Untersuchung der Regenerationsfähigkeit der Niere mittels transgener Mausmodelle:
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Aachen
Apprimus Verlag
2015
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS V
ZUSAMMENFASSUNG IX
1 EINLEITUNG 1
1.1 AUFBAU, FUNKTION UND ENTWICKLUNG DER NIERE 1
1.1.1 AUFBAU UND FUNKTION DER NIERE UND DES NEPHRONS 1
1.1.2 ENTWICKLUNG DER NIERE UND DES NEPHRONS 8
1.2 SCHAEDIGUNGEN DER NIERE UND IHRE THERAPIEMOEGLICHKEITEN 9
1.2.1 SCHAEDIGUNGEN DES (PROXIMALEN) TUBULUS- AKUTE UND CHRONISCH
NIERENSCHAEDIGUNG 9
1.2.2 GLOMERULAERE ERKRANKUNGEN 12
1.3 REGENERATION 17
1.3.1 MECHANISMEN DER REGENERATION VERSCHIEDENER ORGANEPITHELIEN 17
1.3.2 REGENERATION RENALER EPITHELIEN 18
1.4 ZIELSETZUNG DER DISSERTATION 22
2 MATERIAL UND METHODEN 23
2.1 MATERIALIEN 23
2.1.1 VERWENDETE LABORGERAETE 23
2.1.2 VERWENDETE SOFTWARE 24
2.1.3 VERWENDETE VERBRAUCHSMATERIALIEN 24
2.1.4 VERWENDETE CHEMIKALIEN 25
2.1.5 PRIMER FUER GENOTYPISIERUNGS-POLYMERASEKETTENREAKTIONEN 27
2.2 VERWENDETE PUFFER UND LOESUNGEN 28
2.2.1 VERWENDETE PUFFER 28
2.2.2 VERWENDETE PERFUSIONS-, POSTFIXIERUNGS- UND FAERBELOESUNGEN 29
2.2.3 VERWENDETE PRIMAERE UND SEKUNDAERE ANTIKOERPER 30
2.3 TIERVERSUCHE 32
2.3.1 HALTUNG DER VERSUCHSTIERE 32
2.3.2 VERWENDETE TIERMODELLE 32
2.3.3 GENOTYPISIERUNG TRANSGENER MAEUSE 34
2.3.4 DOXYZYKLIN-GABE 38
2.3.5 ANAESTHESIE 39
2.3.6 CHIRURGISCHE METHODEN 39
2.3.7 NACHSORGE 42
2.3.8 GABE VON BROMDESOXYURIDIN (BRDU) 42
2.3.9 BEHANDLUNG DER MWF-RATTEN 43
I
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INHALTSVERZEICHNIS
2.3.10 BLUTDRUCKMESSUNG BEI RATTEN 43
2.3.11 URINGEWINNUNG 44
2.3.12 BLUTABNAHME 44
2.3.13 TOETUNG DER TIERE 44
2.3.14 ISOLATION VON KORTIKALEN MAUSNIERENZELLEN 45
2.3.15 ASSERVIERUNG VON GEWEBE 46
2.4 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 47
2.4.1 ANFERTIGUNG VON GEWEBESCHNITTEN 47
2.4.2 FAERBUNG VON GEWEBESCHNITTEN UND ZELLEN 47
2.5 MIKROSKOPIE 52
2.5.1 EVALUIERUNG DER SS-GALAKTOSIDASE FAERBUNG IN KORTIKALEN TUBULI 52
2.5.2 EVALUIERUNG DER SS-GALAKTOSIDASE FAERTUNG IN GLOMERULI 53
2.5.3 EVALUIERUNG EGFP SOWIE BRDU POSITIVER ZELLEN IN TUBULI 53
2.5.4 EVALUIERUNG EGFP SOWIE BRDU POSITIVER ZELLEN IN GLOMERULI 53
2.5.5 EVALUIERUNG DER GLOMEMLAEREN HYPERTROPHIE UND RELATIVEN
PODOZYTOPENIE 54
2.5.6 EVALUIERUNG DER GLOMERULAEREN SKLEROSE IN MWF-RATTEN 54
2.5.7 EVALUIERUNG DER BETEILIGUNG VON PARIETALZELLEN AN DER GLOMERULAEREN
SKLEROSE IN MWF-RATTEN 55
2.6 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN 56
3 ERGEBNISSE 57
3.1 DIE REGENERATION DES PROXIMALEN TUBULUS NACH AKUTER SCHAEDIGUNG 57
3.1.1 ULTRASTRUKTURELLE UNTERSUCHUNG EINZELNER, VERTEILTER TUBULUSZELLEN
57
3.1.2 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER MARKIERTEN TUBULUSZELLEN IN
VERSCHIEDENEN SCHAEDIGUNGSMODELLEN 60
3.1.3 UNTERSUCHUNG DES PROLIFERATIVEN VERHALTENS GENETISCH MARKIERTER
TUBULUSZELLEN 65
3.1.4 ANALYSE DER EXPRESSION VERSCHIEDENER MARKER IN MARKIERTEN
TUBULUSZELLEN NACH AKUTER SCHAEDIGUNG 75
3.1.5 UNTERSUCHUNG DER BETEILIGUNG MARKIERTER ZELLEN AN DER REGENERATION
87
3.2 DAS REGENERATIVE POTENTIAL PARIETALER EPITHELZELLEN 90
3.2.1 VERFOLGUNG GENETISCH MARKIERTER PARIETALZELLEN IM ADULTEN
ORGANISMUS 90
3.2.2 VERFOLGUNG GENETISCH MARKIERTER EPITHELZELLEN WAEHREND DER SPAETEN
RENALEN ENTWICKLUNG 97
3.2.3 ANALYSE DER MIGRATION VON VORLAEUFERZELLEN AUF DAS KAPILLARGEFLECHT
WAEHREND DER SPAETEN RENALEN ENTWICKLUNG IN HUMANEN NIEREN 103
3.3 EGFR INHIBITION ZUR BEHANDLUNG DER FOKAL SEGMENTALEN
GLOMERULOSKLEROSE IN VIVO 107
3.3.1 KURZZEIT-BEHANDLUNG VON MWF-RATTEN MIT HOCH DOSIERTEM ERLOTINIB
107
3.3.2 LANGZEIT-BEHANDLUNG VON MWF-RATTEN 110
4 DISKUSSION 123
4.1 DIE REGENERATION DES PROXIMALEN TUBULUS NACH AKUTER SCHAEDIGUNG 123
II
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.1 DIE PEC-RTTA MAUS MARKIERT EINZELNE, VERTEILTE TUBULUSZELLEN
SPEZIFISCH 123
4.1.2 EINZELNE, VERTEILTE TUBULUSZELLEN STELLEN KEINE PROGENITOREN DAR
125
4.1.3 MECHANISTISCHE FUNKTIONEN DER STC MARKER UND DEREN MOEGLICHE
THERAPEUTISCHEN EINFLUESSE 128
4.2 DAS REGENERATIVE POTENTIAL PARIETALER EPITHELZELLEN 133
4.2.1 PARIETALE EPITHELZELLEN ERSETZEN KEINE VERLORENEN PODOZYTEN IM
ADULTEN
ORGANISMUS 133
4.2.2 EXISTENZ EINER PODOZYTENRESERVE AUF DER BOWMANSCHEN KAPSEL WAEHREND
DER SPAETEN RENALEN ENTWICKLUNG 135
4.2.3 DIE PLASTIZITAET DER GLOMERULAEREN EPITHELZELLEN UND IHRE ROLLE
WAEHREND DER
ENTWICKLUNG UND IM KRANKHEITSPROZESS 136
4.3 EGFR INHIBITION ZUR BEHANDLUNG DER FOKAL SEGMENTALEN
GLOMERULOSKLEROSE IN VIVO 140
4.3.1 ERIOTINIB BEHANDLUNG ZEIGT LEDIGLICH IN NIEDRIGER DOSIERUNG EINEN
EFFEKT 141
4.3.2 EGFR-INHIBITION OHNE EINFLUSS AUF AKTIVITAET DER PARIETALZELLEN -
MOEGLICHE
KONSEQUENZEN FUER DIE THERAPIE DER FSGS 143
4.4 KONTROVERSE THERAPIEMOEGLICHKEITEN - UNTERSTUETZUNG DER STC NEGATIV
FUER GLOMERULAERE ERKRANKUNGEN UND UMGEKEHRT 146
5 LITERATURVERZEICHNIS 149
6 DANKSAGUNG 165
7 LEBENSLAUF 167
8 PUBLIKATIONEN 169
9 KONGRESSBEITRAEGE 171
III
|
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