Einfluss der β4 Untereinheit auf Toxikologie und Schalteigenschaften von spannungsgesteuerten Natriumkanälen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Erlangen ; Nürnberg
2017
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| Beschreibung: | viii, 169 Seiten Illustrationen, Diagramme |
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Datensatz im Suchindex
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN....................................................................................................................................VI
ZUSAMMENFASSUNG...........................................................................................................................
1
1.
EINLEITUNG...................................................................................................................................3
1.1. AUFBAU UND GRUNDFUNKTIONEN DER NATRIUMKANAELE
........................................................
4
1.2. AKTIVIERUNG, SCHNELLE UND LANGSAME INAKTIVIERUNG UND RESURGENT
STROEME
................
6
1.3. BEDEUTUNG VON RESURGENT STROEMEN UND LANGSAMER INAKTIVIERUNG BEI
ERBLICHEN
SCHMERZSYNDROMEN..........................................................................................
9
1.3.1. ERBLICHE ERYTHROMELALGIE (IEM) UND
PEPD.................................................................10
1.3.2. RESURGENT STROEME UND LANGSAME INAKTIVIERUNG BEI IEM UND PEPD
......................
11
1.4. TOXINBINDUNGSSTELLEN, PROTX-LL, OXALIPLATIN UND DIE ROLLE VON SS 4
..............................12
1.4.1. TOXINBINDUNGSSTELLEN AN
NAVS....................................................................................12
1.4.2. PROTOXIN-LL
(PROTX-LL)...................................................................................................
14
1.4.3. NAV UNTEREINHEIT SS 4
....................................................................................................
18
1.4.4.
OXALIPLATIN....................................................................................................................
20
2. MATERIALIEN UND
METHODEN..................................................................................................21
2.1.
ZELLKULTUR.........................................................................................................................21
2.1.1.
ZELLLINIEN........................................................................................................................21
2.1.2 PRIMAERKULTUREN AUS HINTERWURZELGANGLIEN-NEURONEN (DRG)
................................
22
2.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN.................................................................................22
2.2.1 STABILE
ZELLLINIEN...........................................................................................................22
2.2.2
TRANSFEKTION.................................................................................................................
23
2.2.3
WESTERNBLOT.................................................................................................................
24
2.3. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
MESSMETHODEN.......................................................................
25
2.3.1. WHOLE-CELL PATCH-CLAMP
.............................................................................................
25
2.3.1.1. WHOLE-CELL PATCH-CLAMP: HINFUEHRUNG
..................................................................
25
2.3.1.2. WHOLE-CELL PATCH-CLAMP: GERAETE, MATERIALIEN UND CHEMIKALIEN
2.3.1.3. WHOLE-CELL PATCH-CLAMP MESSUNGEN: DURCHFUEHRUNG
.....................................
27
2.3.2. ALLGEMEINE
PATCHPROTOKOLLE........................................................................................29
2.3.3. MATHEMATISCHE DATENANALYSE UND STATISTISCHE AUSWERTUNG
................................
34
2.3.3.1. MATHEMATISCHE
DATENANALYSE...............................................................................34
2.3.3.2. STATISTISCHE
AUSWERTUNG.........................................................................................38
2.3.4.
PERFUSIONSSYSTEM.........................................................................................................
38
2.4.
TIERVERSUCHE.....................................................................................................................39
3.
ERGEBNISSE................................................................................................................................40
3.1. SS4 REGULATION DER LANGSAMEN INAKTIVIERUNG VON NAV1.7
...........................................
40
3.2. EFFEKT VON OXALIPLATIN AUF RESURGENT STROEME IN MAUS DRGS
......................................
49
3.2.1. SCHMERZVERAENDERUNG BEI MAEUSEN NACH INJEKTION VON OXALIPLATIN
......................
49
3.2.2. RESURGENT STROEME IN MAUS DRGS NACH INJEKTION VON OXALIPLATIN
........................
50
3.3. SS4 MODIFIZIERT DIE BINDUNG VON PROTX-LL AN NATRIUMKANAELEN
....................................
53
3.3.1. SS4 REDUZIERT DEN PROTX-LL EFFEKT AUF DIE LEITFAEHIGKEITSDICHTE VON
NAV1.7
...........
53
3.3.2. SS4 BEEINFLUSST DIE BINDUNG VON PROTX-LL AN NAV1.2
.................................................
60
3.3.3. SS4 BEEINFLUSST DIE BINDUNG VON PROTX-LL AN MUTANTE NAV1.7/F813G
....................
65
3.3.4. SS4 KANN DEN PROTX-LL EFFEKT AUF NAV1.5 NICHT BEEINFLUSSEN
....................................
73
3.3.5. SS4 BEEINFLUSST TEILWEISE DIE BINDUNG VON PROTX-LL AN NAV1.2/C910A
UND
NAV1.2/C912A................................................................................................................78
3.4. RESURGENT STROEME KOENNEN DURCH LANGSAME INAKTIVIERUNG REDUZIERT
WERDEN
..........
84
3.4.1. NAV1.7/AL955 VERSTAERKT DIE LANGSAME INAKTIVIERUNG UND ZEIGT KEINE
RESURGENT
STROEME.........................................................................................................
85
3.4.2. NAV1.7/V948C SCHWAECHT DIE LANGSAME INAKTIVIERUNG UND VERSTAERKT
RESURGENT
STROEME.........................................................................................................90
3.4.3. LCM VERSTAERKT DIE LANGSAME INAKTIVIERUNG VON NAV1.7 UND REDUZIERT
RESURGENT
STROEME.........................................................................................................92
4.
DISKUSSION...............................................................................................................................
..
4.1. RELEVANZ VON ZEITEFFEKTEN BEIM PATCH-CLAMP
.............................................................
95
4.2. OXALIPLATIN VERRINGERT DIE VON-FREY-SCHWELLE BEI MAEUSEN
........................................
98
4.3. BINDUNG VON PROTX-LL AN NAVS UND BEEINFLUSSBARKEIT DURCH SS 4
...............................100
4.3.1. EINFLUSS DER MUTATIONEN UND DER SS4 KOEXPRESSION AUF DIE
VERWENDETEN
NAVS...............................................................................................................................100
4.3.1.1. EINFLUSS DER DURCHGEFUEHRTEN MUTATIONEN AUF DIE VERWENDETEN NAVS
.........
100
4.3.1.2. EINFLUSS DER SS4 KOEXPRESSION AUF DIE VERWENDETEN NAVS
.............................
103
4.3.2. BINDUNGSAFFINITAET UND BINDUNGSSTELLEN VON PROTX-LL BEI
NAVS.............................106
4.3.3. BEEINFLUSSBARKEIT DER PROTX-LL BINDUNG DURCH SS 4
................................................
112
4.4. RESURGENT STROEME KOENNEN DURCH LANGSAME INAKTIVIERUNG REDUZIERT
WERDEN
.......
119
5.
REFERENZEN............................................................................................................................
125
6.
ANHANG...................................................................................................................................134
6.1. UEBERSICHT ALLER PARAMETER DER BESCHRIEBENEN EXPERIMENTE
....................................
134
6.1.1. SCHALTEIGENSCHAFTEN VON NAVL.7 UND NAVL.7 + SS4
................................................
134
6.1.2. IP OXALIPLATIN: VON-FREY TEST UND RESURGENT STROEME IN MURINEN
DRGS
............
136
6.1.3. PROTX-LL EFFEKTE AN NATRIUMKANAELEN UND DEREN BEEINFLUSSBARKEIT
DURCH SS4.... 137
6.1.3.1. PROTX-LL EFFEKTE AN NAVL.7 UND NAVL.7 + SS4
......................................................
137
6.1.3.2. PROTX-LL EFFEKTE AN NAV1.2 UND NAV1.2 + SS4
......................................................
141
6.1.3.3. PROTX-LL EFFEKTE AN NAV1.7/F813G UND NAV1.7/F813G +
SS4.............................144
6.1.3.4. PROTX-LL EFFEKTE AN NAV1.5 UND NAV1.5 + SS4
......................................................
148
6.1.3.5. PROTX-LL EFFEKTE AN DEN MUTANTEN NAV1.2/C910A, C912A UND
SS4-EINFLUSS.. 152
6.1.4. SCHALTEIGENSCHAFTEN VON NAVL.7, NAV1.7/AL955 UND
NAV1.7/V948C..................155
6.1.5. EINFLUSS VON LCM AUF DIE SCHALTEIGENSCHAFTEN VON NAVL.7
..................................
159
6.2. IGOR
PROCEDURES...............................................................................................................
160
6.2.1. ANALYSE DER
AKTIVIERUNG............................................................................................160
6.2.2. NAEHERUNG DES INAKTIVIERUNGSVERLAUFES (DECAYFIT)
................................................
165
DANKSAGUNG...............................................................................................................................
169
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