Verfügbarkeit: Aufnahme und Wirkung Aluminium-haltiger Nanopartikel auf Intestinal- und Leberzellen

Aufnahme und Wirkung Aluminium-haltiger Nanopartikel auf Intestinal- und Leberzellen:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Sieg, Holger (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Berlin 2017
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adam_text	1 INHALT 1 INHALT...................................................................................................................................................... I 2 ZUSAMMENFASSUNG.............................................................................................................................1 2.1 SUMMARY......................................................................................................................................3 3 EINLEITUNG.............................................................................................................................................5 3.1 ALUMINIUM................................................................................................................................... 5 3.2 NANOPARTIKEL................................................................................................................................7 3.3 DER VERDAUUNGSTRAKT................................................................................................................ 9 3.4 DIE LEBER.................................................................................................................................. 12 3.5 TOXIKOLOGISCHE ENDPUNKTE...................................................................................................... 14 3.6 ZIELSETZUNG................................................................................................................................ 17 4 MATERIAL UND METHODEN................................................................................................................... 18 4.1 M ATERIAL...................................................................................................................................... 18 4.1.1 NANOPARTIKEL......................................................................................................................18 4.1.2 CHEMIKALIEN......................................................................................................................18 4.1.3 G ERAETE................................................................................................................................20 4.1.4 VERBRAUCHSMATERIALIEN UND KITS...................................................................................21 4.1.5 ZELLLINIEN............................................................................................................................ 21 4.1.6 ZELLKULTURMEDIEN.............................................................................................................. 22 4.1.7 PRIM ER................................................................................................................................22 4.1.8 SOFTWARE............................................................................................................................ 23 4.2 METHODEN.................................................................................................................................. 24 4.2.1 AUSWAHL UND CHARAKTERISIERUNG DER ALUMINIUMSPEZIES.........................................24 4.2.2 SAXS-MESSUNGEN...........................................................................................................26 4.2.3 MIKROWELLENAUFSCHLUSS.................................................................................................. 26 4.2.4 ATOMABSORPTIONSSPEKTROMETRIE.................................................................................... 26 4.2.5 ULTRAZENTRIFUGATION UND BESTIMMUNG DER LONENFREISETZUNG...................................27 4.2.6 ARTIFIZIELLER VERDAU VON NANOPARTIKELN ........................................................................ 27 4.2.7 ZELLKULTIVIERUNG UND INKUBATION.................................................................................... 29 4.2.8 AUFNAHME- UND TRANSPORTEXPERIMENTE IM TRANSWELLSYSTEM ................................ 31 4.2.9 ZELLVIABILITAETSTESTS............................................................................................................32 4.2.10 MESSUNG DER ZELLULAEREN IMPEDANZ .............................................................................. 34 4.2.11 HIGH-CONTENT-ANALYSE.....................................................................................................35 4.2.12 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE BESTIMMUNGEN...................................................................35 4.2.13 RNA-ISOLATION UND TRANSKRIPTOMANALYSE .................................................................. 40 4.2.14 POLYMERASE-KETTENREAKTION (P C R )............................................................................. 40 4.2.15 ISOLATION DER PROTEINCORONA............................................................................................ 41 4.2.16 2D-SDS-PAGE UND PROTEOMANALYSE........................................................................ 41 4.2.17 STATISTISCHE METHODEN................................................................................................... 42 4.2.18 KOOPERATIONEN UND PROJEKTPARTNER................................................................................ 43 5 ERGEBNISSE.........................................................................................................................................44 5.1 CHARAKTERISIERUNG DER ALUMINIUMSPEZIES..........................................................................44 5.2 BESTIMMUNG DER LONENFREISETZUNG AL-HALTIGER NANOPARTIKEL..........................................47 5.3 CHARAKTERISIERUNG DER SPEZIFISCHEN PROTEINCORONA ......................................................... 49 5.4 ZELLVIABILITAETSBESTIMMUNGEN..................................................................................................51 5.4.1 ZYTOTOXIZITAETSTESTS.............................................................................................................51 5.4.2 MESSUNG DER ZELLULAEREN IMPEDANZ...............................................................................53 5.5 ARTIFIZIELLER VERDAU ALUMINIUM-HALTIGER VERBINDUNGEN.....................................................55 5.5.1 ANALYTISCHE ERGEBNISSE DES ARTIFIZIELLEN VERDAUS.....................................................55 5.5.2 TOXIKOLOGISCHE WIRKUNG ARTIFIZIELL VERDAUTER ALUMINIUMSPEZIES...........................57 5.6 AUFNAHME- UND TRANSPORTSTUDIEN........................................................................................ 60 5.6.1 AUFNAHME UND TRANSPORT IM TRANSWELLSYSTEM ......................................................... 60 5.6.2 GRANULARITAETSANALYSE...................................................................................................... 61 5.7 TRANSKRIPTOMANALYSE...............................................................................................................64 5.7.1 VERGLEICHENDE AUSWERTUNG DER MICROARRAYERGEBNISSE ........................................... 64 5.7.2 VERIFIZIERUNG DER TRANSKRIPTOMANALYSE ...................................................................... 66 5.7.3 DATENAUSWERTUNG DER TRANSKRIPTOMANALYSE.............................................................68 5.8 MESSUNG ZELLULAERER EFFEKTE.................................................................................................... 71 5.8.1 FLUOROMETRISCHE TESTVERFAHREN ZUR BESTIMMUNG WEITERER TOXIKOLOGISCHER ENDPUNKTE.......................................................................................................................................... 71 5.8.2 APOPTOSE- / NEKROSEMESSUNGEN................................................................................. 74 5.8.3 ANALYSE VON GENTOXIZITAET, VERAENDERTER PROLIFERATION UND DNA-SCHAEDIGUNG ...... 77 5.9 EINFLUSS VERSCHIEDENER GEGENIONENSPEZIES AUF DIE TOXIZITAET VON ALUMINIUM .......... 80 5.9.1 ZYTOTOXIZITAET VERSCHIEDENER ALUMINIUMSPEZIES ......................................................... 80 5.9.2 APOPTOSE- / NEKROSEMESSUNGEN NACH INKUBATION MIT ALUMINIUMACETYLACETONAT 82 5.9.3 KOMBINATIONSEXPERIMENTE VERSCHIEDENER ALUMINIUMSPEZIES .............................. 84 6 DISKUSSION.......................................................................................................................................... 87 6.1 EXPOSITION, INTESTINALE AUFNAHME UND SYSTEMISCHE VERTEILUNG VON ALUMINIUM ....... 87 6.1.1 AEUSSERE EXPOSITION UND SYSTEMISCHE VERTEILUNG VON ALUMINIUM...........................87 6.1.2 AUFNAHME- UND TRANSPORTSTUDIEN VON ALUMINIUMSPEZIES .................................... 90 6.2 CHARAKTERISIERUNG DER ALUMINIUMSPEZIES.......................................................................... 94 6.2.1 ANALYTISCHE EXPERIMENTE ZUR CHARAKTERISIERUNG VON ALUMINIUMSPEZIES ........... 94 6.2.2 LONENFREISETZUNG VON ALUMINIUMSPEZIES.................................................................... 96 6.2.3 ARTIFIZIELLER VERDAU VON ALUMINIUMSPEZIES.................................................................97 6.2.4 UNTERSUCHUNG DER PROTEINCORONA................................................................................. 98 6.3 TOXIKOLOGISCHE WIRKMECHANISMEN VERSCHIEDENER ALUMINIUM-SPEZIES AUF INTESTINAL UND LEBERZELLEN.................................................................................................................................... 99 6.3.1 TOXIKOLOGISCHE WIRKUNG VON ALUMINIUMSPEZIES....................................................... 99 6.3.2 TOXIKOLOGISCHE WIRKMECHANISMEN........................................................................... 101 6.3.3 EINFLUSS VON GEGENIONEN AUF DIE TOXIZITAET VON ALUMINIUM ................................... 106 6.4 TOXIKOLOGISCHES POTENZIAL VON ORAL AUFGENOMMENEM ALUMINIUM FUER DIE MENSCHLICHE GESUNDHEIT UND DIE RISIKOBEWERTUNG.................................................................. 108 7 LITERATURVERZEICHNIS..........................................................................................................................IV 8 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.................................................................................................................XIX 9 ABBILDUNGSVERZEICHNIS..................................................................................................................XXI 10 TABELLENVERZEICHNIS....................................................................................................................XXIV 11 ANHANG........................................................................................................................................... XXV 12 ERKLAERUNG DER EIGENSTAENDIGKEIT............................................................................................XXXVI 13 DANKSAGUNG.............................................................................................................................XXXVII 14 LEBENSLAUF..................................................................................................................................XXXIX 15 VEROEFFENTLICHUNGEN, VORTRAEGE, KONFERENZEN ........................................................................... XLI 16 NOTIZEN............................................................................................................................................ XLII
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