Untersuchungen zur Wirkung anti-inflammatorischer Strategien auf zentralnervös induzierte Krankheitssymptome im Gehirn bei systemischen Entzündungsreaktionen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2017
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| Ausgabe: | 1. Auflage |
| Schriftenreihe: | Edition Scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | IV, 332 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm x 14.6 cm, 412 g |
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|---|---|
| adam_text | I. E
INLEITUNG
.............................................................................................................-1
1. DIE SYSTEMISCHE ENTZUENDUNGSREAKTION
...................................................................
- 2
1.1 ZENTRALNERVOES KONTROLLIERTE KRANKHEITSSYMPTOME
.................................................
- 2
1.2 KOMMUNIKATIONSWEGE ZWISCHEN PERIPHERIE UND DEM ZENTRALEN
NERVENSYSTEM..........................................................................................................-
3
2. DIE
ENTZUENDUNGSAUFLOESUNG...................................................................................-14
2.1 CALCIUMABHAENGIGE
KALIUMKANAELE.........................................................................-14
2.2 DIE ROLLE VON LIPIDEN UND LIPIDMEDIATOREN FUER DIE BEENDIGUNG VON
ENTZUENDUNGEN UND
FIEBER.....................................................................................-17
3.
VERSUCHSMODELLE...................................................................................................-
25
3.1 LPS-INDUZIERTE
ENTZUENDUNGSREAKTION...................................................................-
25
3.2 FAT-1 MAUS ALS
TIERMODELL....................................................................................-
26
4. FRAGESTELLUNGEN UND ZIELE DER
ARBEIT....................................................................-
27
4.1 CYPPA: UNTERSUCHUNG DER EFFEKTE DES K+-KANAL AGONISTEN CYPPA
.................
- 27
4.2 FAT-1: CHARAKTERISIERUNG DES EINFLUSSES VON CO-3 FS AUF
ENTZUENDUNGSVERLAEUFE.............................................................................................-
27
II. M
ATERIAL
UND
M
ETHODEN
...................................................................................-
29
1. ALLGEMEINE
MATERIALIEN.........................................................................................-
29
1.1 TECHNISCHE
GERAETE.................................................................................................-
29
1.2
SOFTWARE...............................................................................................................
- 29
1.3
CHEMIKALIEN.........................................................................................................
- 29
1.4 ALLGEMEINE GE- UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN........................................................-
30
2. IN VIVO
VERSUCHSMODELLE.......................................................................................-
30
2.1
MATERIALIEN............................................................................................................-30
2.2
VERSUCHSTIERE.........................................................................................................-33
2.3
VERSUCHSAUFBAU.....................................................................................................-41
2.4
VERSUCHSABLAUF......................................................................................................-
44
3.
MALDI-MSI.........................................................................................................-48
3.1
MATERIALIEN............................................................................................................-48
3.2 GRUNDLAGEN DER
METHODE......................................................................................
- 49
3.3 PROBENVORBEREITUNG / AUFBRINGEN DER MATRIX
.......................................................
- 52
3.4
MALDI-MSI.........................................................................................................-55
4. IMMUNFLUORESZENZ UND IMMUNHISTOCHEMIE
.........................................................
- 56
4.1
MATERIALIEN............................................................................................................-56
4.2 GRUNDLAGEN DER
METHODE.......................................................................................-
59
4.3 HERSTELLUNG DER
GEFFIERSCHNITTE.............................................................................-
60
4.4
VERSUCHSPROTOKOLLE...............................................................................................-
60
4.5
MIKROSKOPIE..........................................................................................................-
63
5. ZYTOKIN
BIOASSAYS.................................................................................................-
63
5.1
MATERIALIEN............................................................................................................-63
5.2 GRUNDLAGEN DER
METHODE.......................................................................................-
64
5.3
PROBENGEWINNUNG...................................................................................................
- 65
5.4
VERSUCHSPROTOKOLL..................................................................................................
- 65
6.
WESTEMBLOT.............................................................................................................-
67
6.1
MATERIALIEN..............................................................................................................-67
6.2 GRUNDLAGEN DER METHODE
...........................................
..
.........................................
- 68
6.3
PROBENMATERIAL........................................................................................................-
69
6.4
PROTEINEXTRAKTION....................................................................................................
- 69
6.5 GELELEKTROPHORESE UND
WESTEMBLOTANALYSE...........................................................-
70
6.6 PROTEINDETEKTION MITTELS
ANTIKOERPERMARKIERUNG....................................................-
72
7. QUANTITATIVE REAL-TIME
PCR....................................................................................
- 73
7.1
MATERIALIEN..............................................................................................................-73
7.2 GRUNDLAGEN DER
METHODE........................................................................................
- 74
7.3
PROBENMATERIAL.......................................................................................................
-75
7.4
RNA-EXTRAKTION.....................................................................................................
- 75
7.5 REVERSE
TRANSKRIPTION............................................................................................
-77
7.6 DURCHFUEHRUNG DER QUANTITATIVEN REAL-TIME
PCR.....................................................- 77
7.7 ERMITTLUNG EINES GEEIGNETEN ENDOGENEN
REFERENZGENS..........................................- 78
8.
HPLC......................................................................................................................-
78
8.1
MATERIALIEN.............................................................................................................
-78
8.2 GRUNDLAGEN DER
METHODE........................................................................................
- 80
8.3
PROBENMATERIAL.......................................................................................................
- 80
8.4
PERCHLORSAEUREEXTRAKTION..........................................................................................
- 80
8.5 MESSUNG DER
NUKLEOTIDKONZENTRATION....................................................................
- 81
8.6 QUANTIFIZIERUNG DER EINGESETZTEN
PROTEINMENGE....................................................- 82
9. AUSWERTUNG UND
STATISTIK.......................................................................................
- 82
9.1 PHYSIOLOGISCHE
PARAMETER......................................................................................
- 82
9.2 BIOCHEMISCHE
PARAMETER........................................................................................
- 85
III.
E
RGEBNISSE
............................................................................................................
-96
1. BEEINFLUSSUNG LPS-INDUZIERTER SYSTEMISCHER ENTZUENDUNGSREAKTIONEN
DURCH
DEN K+-KANAL AGONISTEN
CYPPA..........................................................................-
96
1.1 BEEINFLUSSUNG PHYSIOLOGISCHER PARAMETER UEBER EINEN ZEITRAUM VON 24
STUNDEN DURCH PERIPHERE INJEKTION VON
CYPPA......................................................- 96
1.2 BEEINFLUSSUNG PERIPHERER ZYTOKINE NACH I.P. INJEKTION VON CYPPA
....................
- 100
1.3 EINFLUSS VON CYPPA AUF DIE ZENTRALE MRNA-EXPRESSION
INFLAMMATORISCHER
MARKER.................................................................................................................
-101
1.4
IMMUNREAKTIVITAET.................................................................................................-
103
2. WEITERFUEHRENDE UNTERSUCHUNGEN DER DURCH DEN K+-KANAL AGONISTEN CYPPA
VERURSACHTEN
WIRKUNGEN.....................................................................................-
105
2.1 PHYSIOLOGISCHE PARAMETER ZWEI STUNDEN NACH PERIPHERER INJEKTION VON
CYPPA..................................................................................................................
- 105
2.2 ERFASSUNG PERIPHERER ZYTOKINE NACH EINER BEHANDLUNG MIT CYPPA
....................
- 107
2.3 ZENTRALER EINFLUSS AUF INFLAMMATORISCHE
MARKER.................................................- 107
2.4 AUSWIRKUNGEN VON CYPPA AUF HEPATISCHE NUKLEOTIDSPIEGEL
...........................
-112
3. BASALE BEDINGUNGEN UND LPS-INDUZIERTE SYSTEMISCHE ENTZUENDUNG BEI
C57B1/6N UND FAT-1
MAEUSEN..............................................................................-115
3.1 BEI NORMALER FUETTERUNG BEIDER
GENOTYPEN.........................................................-115
3.2 UNTER CO-3 DEFIZIENTER NUTRITIVER VERSORGUNG BEIDER
GENOTYPEN..........................-119
3.3 VERGLEICH PHYSIOLOGISCHER PARAMETER BEIDER FUETTERUNGSGRUPPEN
......................
-124
3.4 KOERPERGEWICHT, FUTTER- UND
WASSERAUFHAHME....................................................- 132
3.5 PERIPHERE
ZYTOKINE..............................................................................................
-133
4. PHYSIOLOGISCHE PARAMETER VON C57B1/6N UND FAT-1 MAEUSEN UNTER CO-3
DEFIZIENTER NUTRITIVER VERSORGUNG BEI N ES
........................................................
- 134
5. VERTEILUNGSMUSTER VERSCHIEDENER PHOSPHOLIPIDE, LYSOPHOSPHOLIPIDE UND
UNVERESTERTER FETTSAEUREN IM BEREICH DER PRAEOPTISCHEN REGION UND DES
OVLTS................................................................................................................
- 136
5.1 MESSUNGEN IM POSITIVEN
IONEN-MODUS...............................................................-
136
5.2 MESSUNGEN IM NEGATIVEN
IONEN-MODUS..............................................................-
173
6. DARSTELLUNG INFLAMMATORISCHER
MARKER...............................................................-
203
6.1 NF-IL6 UND COX2 IMMUNREAKTIVITAET VOR UND NACH MALDI-MESSUNGEN
.........
- 203
6.2 DARSTELLUNG NEUTROPHILER GRANULOZYTEN IM ANSCHLUSS AN MALDI-MESSUNG
UND IMMUNFLUORESZENZMARKIERUNG INFLAMMATORISCHER
MARKER..........................- 207
6.3 VERWENDUNG ANDERER MATRIZES (3NBA,
CLCCA)...............................................- 208
IV.
D
ISK USSION
........................................................................................................
-209
1. DAS ANTI-INFLAMMATORISCHE POTENTIAL DES K+-KANAL AGONISTEN CYPPA
.............
- 209
1.1 AUSWIRKUNGEN VON CYPPA AUF MEDIATOREN DES HUMORALEN SIGNALWEGES
.........
- 209
1.2 CYPPA HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE EXPRESSION MIKROGLIALER MARKER
(CD68
UND CD
11B)..........................................................................................................
-212
1.3 DURCH CYPPA BEDINGTE VERAENDERUNGEN UNTER NICHT-INFLAMMATORISCHEN
BEDINGUNGEN (OHNE
LPS-STIMULATION).................................................................-
213
2. DIE WIRKUNG VON CO-3 FETTSAEUREN UND DEREN METABOLITE AUF
LPS-INDUZIERTE
VERAENDERUNGEN IM IN VIVO
MODELL.......................................................................-216
2.1 AUSWIRKUNGEN DES GENOTYPS UND DER NUTRITIVEN CO-3 VERSORGUNG AUF
FIEBER
UND ANDERE PARAMETER DER SICKNESS
RESPONSE.......................................................-216
2.2 PLASMA-IL-6-KONZENTRATIONEN SIND IN FAT-1 NACH LPS-STIMULATION
GEGENUEBER WT
REDUZIERT......................................................................................-
220
3. FAT-1 ZEIGEN VERMEHRTE PHYSIOLOGISCHE STRESSREAKTIONEN IM NES
....................
- 222
4. UNTERSCHEIDBARE VERTEILUNGSMUSTER UND DIE POTENTIELLE ROLLE
VERSCHIEDENER
LIPIDSPEZIES IM BEREICH DER PRAEOPTISCHEN REGION UND DES OVLTS WAEHREND
LPS-INDUZIERTER SYSTEMISCHER
INFLAMMATION.......................................................- 225
4.1 LIPIDSPEZIES DEREN NACHWEIS NICHT ODER NICHT EINDEUTIG GELANG (SPMS
UND
EICOSANOIDE)........................................................................................................-236
4.2 DIE UEBERLAGERNDE DARSTELLUNG VON MALDI BILDERN UND DIE MULTIMODALE
VERKNUEPFUNG MIT IMMUNHISTOLOGISCH GEWONNENEN BILDDATEN FUHRT ZU EINEM
SYNERGISTISCHEN
INFORMATIONSGEWINN...................................................................-
237
4.3 LIMITATIONEN UND GRENZEN VON
MALDI-MSI.....................................................- 239
5. ZUSAMMENFASSUNG DER GEWONNENEN ERKENNTNISSE UND DARAUS ABGELEITETE
HYPOTHESEN............................................................................................................-
240 -
5.1 CYPPA ALS THERAPEUTIKUM UND UNERWARTETE
WIRKUNGEN.....................................- 240 -
5.2 FAT-1
......................................................................................................................-243
-
V. Z
USAMMENFASSUNG
..............................................................................................-251-
VI. S
UMMARY
..............................................................................................................
-254-
VII. G
EMESSENE
P
ARAMETER
DER
MALDI-E
XPERIMENTE
.........................................
- 257 -
1. MESSUNGEN IM POSITIVEN
IONEN-MODUS...............................................................-
257 -
1.1 MESSUNG WT PBS 24H NACH
STIMULATION.............................................................
- 257 -
1.2 MESSUNG WT EPS 24H NACH
STIMULATION............................................................-
262 -
1.3 MESSUNG FAT-1 EPS 24H NACH
STIMULATION........................................................... -
267 -
1.4 NICHT ZUZUORDNENDE
MASSEN...............................................................................-
272 -
2. MESSUNGEN IM NEGATIVEN
IONEN-MODUS...............................................................
- 273 -
2.1 MESSUNG WT PBS 24H NACH
STIMULATION.............................................................-
273 -
2.2 MESSUNG WT EPS 24 NACH
STIMULATION...............................................................
- 277 -
2.3 MESSUNG FAT-1 EPS 24H NACH
STIMULATION...........................................................-
279 -
3. IN DEN MESSUNGEN NICHT GEFUNDENE
MASSEN........................................................- 283 -
3.1 IM POSITIVEN IONEN-MODUS NICHT GEFUNDENE
MASSEN...........................................- 283 -
3.2 IM NEGATIVEN IONEN-MODUS NICHT GEFUNDENE
MASSEN..........................................- 298 -
VIII. A
BKUERZUNGEN
......................................................................................................-301
-
IX. L
ITERATURVERZEICHNIS
........................................................................................-
305 -
X. A
NHANG
................................................................................................................-330-
1. EIGENE
PUBLIKATIONEN..........................................................................................
- 330 -
1.1 ORIGINALARBEITEN IN
FACHZEITSCHRIFTEN...................................................................
- 330 -
1.2 VEROEFFENTLICHTE
ABSTRACTS....................................................................................
- 330 -
1.3 IN
VORBEREITUNG...................................................................................................
- 330 -
2.
DANKSAGUNG..........................................................................................................
- 331 -
3.
ERKLAERUNG..............................................................................................................
- 332 -
|
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