTEST
________________________________________
80
4 ERGEBNISSE
_
,
__________________________________________________
81
4.1 EISENNACHWEIS: BERLINER BLAU FAERBUNG
___________________________
81
4.2 VITALITAETSTESTS___________________________________________________
83
4.2.1 PHALLOIDIN FLUORESZENZFAERBUNG _________________________________ 83
4.2.2 MTT T EST___________________________________________________ 66
4.2.3 LIFE CELL IMAGING
_
____________________________________________ 93
4.3 ELEKTRONENMIKROSKOPIE
_________________________________________
100
4.4 MRT MESSUNG _________________________________________________ 105
4.4.1 DEFEKTLOKALISATION, DEFEKTGROESSE_________________________________
105
4.4.2 OBJEKTIVE AUSWERTUNG
________________________________________
107
4.4.3 SUBJEKTIVE AUSWERTUNG ________________________________________ 109
4.5 ERGAENZENDE UNTERSUCHUNGEN____________________________________ 111
4.5.1 KOMPATIBILITAET ZELLEN / MATRIX
_________________________________
111
4.5.1.1 ZELLAUSWANDERUNG AUS GELPELLET IM LIFE CELL IMAGING
__________
111
4.5.1.2 ZYTOTOXIZITAETSTEST IM LIFE CELL IMAGING (20GNL)_______________
122
4.5.1.3 MTT VERGLEICHSTEST
_______________________________________
123
5 DISKUSSION______________________________________________________ 132
5.1 ALLGEMEINES ___________________________________________________ 132
5.2 METHODIK DER UNTERSUCHUNG_____________________________________ 132
5.2.1 STUDIENDESIGN
______________________________________________
132
5.2.2 DISKUSSION DER ERGEBNISSE____________________________________ 133
5.2.2.1 EISENNACHWEIS: BERLINER BLAU FAERBUNG
______________________
133
5.2.2.2 VITALITAETSTESTS
___________________________________________
134
5.2.2.3 ELEKTRONENMIKROSKOPIE
___________________________________
141
5.2.2.4 MRT MESSUNG
______________________________
142
5.2.2.5 ERGAENZENDE UNTERSUCHUNGEN_______________________________ 148
6 ZUSAMMENFASSUNG
______________________________________________
152
7 SUMMARY_______________________________________________________ 154
8 LITERATURVERZEICHNIS
_
____________________________________________
156
9 ANHANG
__________________
171
9.1 TABELLEN ZU MATERIAL UND METHODEN _____________________________171
9.1.1 VERWENDETE STOFFE
________
171
9.1.2 VERWENDETE MATERIALIEN
_____________
172
9.1.3 VERWENDETE GERAETE
______________
174
9.1.4 VERWENDETE SOFTWARE PRODUKTE
_________
175
9.2 TABELLEN ZU DEN ERGEBNISSEN
____________
_
_______________________ 176
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