Kokultur von mesenchymalen Stammzellen aus humanem Fettgewebe und mikrovaskulären Endothelzellen: ausgewählte Aspekte in einem 3D Sphäroid-Modell = Coculture of Adipose Derived Stem Cells and Microvascular Endothelial Cells : Aspects in a 3D Spheroid-Model
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Würzburg
August 2014
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adam_text | AUS DER KLINIK UND POLIKLINIK FUER UNFALL-, HAND*
PLASTISCHE UND WIEDERHERSTELLUNGSCHIRURGIE
DER UNIVERSITAET WUERZBURG
DIREKTOR: PROF. DR. MED. R. MESSEST
K O K U LTU R V O N M E SE N C H Y M A LE N S TA M M Z E LLE N A U S
H U M A N E M F E TTG E W E B E U N D M IK RO V A SK U LAE REN
E N D O TH E LZ E LLE N
A U S G E W AE H LTE A S P E K TE IN E IN E M
3D S P H AE R O ID -M O D E LL
INAUGURAL - DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DER DOKTORWUERDE DER
MEDIZINSCHEN FAKULTAET
DER
JULIUS-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET W UEZBURG
VORGELEGT VON
MARKUS NESTMEYER
AUS NUERTINGEN
WUERZBURG, AUGUST 2014
INHALTSVERZEICHNIS
1 E IN LE ITU N G
....................................................................................
1
1.1 WEISSES FETTGEWEBE IN DER
FORSCHUNG....................................................... 2
1.2 FETTGEWEBE UND SEINE FUNKTION
..............................................................
3
1.3 ADIPOZYTARE ENTWICKLUNG UND D IFFERENZIERUNG
.....................................
5
1.4 GEFAESSENTWICKLUNG IM WEISSEN F E TTG E W E B E
..............................................
7
1.5 IN VITRO K
ULTIVIERUNG.................................................................................
8
1.6 *-DIMENSIONALE KOKULTIVIERUNG VON ASC UND MVEC .......... 10
1.7 FRAKTIONIERUNG VON ZELLGEMISCHEN MITTELS M A CS
..................................
12
2 F RAGESTELLU N
G................................................................................
13
3 M ATERIAL UND M E TH O D EN
............................................................16
3.1 M A TE RIA
L......................................................................................................
17
3.2 M E TH O D E N
.......................................................................................................
21
4 ERGEBNISSE .
. . . * .
. .
. .
* . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
28
4.1 KOKULTIVIERUNG VON ASC UND M V E C
.........................................................29
4.2 ZELLFRAKTIONIERUNG MITTELS MACS
...............................................................32
4.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG VON AKTIVEM SS-CATENIN
IN
ASC-MVEC-KOKULTUR-SPHAEROIDEN.........................................................42
5 D ISK U SSIO N
......................................................................................45
5.1 HERSTELLUNG UND DURCHFUEHRUNG 2- UND *-DIMENSIONALER KULTUREN . . .
46
5.2 ZELLFRAKTIONIERUNG MITTELS MACS
.............................................................. 47
5.3 GENEXPRESSIONSANALYSE
.
.................................................................................
51
5.4 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG AUF AKTIVES SS-CAEENM ......... 55
5.5
ABSCHLUSSBETRACHTUNG..............................................................................
59
6 Z U SAM M EN FASSU N
G......................................................................
60
7 LITERATUR- U. A B
BILDUNGSVERZEICHNIS....................................63
7.1
LITERATURVERZEICHNIS.................................................................................
64
7.2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS
..................................................................................73
8 A N H A N G
...........................................................................................74
LISTE DER VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN......................................................... 75
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF
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