Isolierung, Charakterisierung und Differenzierung von Stammzellen des Spiralganglions:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2016
|
| Schriftenreihe: | Edition Scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | VII, 105 Seiten Illustrationen |
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS.................................................................................................
I
ABBILDUNGSVERZEICHNIS......................................................................................IV
TABELLENVERZEICHNIS............................................................................................
V
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.....................................................................................VI
1
EINLEITUNG.......................................................................................................1
1.1
ANATOMIE....................................................................................................
1
1.2
PHYSIOLOGIE.................................................................................................2
1.3
SCHWERHOERIGKEIT..........................................................................................3
1.3.1
FORMEN...................................................................................................
3
1.3.2
URSACHEN................................................................................................4
1.3.3 VORKOMMEN UND
HAEUFIGKEIT...................................................................4
1.4 THERAPIEMOEGLICHKEIT BEI SCHWERHOERIGKEIT
..................................................
5
1.4.1
UEBERSICHT................................................................................................5
1.4.2
COCHLEA-IMPLANTAT..................................................................................6
1.5 STAMMZELLFORSCHUNG
..................................................................................
7
1.5.1 STAMMZELLEN
ALLGEMEIN..........................................................................
7
1.5.2 ADULTE NEURALE STAMMZELLEN
.................................................................
8
1.5.3 NEURALE STAMMZELLEN DES SPIRALGANGLIONS
.........................................
11
1.6 ZIEL DER
ARBEIT...........................................................................................14
2 MATERIAL UND
METHODE................................................................................16
2.1
TIERE..........................................................................................................16
2.1.1 MAUSHALTUNG
........................................................................................
16
2.1.2
MAUSZUCHT............................................................................................16
2.1.3 RECHTLICHER
RAHMEN.............................................................................17
2.2 ISOLIERUNG DER STAMMZELLEN DES SPIRALGANGLIONS
.....................................
18
2.2.1 MIKRODISSEKTION DES
SPIRALGANGLIONS..................................................18
2.2.2 DISSOZIIERUNG DER
ZELLEN......................................................................
19
2.2.3
ZELLKULTUR...............................................................................................20
2.3 ISOLIERUNG DER STAMMZELLEN DER SUBVENTRIKULARZONE
.............................
21
2.3.1 MIKRODISSEKTION DER
SUBVENTRIKULARZONE............................................21
2.3.2 ZELLDISSOZIATION UND ZELLKULTUR DER SUBVENTRIKULARZONE
.....................
21
2.4 MIKROSKOPIE
.............................................................................................
22
2.4.1
LICHTMIKROSKOPIE...................................................................................
22
2.4.2
FLUORESZENZMIKROSKOPIE.....................................................................22
2.4.2.1 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG UND FLUORESZENZMIKROSKOPIE
ADHAERENTER
KULTUREN........................................................................22
2.4.2.2 IMMUNHISTOCHEMIE UND FLUORESZENZMIKROSKOPIE FLORIERENDER
ZELLEN UND
SPHAEREN.........................................................................24
2.4.2.3
ANTIKOERPER..........................................................................................
25
2.4.3
ELEKTRONENMIKROSKOPIE........................................................................26
2.4.3.1
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE..........................................................
26
2.4.3.2 T
RANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPIE.............................................27
2.4.4
ZEITRAFFERMIKROSKOPIE..........................................................................
28
2.5 PROPAGATION DER
SPHAEREN........................................................................28
2.6
ZELLZAEHLUNG..............................................................................................
29
2.6.1 ZELLZAEHLUNG MIT
ZAEHLKAMMER...............................................................29
2.6.2 ZELLZAEHLUNG IMMUNHISTOCHEMISCH GEFAERBTER
ZELLEN...........................29
2.7 EVALUATION DES NEUROSPHAEREN-ASSAYS
..................................................
29
2.6 ZELLZAHL-, GROESSEN- UND VOLUMENBESTIMMUNG DER SPHAEREN
..................
30
2.9 NEUROSPHAEREN-ASSAY MIT TRANSGENEN
TIEREN.........................................31
2.9.1 KLONALITAET IN ABHAENGIGKEIT DER ZELLDICHTE UND
KULTIVIERUNGSDAUER....31
2.9.2 KLONALITAET IN ABHAENGIGKEIT VON ZELLDICHTE UND BEWEGUNG
.................
31
2.10
AGAROSE-ASSAY.........................................................................................
32
2.11
KOLLAGEN-ASSAY.........................................................................................
33
2.12
EINZELZELL-ASSAY.......................................................................................33
2.13
DIFFERENZIERUNG........................................................................................34
2.14 CRYOSCHNITTE DER COCHLEA UND DEREN IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG 35
2.15
STATISTIK.....................................................................................................36
2.16
BILDBEARBEITUNG........................................................................................36
3
ERGEBNISSE............................................................................................
37
3.1 MORPHOLOGIE VON STAMM- UND VORLAEUFERZELLEN DES SPIRALGANGLIONS
UND DEREN SPHAEREN
.................................................................................
37
3.1.1 LICHTMIKROSKOPISCHE MORPHOLOGIE
.....................................................
37
3.1.2 ULTRASTRUKTURELLE UNTERSUCHUNG DER SPHAEREN
....................................
39
3.2 PROLIFERATION DER
SPHAEREN........................................................................41
3.2.1 EINFLUSS VON WACHSTUMSFAKTOREN AUF DIE SPHAERENBILDUNG
...............
41
3.2.2 WACHSTUMSVERLAUF DER
SPHAERENBILDUNG.............................................43
3.3 PROLIFERATION UND NESTINEXPRESSION DER SPHAEREN
..................................
46
3.4 NACHWEIS DER
KLONALITAET..........................................................................46
3.4.1 NACHWEISE DER KLONALITAET MITTELS TRANSGENER TIERE
............................
46
3.4.2 AGGREGATION VON NEUROSPHAEREN IN ABHAENGIGKEIT VERSCHIEDENER
PARAMETER.............................................................................................51
3.4.3 KLONALES WACHSTUM VON SPHAEREN IN SEMISOLIDEN MEDIEN
...............
56
3.4.4 KLONALES WACHSTUM VON SPHAEREN AUS
EINZELZELLEN..........................57
3.5 DIFFERENZIERUNG DER SPHAEREN DES SPIRALGANGLIONS
...............................
58
3.5.1 MORPHOLOGIE DIFFERENZIERTER ZELLEN AUS SPHAEREN DES
SPIRALGANGLIONS....................................................................................
58
3.5.2 TUJ UND MAP2 ALS NEURONALE
MARKER................................................60
3.5.3 DIFFERENZIERUNG VON SPHAEREN IN REIFE ZELLTYPEN
.................................
61
4
DISKUSSION.................................................................................................
65
4.1 ISOLIERUNG VON STAMMZELLEN DES SPIRALGANGLIONS
.................................
65
4.2 CHARAKTERISIERUNG VON STAMMZELLEN UND SPHAEREN DES
SPIRALGANGLIONS........................................................................................
66
4.2.1 MORPHOLOGISCHE ANALOGIE ZU SPHAEREN DES
GEHIRNS..........................66
4.2.2 AUFBAU UND ULTRASTRUKTURELLE MORPHOLOGIE DER
SPHAERENZELLEN.........67
4.2.3 PROLIFERATIONSAKTIVITAET DER SPHAERENZELLEN
..........................................
69
4.2.4 WIRKUNG VON WACHSTUMSFAKTOREN AUF SPHAERENBILDENDE
STAMMZELLEN........................................................................................
70
4.2.5 SELBSTERNEUERUNG VON
STAMMZELLEN..................................................71
4.2.5.1 PROPAGATION VON
SPHAEREN...................................................................71
4.2.5 2 MARKEREXPRESSION VON STAMMZELLEN
.............................................
73
4.2.6 KLONALITAET IN VERSCHIEDENEN
ASSAYS....................................................75
4.2.7 MULTIPOTENZ VON STAMMZELLEN
............................................................
79
4.3
AUSBLICK.............................................................................................82
5
ZUSAMMENFASSUNG....................................................................................85
6
SUMMARY.....................................................................................................
86
7
ERKLAERUNG.....................................................................................................
87
8 PUBLIKATIONEN
......................
88
9
DANKSAGUNG................................................................................................90
10
LITERATURVERZEICHNIS...................................................................................91
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