Messung des neurotoxischen Potentials und der Organverteilung Makrozyklischer Laktone in mdr1-defizienten Mäusen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2015
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| Ausgabe: | 1. Auflage |
| Schriftenreihe: | Edition scientifique
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| Beschreibung: | VII, 110 Seiten Illustrationen, Diagramme |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS DER ABBILDUNGEN
IV
VERZEICHNIS DER TABELLEN
IV
ABKUERZUNGEN
V
1.
EINLEITUNG 1
1.1.
DERMU/T/TFRUG-TRANSPORTER P-GLYCOPROTEIN 1
1.1.1.
DIE BLUT-HIRN-SCHRANKE 1
1.1.2.
DIE PROTEINFAMILIE DER ABC-TRANSPORTER 2
1.1.3.
DIE ENTDECKUNG DES P-GLYCOPROTEINS 3
1.1.4.
VORKOMMEN DES P-GLYCOPROTEINS 4
1.1.5.
DIE MDRL'
/
'-MAUS 4
1.2.
DER MDR1-DEFEKT DES HUNDES 6
1.2.1.
DER IVERMECTIN-SENSITIVE COLLIE 6
1.2.2.
DIE ENTDECKUNG DES MDRL-DEFEKTS 8
1.2.3.
RASSENVERTEILUNG 11
1.3.
ANTIPARASITAER WIRKSAME MAKROZYKLISCHE LAKTONE (ML) 13
1.4.
DER GABA
A
-REZEPTOR 14
1.5.
ZIEL DIESER ARBEIT 16
2.
VERSUCHSTIERE 17
3.
MATERIAL 20
3.1.
APPLIKATIONSLOESUNGEN FUER IN VIVO VERSUCHE 20
3.1.1.
APPLIKATIONSLOESUNG FUER DIE ORALE APPLIKATION MIT [
3
H]LVERMECTIN,
[
3
H]MOXIDECTIN UND [
3
H]MILBEMYCINOXIM
S
20
3.1.2.
APPLIKATIONSLOESUNG FUER DIE SPOT-ON APPLIKATION MIT [
3
H]MOXIDECTIN 21
3.1.3.
APPLIKATIONSLOESUNG FUER DIE DOSISFINDUNGSSTUDIEN AM ROTAROD MIT
IVERMECTIN, SELAMECTIN,
MOXIDECTIN UND MILBEMYCINOXIM 21
3.1.4.
APPLIKATIONSLOESUNG FUER DIE ANTAGONISIERUNGSVERSUCHE MIT IVERMECTIN UND
SELAMECTIN
22
3.2.
MATERIALIEN FUER DIE GENOTYPISIERUNG DER CF-1 MAUSLINIE 23
3.2.1.
PRIMER 23
3.2.2.
HITZEBESTAENDIGE DNA-POLYMERASEN 24
3.2.3.
LAENGENSTANDARDS 24
3.2.4.
AGAROSE GELELEKTROPHORESE 25
I
HTTP://D-NB.INFO/1069552003
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.5.
PUFFER UND MEDIEN 26
3.2.6.
KOMMERZIELLE KITS UND SONSTIGE MATERIALIEN 26
3.3.
CHEMIKALIEN 27
3.4.
RADIOAKTIV-MARKIERTE SUBSTANZEN 28
3.5.
GERAETE 29
3.6.
VERBRAUCHSMATERIALIEN 30
4.
METHODEN 31
4.1.
IN VIVO APPLIKATIONEN 31
4.1.1.
PER 05 APPLIKATION 31
4.1.2.
SPOT-ON APPLIKATION 31
4.1.3.
GEWINNUNG DER ORGAN-, BLUT- UND URINPROBEN 31
4.2.
GENOTYPISIERUNG DER CF-1 MAUSLINIE 32
4.2.1.
ISOLIERUNG VON DNA AUS GEWEBE 32
4.2.2.
ISOLIERUNG VON TOTAL-RNA AUS GEWEBE 32
4.2.3.
CDNA-SYNTHESE AUS TOTAL-RNA 33
4.2.4.
DENATURIERENDE AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 34
4.2.5.
PRIMERAUSWAHL UND LAGE DER PRIMER 34
4.2.6.
POLYMERASE-KETTENREAKTION 35
4.2.7.
NATIVE GELELEKTROPHORESE 37
4.2.8.
AUFREINIGUNG DER PCR-AMPLIFIKATE 38
4.2.9.
AUFREINIGUNG DER DNA-FRAGMENTE AUS AGAROSEGELEN 39
4.2.10.
SEQUENZIERUNG UND AUSWERTUNG 39
4.3.
ROTAROD-METHODE 40
5.
ERGEBNISSE 44
5.1.
GENOTYPISIERUNG DER CF-L-MAUSLINIE 44
5.2.
ORGANVERTEILUNG UND GEHIRNPENETRATION VON MAKROZYKLISCHEN LAKTONEN 46
5.2.1.
GEWEBE- UND GEHIRNKONZENTRATIONEN VON IVERMECTIN 47
5.2.2.
GEWEBE- UND GEHIRNKONZENTRATIONEN VON MOXIDECTIN 48
5.2.3.
GEWEBE- UND GEHIRNKONZENTRATIONEN VON MILBEMYCINOXIM 53
5.3.
ETABLIERUNG DER ROTAROD-METHODE 55
5.4.
DOSISFINDUNGSSTUDIEN MIT HILFE DES ROTARODS 57
5.4.1.
APPLIKATION DES LOESUNGSMITTELS 57
II
INHALTSVERZEICHNIS
5.4.2.
IVERMECTIN 58
5.4.3.
MOXIDECTIN 59
5.4.4.
MILBEMYCINOXIM 61
5.4.5.
SELAMECTIN 62
5.4.6.
VERGLEICH DES NEUROTOXISCHEN POTENZIALS VON IVERMECTIN, MOXIDECTIN UND
MILBEMYCINOXIM 64
5.5.
VERSUCH DER ANTAGONISIERUNG DER NEUROTOXIZITAET VON IVERMECTIN DURCH
SELAMECTIN
66
6.
DISKUSSION 69
6.1.
DIE MDRL-KNOCKOUT MAUS IM TIERVERSUCH 69
6.2.
VERGLEICHENDE NEUROTOXIZITAET VON MAKROZYKLISCHEN LAKTONEN IM
MDRL-KNOCKOUT
MAUSMODELL 70
6.2.1.
UNTERSCHIEDLICHE NEUROTOXIZITAET DER MAKROZYKLISCHEN LAKTONE BEI MDR1
DEFEKTEN HUNDEN 70
6.2.2.
GEHIRNPERMEATION VON ML IN PGP-DEFIZIENTEN UND WILDTYP MAEUSEN 74
6.2.3.
MESSUNG DES NEUROTOXISCHEN POTENZIALS DER ML 79
6.3.
ANTAGONISIERUNG UND THERAPIE EINER ML INTOXIKATION 88
7.
ZUSAMMENFASSUNG 91
8.
SUMMARY 92
9.
LITERATURVERZEICHNIS 93
10.
DANKSAGUNGEN 108
11.
ERKLAERUNG 110
III |
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