Holdings: Der "Bile-Acid Sensitive Ion Channel" wird über einen membranvermittelten Mechanismus aktiviert

Der "Bile-Acid Sensitive Ion Channel" wird über einen membranvermittelten Mechanismus aktiviert:

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Main Author:	Schmidt, Axel (Author)
Format:	Thesis Book
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Published:	Aachen [2016]
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG 1 1.1 DIE ENTDECKUNGSGESCHICHTE DER DEGENERIN / EPITHELIALER NATRIUMKANAL LONEN- KANALSUPERFAMILIE............................................................................................ 1 1.2 EPITHELIALER NATRIUMKANAL (E N A C ) ................................................................ 3 1.2.1 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON E N A C ............................. 3 1.2.2 DIE PHYSIOLOGISCHEN FUNKTIONEN VON E N A C .................................... 3 1.3 ACID-SENSING ION CHANNELS (A S IC S )............................................................ 4 1.3.1 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON A S IC LA ........................... 4 1.3.2 DIE KRISTALLSTRUKTUR VON ASIC1 UND DIE AKTIVIERUNG DURCH PROTONEN 5 1.3.3 PHYSIOLOGISCHE FUNKTIONEN VON A S IC S ............................................ 6 1.4 BILE-ACID SENSITIVE ION CHANNEL (B A S IC ) ................................................... 7 1.4.1 KLONIERUNG UND HOMOLOGIE ............................................................... 7 1.4.2 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISTIKA DER ORTHOLOGE ................... 7 1.4.3 GALLENSALZE AKTIVIEREN BASIC VON RATTE UND M ENSCH ................... 8 1.5 MOEGLICHE WIRKMECHANISMEN VON GALLENSALZEN AUF R B A S IC ...................... 9 1.5.1 DIREKTE LIGANDEN-REZEPTOR-INTERAKTION ......................................... 9 1.5.2 INDIREKTE INTERAKTION UEBER AENDERUNGEN VON MEMBRANEIGENSCHAFTEN 11 2 ZIELSETZUNG 12 3 MATERIAL UND METHODEN 13 3.1 M ATERIALIEN.......................................................................................................... 13 3.1.1 EINZELMATERIALIEN............................................................................... 13 3.1.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE K I T S ............................................................... 13 3.1.3 ENZYME................................................................................................... 14 3.1.4 VEKTOR UND BAKTERIEN ZUR TRANSFORM ATION .......................................... 14 3.1.5 LOESUNGEN FUER MOLEKULARBIOLOGISCHE M ETHODEN .................................... 15 3.1.6 P RIM E R................................................................................................ 15 3.1.7 INKUBATIONSMEDIEN FUER O O Z Y TE N ...................................................... 16 3.1.8 LOESUNGEN FUER ELEKTROPHYSIOLOGISCHE M ESSUNGEN............................. 16 3.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE M E TH O D E N ................................................................... 17 3.2.1 OVERLAP EXTENSION POLYMERASE CHAIN REACTION (OE-PCR) .... 18 3.2.2 AGAROSE GELELEKTROPHORESE....................................................................21 3.2.3 AUFREINIGUNG VON D N A .......................................................................... 22 3.2.4 RESTRIKTIONSVERDAU.................................................................................22 3.2.5 K LONIERUNG............................................................................................. 22 3.2.6 TRANSFORMATION, BAKTERIENANZUCHT UND PLASMIDPRAEPARATION .... 23 3.2.7 DNA SEQUENZIERUNG............................................................................. 24 3.2.8 MRNA-SYNTHESE UND AUFREINIGUNG....................................................... 24 3.3 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE M ETHODEN.......................................................................25 3.3.1 PRAEPARATION DER OOZYTEN.......................................................................25 3.3.2 INJEKTION DER MRNA IN O OZYTEN .......................................................... 25 3.3.3 AUFBEWAHRUNG UND INKUBATION DER O OZYTEN ....................................... 25 3.3.4 ZWEI-ELEKTRODEN-SPANNUNGSKLEMME....................................................26 3.3.5 DATENANALYSE.......................................................................................... 26 4 ERGEBNISSE 28 4.1 PHARMAKOLOGISCHE MODIFIKATION VON MEMBRANEIGENSCHAFTEN ......................... 28 4.1.1 TRINITROPHENOL, CHLORPROMAZIN UND GADOLINIUMIONEN MODULIEREN DIE RBASIC A K TIV ITAE T ............................................................................. 28 4.1.2 STRUKTURELL NICHT VERWANDTE DETERGENZIEN AKTIVIEREN RBASIC AEHN LICH WIE U D C A .......................................................................................34 4.1.3 AMPHIPHILE SUBSTANZEN UND UDCA KOMPETIEREN UM EINEN WIRKORT 37 4.2 CHIMAEREN ZWISCHEN RASICLA UND RBASIC LIEFERN INFORMATIONEN UEBER DIE WIRKUNG VON GALLENSALZEN AN RB A S IC ............................................................. 39 4.2.1 UEBERBLICK UEBER DIE ERZEUGTEN C HIM AEREN ............................................. 39 4.2.2 AUSTAUSCHE IN DER EXTRAZELLULAEREN S CHLEIFE .......................................... 39 4.2.3 AUSTAUSCH DER TRANSMEMBRANDOMAENEN ............................................. 43 4.3 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE....................................................................46 5 DISKUSSION 48 5.1 INTERPRETATION DER ERGEBNISSE.............................................................................48 5.1.1 GALLENSALZE REGULIEREN RBASIC MEMBRANVERMITTELT ............................. 48 5.1.2 WELCHE MEMBRANEIGENSCHAFT REGISTRIERT RB A S IC ? ............................. 49 5.1.3 WAS MACHT RBASIC, IM GEGENSATZ ZU RASICLA, GALLENSALZSENSITIV? 53 5.2 BEDEUTUNG DER ERGEBNISSE UND A USBLICK..........................................................55 6 ZUSAMMENFASSUNG 56 LITERATURVERZEICHNIS 57 AUFLISTUNG EIGENER PUBLIKATIONEN 73 DANKSAGUNG 74 ERKLAERUNG § 5 ABS. 1 ZUR DATENAUFBEWAHRUNG 75 ERKLAERUNGEN UEBER DEN EIGENANTEIL 76
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