Impfprophylaxe gegen aviäre Bornaviren mit Hilfe rekombinanter viraler Vektorvakzinen:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2016
|
| Schriftenreihe: | édition Scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | IV, 145 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm x 14.6 cm, 212 g |
| ISBN: | 9783835964532 3835964534 |
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|---|---|
| adam_text | ABKUERZUNGSVERZEICHNIS............................................................................................................
1
1
EINLEITUNG......................................................................................................................
3
2
LITERATURUEBERSICHT........................................................................................................
5
2.1 TAXONOMIE DER
BORNAVIRIDAE.........................................................................................
5
2.1.1 GENOMAUFBAU UND
VIRUSPROTEINE...........................................................................
7
2.2 EPIDEMIOLOGIE DER
BORNAVIRIDAE....................................................................................8
2.2.1 BODV-1 UND - 2
........................................................................................................8
2.2.2
VSBV-1..................................................................................................................10
2.2.3 AVIAERE
BORNAVIREN..................................................................................................10
2.3 BORNAVIREN ALS
KRANKHEITSERREGER...............................................................................12
2.3.1
HISTORIE...................................................................................................................12
2.3.2 KLINISCHE SYMPTOME, PATHOLOGIE, HISTOLOGIE
.......................................................
14
2.4 PATHOGENESE DER BORNAVIRIDAE INDUZIERTEN ERKRANKUNGEN
.......................................
17
2.4.1
BD..........................................................................................................................
17
2.4.2
PDD.......................................................................................................................
19
2.5 IMMUNITAET UND IMMUNPROPHYLAXE GEGEN BORNAVIRUS-INFEKTIONEN
.............................
20
2.5.1 BODV-1 BEI
SAEUGERN............................................................................................
20
2.5.2 AVIAERE
BORNAVIREN..................................................................................................21
2.6 ANTIVIRAL WIRKSAME SUBSTANZEN UND THERAPIE BORNAVIRUS-INDUZIERTER
ERKRANKUNGEN..............................................................................................................
22
2.6.1 ANTIVIRAL WIRKSAME SUBSTANZEN GEGEN BORNAVIREN
.............................................
22
2.6.2 ANSAETZE ZUR BEHANDLUNG DER PDD
...........................
23
2.7 DIAGNOSTIK VON
BORNAVIRUS-INFEKTIONEN.......................................................................24
2.7.1 VIROLOGISCHE DIAGNOSTIK ZUM NACHWEIS AVIAERER
BORNAVIREN................................24
2.7.2 KLINISCHE DIAGNOSTIK DER
PDD..............................................................................
26
2.8 VAKZINATION MIT HILFE VIRALER VEKTORVAKZINEN
.............................................................
27
2.6.1
NDV........................................................................................................................26
2.8.2 MVA
.30
3 MATERIAL UND
METHODEN...............................................................................................
33
3.1
MATERIAL.........................................................................................................................33
3.1.1
ZELLLINIEN.................................................................................................................
33
3.1.2
VIRUSSTAEMME...........................................................................................................33
3.1.3
PLASMIDE................................................................................................................
34
3.1.4 KOMPETENTE
BAKTERIEN...........................................................................................34
3.1.5
ANTIKOERPER...............................................................................................................
34
3.1.6
ENZYME..................................................................................................................
35
3.1.7 SYNTHETISCHE
OLIGONUKLEOTIDE...............................................................................36
3.2 ZELLKULTURMETHODEN UND VIROLOGISCHE TECHNIKEN
.......................................................
38
3.2.1 ALLGEMEINE
ZELLKULTURARBEITEN...............................................................................38
3.2.2 INFEKTION VON ZELLKULTUREN UND HERSTELLUNG VON VIRUSPRAEPARATIONEN
....................
36
3.2.3
VIRUSTITRATION...........................................................................................................40
3.2.4 BERECHNUNG DER
VIRUSTITER.....................................................................................
41
3.3 METHODEN ZUM ANTIGEN- UND
ANTIKOERPERNACHWEIS.....................................................
41
3.3.1 IMMUNPEROXIDASETEST
(IPT)..................................................................................
41
3.3.2 IMMUNFLUORESZENZTEST
(IPT)..................................................................................
41
3.3.3 WESTERNBLOT
(WB)..................................................................................................
42
3.3.4 NACHWEIS NDV-SPEZIFISCHER ANTIKOERPER MITTELS HHT
..........................................
43
3.3.5 NACHWEIS BORNAVIRUS-SPEZIFISCHER ANTIKOERPER IM MFT
.........................................
44
3.4 MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN.................................................................................45
3.4.1 EXTRAKTION VIRALER RNA UND
DNA...........................................................................45
3.4.2 REVERSE TRANSKRIPTION
(RT)..................................................................................
46
3.4.3
PCR........................................................................................................................46
3.4.4
QPCR.....................................................................................................................
46
3.4.5 KLONIERUNG VON BORNAVIRUS-GENEN FUER DIE GENERIERUNG VIRALER
VEKTOREN
...........
49
3.4.6 MUTAGENESE DES CNBV-2-N IM MVA-TRANSFERPLASMID
.......................................
51
3.4.7 TRANSFORMATION KOMPETENTER
BAKTERIEN...............................................................52
3.5 HERSTELLUNG DER REKOMBINANTEN VEKTORVAKZINEN
........................................................
52
3.5.1 HERSTELLUNG DER
MVA-VEKTOREN..............................................................................
52
3.5.2 HERSTELLUNG DER
NDV-VEKTOREN..............................................................................
56
3.6 CHARAKTERISIERUNG DER GENERIERTEN
VEKTORVAKZINEN...................................................57
3.6.1 VIRALE
WACHSTUMSANALYSE......................................................................................57
3.6.2 UEBERPRUEFUNG DER GENETISCHEN STABILITAET DER
IMPFVEKTOREN..................................58
3.7
VAKZINATIONSVERSUCHE..................................................................................................58
3.7.1 TIEREXPERIMENTELLES
AKTENZEICHEN.......................................................................58
3.7.2
TIERE.......................................................................................................................
59
3.7.3
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG.........................................................................................
59
3.7.4
HALTUNGSBEDINGUNGEN..........................................................................................
62
3.6
HISTOLOGIE......................................................................................................................
62
3.8.1 PRAEPARATION DER
ORGANE........................................................................................
62
3.6.2
AUSWERTUNG...........................................................................................................
63
3.9 STATISTISCHE
ANALYSEN...................................................................................................
63
ERGEBNISSE..................................................................................................................64
4.1 CHARAKTERISIERUNG DER REKOMBINANTEN VEKTORIMPF STOFFE
...........................................
64
4.1.1 GENOMANALYSE DER
MVA-VEKTOREN......................................................................64
4.1.2
PROTEINEXPRESSION................................................................................................
65
4.1.3
WACHSTUMSKINETIK..................................................................................................66
4.1.4 STABILITAET DER
ZIELGENEXPRESSION..........................................................................
70
4.2 IMPFUNG VON NYMPHENSITTICHEN GEGEN PABV-4-BELASTUNGSINFEKTION
.......................
71
4.2.1 SICHERHEIT DER
IMPFSTOFFE......................................................................................72
4.2.2 IMMUNOGENITAET DER
IMPFSTOFFE..............................................................................
74
4.2.3 PABV-4-AUSSCHEIDUNG NACH BELASTUNGSINFEKTION
..............................................
75
4.2.4 PABV-4-NACHWEIS IN DEN ORGANEN
.........................
76
4.2.5
SEROKONVERSION.....................................................................................................77
4.2.6 KLINISCHE SYMPTOME UND MAKROSKOPISCHE LAESIONEN
.........................................
76
4.2.7 HISTOPATHOLOGISCHE BEFUNDE
................................................................................
79
4.2.6 ZUSAMMENFASSUNG DES NYMPHENSITTICHVERSUCHS
...............................................
61
4.3 IMPFUNG VON KANARIENVOEGELN GEGEN CNBV-2-BELASTUNGSINFEKTION
..........................
63
4.3.1 SICHERHEIT DER
IMPFSTOFFE.......................................................................................63
4.3.2 IMMUNOGENITAET DER IMPFSTOFFE
..............................................................
4.3.3 CNBV-2-BELASTUNGSINFEKTION UEBER MUKOSALE ROUTE NICHT
ERFOLGREICH.................85
4.3.4 CNBV-2-AUSSCHEIDUNG NACH DER ZWEITEN BELASTUNGSINFEKTION
..........................
86
4.3.5
SEROKONVERSION.....................................................................................................
88
4.3.6 CNBV-2-NACHWEIS IN DEN ORGANEN
......................................................................
88
4.3.7 KLINISCHE SYMPTOME UND MAKROSKOPISCHE LAESIONEN
.........................................
90
4.3.6 HISTOPATHOLOGISCHE
BEFUNDE..................................................................................91
5
DISKUSSION..................................................................................................................
93
5.1 SICHERHEIT DER
IMPFSTOFFE..............................................................................................94
5.2 IMMUNOGENITAET DER
IMPFSTOFFE.....................................................................................
97
5.3 DIE MUKOSALE
BELASTUNGSINFEKTION..............................................................................96
5.4 IMPFINDUZIERTER SCHUTZ GEGEN HOMOLOGE BELASTUNGSINFEKTION
................................
100
5.5 ERKRANKUNG NACH
BORNAVIRUSINFEKTION.......................................................................103
5.6
AUSBLICK.......................................................................................................................105
6
ZUSAMMENFASSUNG...................................................................................................109
7
SUMMARY....................................................................................................................112
8
ABBILDUNGSVERZEICHNIS...........................................................................................
114
9
TABELLENVERZEICHNIS................................................................................................
115
10
LITERATURVERZEICHNIS................................................................................................
117
11
ERKLAERUNG...................................................................................................................127
12
DANKSAGUNG..............................................................................................................
128
13
ANHANG.......................................................................................................................129
13.1 CHEMIKALIEN UND
ZELLKULTURMATERIALIEN......................................................................
129
13.2
KITS..............................................................................................................................
131
13.3
GERAETE.........................................................................................................................132
13.4 SPF-HUEHNEREIER UND VERSUCHSTIERE
..........................................................................
132
13.5 ZELLKULTURMEDIEN UND
STANDARDPUFFER........................................................................133
13.6 NAEHRMEDIEN FUER
BAKTERIENANZUCHT.............................................................................134
13.7
DNA-GELELEKTROPHORESE............................................................................................
134
13.8
ROHDATEN.....................................................................................................................135
|
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