Charakterisierung und Phänotypisierung meningealer Primärkulturen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Jena
2016
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG.........................................................................................
8
2.
EINLEITUNG........................................................................................................10
2.1
MENINGEOME.........................................................................................................
10
2.1.1 EPIDEMIOLOGIE, LOKALISATION UND KLINIK
............................................................
10
2.1.2 AETIOLOGIE UND
ZYTOGENETIK................................................................................10
2.1.3 KLASSIFIKATION, THERAPIE UND PROGNOSE
...........................................................
11
2.1.4 WACHSTUMSFAKTOREN, REZEPTOREN UND SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE
...................
13
2.2
ZELLKULTUREN......................................................................................................
16
2.3 MENINGEALE MARKERPROTEINE
........................................................................
16
2.4 BIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER
MENINGEOME........................................17
2.4.1 MORPHOLOGIE IN HISTOLOGIE UND
ZELLKULTUR........................................................18
2.4.2 WACHSTUMS- UND PROLIFERATIONSVERHALTEN
.......................................................
18
2.4.3 INVASION, ZELLMIGRATION UND KOLONIEBILDUNG
.....
..............................................
20
2.4.4
CHEMOSENSITIVITAET............................................................................................20
3. ZIELE DER
ARBEIT............................................................................................
22
4. MATERIAL UND
METHODEN............................................................................24
4.1
MATERIAL................................................................................................................
24
4.1.1
TUMORPROBEN...................................................................................................
24
4.1.2
CHEMIKALIEN....................................................................................................
26
4.1.3 HERGESTELLTE
LOESUNGEN....................................................................................27
4.1.4
VERBRAUCHSMATERIALIEN....................................................................................28
4.1.5
GERAETE.............................................................................................................
29
4.1.6
ANTIKOERPER........................................................................................................
30
4.2
METHODEN..............................................................................................................
31
4.2.1 PATIENTENDATEN UND
PRIMAERTUMOR...................................................................
31
4.2.2 GEWINNUNG VON ZELLKULTUREN AUS OPERATIVEM PROBENMATERIAL
........................
31
4.2.2.1 AUFTAUEN VON ZELLEN
..........................................................................
32
4.2.2.2 KULTIVIERUNG VON ZELLEN
......................................................................
32
4.2.2.3 EINFRIEREN VON
ZELLEN..........................................................................33
4.2.3 VERSUCHSANSAETZE
ERSTELLEN..............................................................................33
4.2.4
MORPHOLOGIE...................................................................................................
35
4.2.5
IMMUNFLUORESZENZ...........................................................................................36
4.2.6
WACHSTUMSKINETIK...........................................................................................37
4.2.7
SENESZENZTEST.................................................................................................
38
4.2.8 SCRATCH ASSAY
................................................................................................
39
4.2.9 COLONY FORMATION
ASSAY................................................................................
39
4.2.10
CHEMOSENSITIVITAETSTEST...................................................................................40
4.2.11 STATISTISCHE
AUSWERTUNG.................................................................................40
5.
ERGEBNISSE......................................................................................................41
5.1 KULTIVIERUNG DER TUMORPROBEN UND IDENTIFIKATION
...........................
41
5.2 CHARAKTERISIERUNG MENINGEALER PRIMAERKULTUREN
.............................
45
5.2.1 MORPHOLOGIE DER MENINGEALEN ZELLKULTUREN
...................................................
45
5.2.2 WACHSTUMS- UND
PROLIFERATIONSVERHALTEN......................................................48
5.2.3
MIGRATIONSVERHALTEN.......................................................................................52
5.2.4
KOLONIEBILDUNGSVERHALTEN..............................................................................57
5.2.5
CHEMOSENSITIVITAET..........................................................................................57
5.2.5.1
ETHANOL..........................................................................................57
5.2.5.2
DMSO..........................................................................................
59
5.2.5.3
VERGLEICH.......................................................................................61
5.3 SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE IN MENINGEOMZELLKULTUREN
...................
62
5.3.1 REZEPTORTYROSINKINASE
....................................................................................
62
5.3.2 MAPK-
SIGNALTRANSDUKTIONSWEG.....................................................................
64
5.3.3 PI3K/AKT-
SIGNALTRANSDUKTIONSWEG..................................................................67
6 DISKUSSION 70
6.1 IDENTIFIKATION DER ZELLKULTUREN ALS MENINGEAL MITTELS
.................
70
MARKERPROTEINEN UND MORPHOLOGIE
6.2 CHARAKTERISIERUNG DER ZELLKULTUREN ANHAND IHRER
.........................
75
EIGENSCHAFTEN
6.2.1
MORPHOLOGIE....................................................................................................
75
6.2.2 WACHSTUMS- UND
PROLIFERATIONSVERHALTEN........................................................76
6.2.3
MIGRATIONSVERHALTEN.........................................................................................79
6.2.4 KOLONIEBILDUNGSVERHALTEN
...............................................................................
81
6.2.5
CHEMOSENSITIVITAET............................................................................................81
6.3 SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE IN MENINGEOMEN
..........................................
83
6.3.1
REZEPTORTYROSINKINASEN..................................................................................
83
6.3.2 MARK- SIGNALTRANSDUKTIONSWEG
.....................................................................
85
6.3.3 PI3K/AKT-
SIGNALTRANSDUKTIONSWEG..................................................................
87
7.
SCHLUSSFOLGERUNG....................................................................................89
A.
LITERATURVERZEICHNIS..............................................................................................91
B.
ABBILDUNGSUNGSVERZEICHNIS.............................................................................
105
C.
TABELLENVERZEICHNIS............................................................................................106
D.
FORMELVERZEICHNIS..............................................................................................106
E.
DATENTABELLEN.......................................................................................................107
F.
DANKSAGUNG.........................................................................................................112
G. EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG..................................................................................113
|
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