Untersuchungen zum Nachweis von Alternariol in Futtermitteln und in Milch:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2017
|
| Schriftenreihe: | Edition Scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 135 Seiten 21 cm x 14.6 cm, 198 g |
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG UND
FRAGESTELLUNG.....................................................................................
1
2
SCHRIFTTUM.....................................................................................................................
2
2.1 ALLGEMEINES ZUR GATTUNG
ALTEMARIA...............................................................................2
2.2 VORKOMMEN VON
ALTERNARIA-SPQZIQS
............................................................................
4
2.2.1 ALTEMARIEN ALS
ENDOPHYTEN...........................................................................................9
2.3 CHARAKTERISIERUNG VON
ALTEMARIOL................................................................................
12
2.3.1
ALLGEMEINES..................................................................................................................
12
2.3.2 ALTEMARIOL BILDENDE
SCHIMMELPILZE............................................................................14
2.3.3 PHYSIKALISCH - CHEMISCHE EIGENSCHAFTEN VON AO H
...................................................
15
2.3.4 BIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN..........................................................................................
16
2.3.4.1 TOXIZITAET VON
AOH........................................................................................................16
2.3.4.2 BIOLOGISCHE WIRKUNGEN ENDOPHYTISCH PRODUZIERTEN AOHS
.......................................
19
2.3.5 RISIKOBEWERTUNG UND ERMITTLUNG VON
EXPOSITIONSWERTEN..........................................19
2.3.6 BILDUNG UND METABOLISMUS VON
ALTEMARIOL...............................................................20
2.3.6.1 BIOSYNTHESE VON
ALTEMARIOL.........................................................................................20
2.3.6.2 BEEINFLUSSUNG DER
TOXINSYNTHESE................................................................................
22
2.3.7 VORKOMMEN VON ALTEMARIOL IN LEBENS- UND FUTTERMITTELN
.......................................
22
2.3.8 METABOLISMUS UND CARRY OVER VON AOH IN LEBENSMITTEL TIERISCHEN
URSPRUNGS
....
29
2.4 NACHWEISVERFAHREN VON ALTEMARIOL
...........................................................................
30
2.4.1 PHYSIKALISCH-CHEMISCHE
VERFAHREN.............................................................................
30
2.4.2 IMMUNOLOGISCHE
VERFAHREN.........................................................................................31
2.5 ALTEMARIOL IN GAERFTITTERMITTELN
...................................................................................
32
3 MATERIAL UND
METHODIK............................................................................................34
3.1 MATERIALIEN UND GERAETE
................................................................................................
34
3.1.1 CHEMIKALIEN UND
BIOCHEMIKA.....................................................................................34
3.1.2
MYKOTOXINE..................................................................................................................
35
3.1.3
IMMUNREAGENZIEN........................................................................................................
35
3.1.4 PUFFER UND
LOESUNGEN...................................................................................................
35
3.1.5 GERAETE UND
HILFSMITTEL.................................................................................................36
3.1.6
ENZYMIMMUNTESTS.......................................................................................................
37
3.1.7 PROBENMATERIAL UND AUSWAHL DER
BETRIEBE...................................................................
37
3.2 METHODIK ZUM NACHWEIS VON ALTEMARIOL IN FUTTERMITTELN UND IN MILCH
...................
40
3.2.1 PROBENVORBEREITUNG UND PROBENEXTRAKTION VON FUTTERMITTELN
...................................
40
3.2.1.1 GRASSILAGE UND
GRAS.......................................................................................................
40
3.2.1.2 MAISSILAGE UND
ZUCKERRUEBEN.......................................................................................
40
3.2.2 PROBENVORBEREITUNG UND PROBENEXTRAKTION VON M
ILCH...............................................41
3.2.3 UEBERPRUEFUNG DER WIEDERFMDUNG
..................................................................................
41
3.2.4 ANWENDUNG DER INDIREKTEN KOMPETITIVEN ENZYMIMMUNTESTS
...................................
42
3.2.4.1 DURCHFUEHRUNG DES INDIREKTEN KOMPETITIVEN EIA MIT PAK-AOH
(PAK-EIA).............43
3.2.4.2 DURCHFUEHRUNG DES INDIREKTEN KOMPETITIVEN EIA MIT MAK-AOH
(MAK-EIA)
..........
44
3.2.4.3
AUSWERTUNGSKRITERIEN...................................................................................................46
3.3 ORIENTIERENDE VERGLEICHSUNTERSUCHUNGEN ZUR ABSICHERUNG DER
IMMUNOCHEMISCHEN
BEFUNDE ZU ALTEMARIOL IN GRAS- UND
MAISSILAGEEXTRAKTEN........................................46
3.3.1 UNTERSUCHUNG MITTELS HPLC UND
LC/MS/MS............................................................ 46
3.3.2 NACHWEIS VON TENUAZONSAEURE MITTELS EIA
.................................................................
47
3.3.2.1 PROBENVORBEREITUNG UND EXTRAKTIONSVERFAHREN ZUM NACHWEIS VON TEA
IN
FUTTERMITTELN.................................................................................................................
47
3.3.2.2 DURCHFUEHRUNG DES EIA ZUM NACHWEIS VON TEA
.........................................................
48
4
ERGEBNISSE.....................................................................................................................
50
4.1 NACHWEIS VON ALTEMARIOL IN
FUTTERMITTELN...................................................................50
4.1.1 AUSWERTUNG DER STANDARDKURVEN DER KOMPETITIVEN INDIREKTEN EIAS ZUM
NACHWEIS
VON
ALTEMARIOL..............................................................................................................
50
4.1.1.1 ENZYMIMMUNTEST AUF BASIS POLYKLONALER ANTIKOERPER (PAK-EIA)
..............................
50
4.1.1.2 ENZYMIMMUNTEST AUF BASIS MONOKLONALER ANTIKOERPER (MAK-EIA)
...........................
52
4.1.2
WIEDERFINDUNGSRATEN.....................................................................................................
54
4.1.3 AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE DER KOMPETITIVEN INDIREKTEN EIAS ZUM
NACHWEIS VON
ALTEMARIOL IN GRAS-, MAISSILAGE, FRISCHEN GRAS- UND
ZUCKERRUEBENPROBEN..............56
4.1.4 ABSCHAETZUNG DER TAEGLICHEN TOXINAUFNAHME EINER MILCHKUH
.....................................
60
4.2 NACHWEIS VON ALTEMARIOL IN M
ILCH..............................................................................
61
4.2.1 AUSWERTUNG DER STANDARDKURVEN DER KOMPETITIVEN INDIREKTEN EIAS ZUM
NACHWEIS
VON
ALTEMARIOL..............................................................................................................
61
4.2.1.1 ENZYMIMMUNTEST AUF BASIS POLYKLONALER ANTIKOERPER (PAK-EIA)
..............................
61
4.2.1.2 ENZYMIMMUNTEST AUF BASIS MONOKLONALER ANTIKOERPER (MAK-EIA)
...........................
63
4.2.2
WIEDERFINDUNGSRATEN...................................................................................................
65
4.2.3 AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE DER KOMPETITIVEN INDIREKTEN EIAS ZUM
NACHWEIS VON
ALTEMARIOL IN
MILCH....................................................................................................
66
4.3 ORIENTIERENDE UNTERSUCHUNGEN ZUR ABSICHERUNG DER IMMUNOCHEMISCHEN
BEFUNDE
ZU
ALTEMARIOL................................................................................................................67
4.3.1 HPLC-ANALYSE ZUM NACHWEIS VON
ALTEMARIOL.........................................................67
4.3.2 LC-MS/MS ANALYSE ZUM NACHWEIS VON ALTEMARIOL
................................................
68
4.3.3 NACHWEIS VON TENUAZONSAEURE IN
GRASSILAGE..............................................................
68
4.3.3.1 AUSWERTUNG DER STANDARDKURVEN DES TENUAZONSAEURE E IA
S........................................68
4.3.3.2
WIEDERFINDUNGSRATEN.....................................................................................................70
4.3.3.3 AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE DES TEA-ELAS AUS GRAS- UND
MAISSILAGEPROBEN...........70
4.3.4 VERGLEICHENDE DARSTELLUNG DER ERMITTELTEN UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE
.......................
72
5
DISKUSSION...................................................................................................................
73
5.1 NACHWEIS VON ALTEMARIOL IN FUTTERMITTELN
..................................................................
74
5.1.1 ANWENDBARKEIT DER EINGESETZTEN ENZYMIMMUNTESTVERFAHREN
...................................
74
5.1.2 VORKOMMEN VON ALTEMARIOL IN GRASSILAGE UND MAISSILAGE
......................................
75
5.1.3 VERGLEICH DER MITTELS PAK- UND MAK-EIA ERMITTELTEN
ALTEMARIOLKONZENTRATIONEN 77
5.2 UNTERSUCHUNGEN ZUM VORKOMMEN VON ALTEMARIOL IN TANKMILCH
.............................
78
5.2.1 ANWENDBARKEIT DES
ENZYMIMMUNTESTS........................................................................78
5.2.2 VORKOMMEN VON ALTEMARIOL IN
TANKMILCH................................................................
78
5.3 RISIKOABSCHAETZUNG EINER MILCHKUH NACH AUFNAHME ALTEMARIOL BELASTETER
FUTTERMITTEL...................................................................................................................79
5.4 ERGEBNISSE DER ORIENTIERENDEN
VERGLEICHSUNTERSUCHUNGEN..........................................80
5.4.1 METHODENVERGLEICH ZWISCHEN AOH-EIA, HPLC UND LC-MS
...................................
80
5.4.2 NACHWEIS VON TEA IN GRAS- UND
MAISSILAGEPROBEN....................................................81
5.5
SCHLUSSFOLGERUNGEN......................................................................................................
81
6
ZUSAMMENFASSUNG.....................................................................................................
82
7
SUMMARY.....................................................................................................................84
8
LITERATURVERZEICHNIS.................................................................................................
86
8.1 ZITIERTE
RECHTSVORSCHRIFTEN.........................................................................................
107
9
ANHANG.......................................................................................................................
108
10
DANKSAGUNG...............................................................................................................114
11
ERKLAERUNG...................................................................................................................115
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