Der "Bile-Acid Sensitive Ion Channel" wird über einen membranvermittelten Mechanismus aktiviert:
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Veröffentlicht: |
Aachen
[2016]
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DIE ENTDECKUNGSGESCHICHTE DER DEGENERIN / EPITHELIALER NATRIUMKANAL
LONEN-
KANALSUPERFAMILIE............................................................................................
1
1.2 EPITHELIALER NATRIUMKANAL (E N A C )
................................................................
3
1.2.1 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON E N A C
.............................
3
1.2.2 DIE PHYSIOLOGISCHEN FUNKTIONEN VON E N A C
.................................... 3
1.3 ACID-SENSING ION CHANNELS (A S IC S
)............................................................ 4
1.3.1 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON A S IC LA
...........................
4
1.3.2 DIE KRISTALLSTRUKTUR VON ASIC1 UND DIE AKTIVIERUNG DURCH PROTONEN
5
1.3.3 PHYSIOLOGISCHE FUNKTIONEN VON A S IC S
............................................
6
1.4 BILE-ACID SENSITIVE ION CHANNEL (B A S IC )
................................................... 7
1.4.1 KLONIERUNG UND HOMOLOGIE
...............................................................
7
1.4.2 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISTIKA DER ORTHOLOGE
...................
7
1.4.3 GALLENSALZE AKTIVIEREN BASIC VON RATTE UND M ENSCH
...................
8
1.5 MOEGLICHE WIRKMECHANISMEN VON GALLENSALZEN AUF R B A S IC
......................
9
1.5.1 DIREKTE LIGANDEN-REZEPTOR-INTERAKTION
.........................................
9
1.5.2 INDIREKTE INTERAKTION UEBER AENDERUNGEN VON MEMBRANEIGENSCHAFTEN 11
2 ZIELSETZUNG 12
3 MATERIAL UND METHODEN 13
3.1 M
ATERIALIEN..........................................................................................................
13
3.1.1
EINZELMATERIALIEN...............................................................................
13
3.1.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE K I T S
...............................................................
13
3.1.3
ENZYME...................................................................................................
14
3.1.4 VEKTOR UND BAKTERIEN ZUR TRANSFORM ATION
..........................................
14
3.1.5 LOESUNGEN FUER MOLEKULARBIOLOGISCHE M ETHODEN
....................................
15
3.1.6 P RIM E
R................................................................................................
15
3.1.7 INKUBATIONSMEDIEN FUER O O Z Y TE N
......................................................
16
3.1.8 LOESUNGEN FUER ELEKTROPHYSIOLOGISCHE M
ESSUNGEN............................. 16
3.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE M E TH O D E N
................................................................... 17
3.2.1 OVERLAP EXTENSION POLYMERASE CHAIN REACTION (OE-PCR) .... 18
3.2.2 AGAROSE
GELELEKTROPHORESE....................................................................21
3.2.3 AUFREINIGUNG VON D N A
..........................................................................
22
3.2.4
RESTRIKTIONSVERDAU.................................................................................22
3.2.5 K
LONIERUNG.............................................................................................
22
3.2.6 TRANSFORMATION, BAKTERIENANZUCHT UND PLASMIDPRAEPARATION .... 23
3.2.7 DNA
SEQUENZIERUNG.............................................................................
24
3.2.8 MRNA-SYNTHESE UND
AUFREINIGUNG....................................................... 24
3.3 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE M
ETHODEN.......................................................................25
3.3.1 PRAEPARATION DER
OOZYTEN.......................................................................25
3.3.2 INJEKTION DER MRNA IN O OZYTEN
..........................................................
25
3.3.3 AUFBEWAHRUNG UND INKUBATION DER O OZYTEN
.......................................
25
3.3.4
ZWEI-ELEKTRODEN-SPANNUNGSKLEMME....................................................26
3.3.5
DATENANALYSE..........................................................................................
26
4 ERGEBNISSE 28
4.1 PHARMAKOLOGISCHE MODIFIKATION VON MEMBRANEIGENSCHAFTEN
.........................
28
4.1.1 TRINITROPHENOL, CHLORPROMAZIN UND GADOLINIUMIONEN MODULIEREN
DIE RBASIC A K TIV ITAE T
.............................................................................
28
4.1.2 STRUKTURELL NICHT VERWANDTE DETERGENZIEN AKTIVIEREN RBASIC AEHN
LICH WIE U D C A
.......................................................................................34
4.1.3 AMPHIPHILE SUBSTANZEN UND UDCA KOMPETIEREN UM EINEN WIRKORT 37
4.2 CHIMAEREN ZWISCHEN RASICLA UND RBASIC LIEFERN INFORMATIONEN UEBER DIE
WIRKUNG VON GALLENSALZEN AN RB A S IC
.............................................................
39
4.2.1 UEBERBLICK UEBER DIE ERZEUGTEN C HIM AEREN
.............................................
39
4.2.2 AUSTAUSCHE IN DER EXTRAZELLULAEREN S CHLEIFE
..........................................
39
4.2.3 AUSTAUSCH DER TRANSMEMBRANDOMAENEN
.............................................
43
4.3 ZUSAMMENFASSUNG DER
ERGEBNISSE....................................................................46
5 DISKUSSION 48
5.1 INTERPRETATION DER
ERGEBNISSE.............................................................................48
5.1.1 GALLENSALZE REGULIEREN RBASIC MEMBRANVERMITTELT
.............................
48
5.1.2 WELCHE MEMBRANEIGENSCHAFT REGISTRIERT RB A S IC ?
.............................
49
5.1.3 WAS MACHT RBASIC, IM GEGENSATZ ZU RASICLA, GALLENSALZSENSITIV? 53
5.2 BEDEUTUNG DER ERGEBNISSE UND A
USBLICK..........................................................55
6 ZUSAMMENFASSUNG 56
LITERATURVERZEICHNIS 57
AUFLISTUNG EIGENER PUBLIKATIONEN 73
DANKSAGUNG 74
ERKLAERUNG § 5 ABS. 1 ZUR DATENAUFBEWAHRUNG 75
ERKLAERUNGEN UEBER DEN EIGENANTEIL 76
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