Antiinflammatorische Effekte von Capsaicin in murinen Mikrogliazellen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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Freiburg im Breisgau
[2017]
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| adam_text | AUS DEM ZENTRUM FUER PSYCHISCHE ERKRANKUNGEN
KLINIK FUER PSYCHIATRIE UND PSYCHOTHERAPIE
DES UNIVERSITAETSKLINIKUMS FREIBURG I. BR.
ANTIINFLAMMATORISCHE EFFEKTE VON CAPSAICIN
IN MURINEN MIKROGLIAZELLEN
INAUGURAL-DISSERTATION
ZUR
ERLANGUNG DES MEDIZINISCHEN DOKTORGRADES
DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET
DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET
FREIBURG IM BREISGAU
VORGELEGT 2015
VON NORA ROELOFS
GEBOREN IN SAARBRUECKEN
INHALTSVERZEICHNIS
I.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS....................................................................................................................
V
II. T
ABELLENVERZEICHNIS.......................................................................................................................
VI
III.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS................................................................................................................VII
1.
EINLEITUNG..............................................................................................................................................
1
1.1 NEUROINFLAMMATORISCHE
ERKRANKUNGEN.....................................................................................1
1.2 MIKROGLIA UND IHRE BEDEUTUNG FUER DIE ENTSTEHUNG
NEUROINFLAMMATORISCHER
ERKRANKUNGEN..........................................................................................................................................3
1.2.1 VORKOMMEN UND FUNKTION VON M
IKROGLIA....................................................................
3
1.2.2 AKTIVIERUNG VON
MIKROGLIA.................................................................................................3
1.2.3 KLINISCHE RELEVANZ VON
MIKROGLIA...................................................................................
5
1.3 DIE ARACHIDONSAEUREKASKADE UND ENTZUENDUNGSMEDIATOREN
................................................
6
1.3.1 ABLAUF DER ARACHIDONSAEUREKASKADE
...............................................................................
6
1.3.2 C
YCLOOXYGENASEN.................................................................................................................7
1.3.3 PROSTAGLANDINE
.
....................................................................................................................
8
1.3.4 PROINFLAMMATORISCHE
ZYTOKINE.........................................................................................9
1.4
SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE............................................................................................................
9
1.4.1 MITOGEN-AKTIVIERTE-PROTEINKINASE-KASKADE
(MAPK-KASKADE).................................9
1.4.2
I
K
B
O
.
UND
NF
K
B
..................................................................................................................
11
1.4.3
PI3K/AKT-SIGNALWEG........................................................................................................12
1.4.4 DIE BEDEUTUNG VON STICKSTOFFMONOXID BEI DER ENTZUENDUNGSREAKTION
...................
12
1.4.5
MATRIX-METALLOPROTEASEN.................................................................................................13
1.5
CAPSAICIN....................................................................................................................................14
1.5.1 CHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN...............................................................................................14
1.5.2
GESCHICHTLICHES..................................................................................................................14
1.5.3 TRANSIENT RECEPTOR POTENTIAL VANILLOID 1 (TR PV
1)..................................................15
1.5.4 PHARMAKOLOGISCHE NUTZUNG VON
CAPSAICIN...................................................................17
1.6 ZIELSETZUNG DER A
RBEIT...............................................................................................................
19
2. MATERIAL UND
METHODEN.................................................................................................................
20
2.1
MATERIAL.......................................................................................................................................
20
2.1.1 CHEM
IKALIEN......................................................................................................................
20
2.1.2 PRIMAERE UND SEKUNDAERE
ANTIKOERPER................................................................................
22
2.1.3 N ACHWEISSYSTEM
E.............................................................................................................
23
2.1.4
STIMULANTIEN......................................................................................................................
24
2.1.5
PRIMER..................................................................................................................................24
2.1.6 Z
ELLLINIE..............................................................................................................................
25
2.1.7 WEITERE MATERIALIEN UND
GERAETE......................................................................................25
2.2
METHODEN....................................................................................................................................28
2.2.1 KULTIVIERUNG UND STIMULATION VON PRIMAEREN MIKROGLIAKULTUREN
.............................
28
2.2.2 CELL VIABILITY A SSA Y
........................................................................................................
30
2.2.3 ENZYMIMMUNOASSAY (E IA
)............................................................................................30
2.2.4 ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (E L ISA )
......................................................
31
2.2.5 SDS-PAGE UND WESTERN B LO
T..........................................................................................32
2.2.6 DURCHFUEHRUNG UND VORBEREITUNG DER QPC R
...............................................................
40
2.2.7 STATISTISCHE
ANALYSE.........................................................................................................
43
3.
ERGEBNISSE.......................................................................................................................................44
3.1 CELL VIABILITY
ASSAY...................................................................................................................44
3.2 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE FREISETZUNG VON PGE
2
.......................................................
45
3.3 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE PRODUKTION PROINFLAMMATORISCHER
ZYTOKINE
................
46
3.3.1 T N
F-A.................................................................................................................................
46
3.3.2 INTERLEUKIN 6
......................................................................................................................47
3.4 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE ENZYME DER ARACHIDONSAEUREKASKADE
............................
48
3.4.1 EFFEKTE AUF DIE ZYTOSOLISCHE PHOSPHOLIPASE A
2
(CPLA-2).........................................48
3.4.2 EFFEKTE AUF DIE CYCLOOXYGENASE
1.................................................................................49
3.4.3 EFFEKTE AUF DIE CYCLOOXYGENASE 2
.................................................................................
51
3.4.4 EFFEKTE AUF DIE MIKROSOMALE PROSTAGLANDIN EZ-SYNTHASE 1
.....................................
52
3.5 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE INDUZIERBARE STICKSTOFFMONOXIDSYNTHASE
.....................
53
3.6 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE
SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE.................................................55
3.6.1 SIGNALWEGE DER
MAP-KINASE-KASKADE........................................................................55
3.6.2
I
K
B
U
.....................................................................................................................................
60
3.6.3 P13
K/AKT-SIGNALWEG........................................................................................................61
3.7 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE M R
NA-SYNTHESE................................................................61
3.7.1 EFFEKTE AUF DIE MRNA-SYNTHESE VON INTERLEUKIN L SS
................................................62
3.7.2 EFFEKTE AUF DIE MRNA-SYNTHESE DER ENZYME DER
ARACHIDONSAEUREKASKADE:
COX-1, COX-2 UND
MPGES-1..................................................................................................
63
3.7.3 EFFEKTE AUF DIE MRNA-SYNTHESE DER INDUZIERBAREN NO-SYNTHASE
.......................
66
3.7.4 EFFEKTE AUF DIE MRNA-SYNTHESE VON MATRIXMETALLOPROTEASEN
..............................
66
4.
DISKUSSION........................................................................................................................................
69
4.1 AUSSCHLUSS DER TOXIZITAET VON CAPSAICIN IN
MIKROGLIA........................................................70
4.2 HEMMUNG DER PGEA-SYNTHESE DURCH CAPSAICIN UND EFFEKTE AUF DIE ENZYME
DER
ARACHIDONSAEUREKASKADE.....................................................................................................................70
4.2.1 HEMMUNG DER
PGEA-SYNTHESE.......................................................................................
70
4.2.2 HEMMUNG VON COX-2 UND M
PGES-1.........................................................................70
4.2.3 KEINE EFFEKTE AUF CPLA-2 UND C O X -1
.......................................................................
73
4.3 EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE
SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE.................................................73
4.3.1 HEMMENDE EFFEKTE AUF DIE KINASEN P3 8 UND
MAPK-APK2..................................73
4.3.2 UNTERSUCHUNG VON SAPK/JNK, ERK 1/2, PI3K/AKT UND
I
K
B
U
.............................
76
4.4 KEINE EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE INDUZIERBARE
NO-SYNTHASE....................................77
4.5 KEINE EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF DIE MATRIXMETALLOPROTEASEN 3 UND 9
.........................
78
4.6 KEINE EFFEKTE VON CAPSAICIN AUF IL-LSS, IL-6 UND T N F-A
................................................
79
4.7 VON DER GRUNDLAGENFORSCHUNG ZUM MEDIKAMENT
............................................................
80
5.
SCHLUSSFOLGERUNG..............................................................................................................................84
6.
LITERATURVERZEICHNIS........................................................................................................................
86
7. ERKLAERUNG ZUM EIGENANTEIL DER
DISSERTATIONSSCHRIFT................................................................95
8. EIDESSTATTLICHE V
ERSICHERUNG..........................................................................................................96
9.
DANKSAGUNG......................................................................................................................................
97
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