Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors:
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
2015
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Physical Description: | IV, 226 S. Ill., graph. Darst. |
Staff View
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV043002684 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 005 | 00000000000000.0 | ||
| 007 | t | ||
| 008 | 151112s2015 ad|| m||| 00||| ger d | ||
| 035 | |a (OCoLC)932600926 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV043002684 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 049 | |a DE-355 |a DE-83 | ||
| 082 | 0 | |a 573.84 |2 22//ger | |
| 100 | 1 | |a Stolz, Michaela |d 1985- |e Verfasser |0 (DE-588)1074439562 |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |c vorgelegt von Michaela Stolz |
| 264 | 1 | |c 2015 | |
| 300 | |a IV, 226 S. |b Ill., graph. Darst. | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 502 | |a Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 2015 | ||
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 856 | 4 | 2 | |m DNB Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=028427880&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 999 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-028427880 | ||
Record in the Search Index
| _version_ | 1804175343625437184 |
|---|---|
| adam_text | EINLEITUNG 1
1.1 LIGANDENGESTEUERTE IORTENKANAELE 1
| 1.2 ATP ALS NEUROTRANSMITTER 6
1.3 PURINERGE REZEPTOREN 6
1.3.1 P2X-REZEPTOREN 7
* 1.3.2 DER P2X7-REZEPTOR 13
1.3.2.1 TOPOLOGIE UND FUNKTIONEN DES P2X7-REZEPTORS 15
1.3.2.2 DER P2X7-REZEPTOR ALS INTERAKTIONSPARTNER 21
!
| 1.4 AMILORID-SENSITIVE IONENKANAELE: ASIC 23
I 1.5 KALZIUM-AKTIVIERTE CHLORIDKANAELE: ANOCTAMINE 26
. J ZIELSETZUNG 30
MATERIAL UND METHODEN 32
I
3.1 MATERIAL 32
| 3.1.1 CHEMIKALIEN 32
J 3.1.2 DETERGENZIEN 32
3.1.3 OLIGONUKLEOTIDE 32
3.1.4 ENZYME 32
3.1.5 WASSER 32
3.1.6 KITS 33
3.2 METHODEN 34
I 3.2.1 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 34
3.2.1.1 VERWENDETE PLASMIDE UND VEKTOREN 34
I
| 3.2.1.2 TRANSFORMATION UND PLASMID-ISOLATION 35
3.2.1.3 GERICHTETE MUTAGENESE 35
, 3.2.1.4 PCR-AMPLIFIKATION UND LIGATION ZUR SUBKLONIERUNG 37
3.2.1.5 GATEWAY@-KLONIERUNG 39
; 3.2.1.6 SEQUENZIERUNG 39
3.2.1.7 IN-VITRO-CRNA-SYNTHESE 40
3.2.2 XENOPUS LAEVIS-OOZYTEN UND AMBYSTOMA MEXICANUM-OOZYTEN ALS EXPRES
SIONSSYSTEM 40
HTTP://D-NB.INFO/1076627226
3.2.2.1 HERKUNFT UND HALTUNG DER TIERE 41
3.2.2.2 PRAEPARATION DES OVARS UND AUFREINIGUNG DER OOZYTEN 41
3.2.2.3 CRNA-INJEKTION ZUR PROTEINEXPRESSION 42
3.2.3 PROTEINCHEMISCHE METHODEN 43
3.2.3.1 METABOLISCHE MARKIERUNG DER PROTEINE MIT [
35
S]-METHIONIN ... 43
3.2.3.2 FLUORESZENZMARKIERUNG MEMBRANINTEGRIERTER PROTEINE 43
3.2.3.3 ATP-STIMULATION MEMBRANINTEGRIERTER REZEPTOREN 44
3.2.3.4 QUERVERNETZUNG MEMBRANINTEGRIERTER PROTEINE UNTER
VERWENDUNG CHEMISCHER CROSSLINKER 44
3.2.3.5 AUFREINIGUNG UND ISOLATION VON PROTEINEN 45
3.2.3.5.1 NICKEL-CHELAT-AFFINITAETSCHROMATOGRAFIE 45
3.2.3.5.2 STREP-TACTIN-AFFINITAETSCHROMATOGRAFIE 46
3.2.3.5.3 IMMUNPRAEZIPITATION 46
3.2.3.6 ENZYMATISCHE DEGLYKOSYLIERUNG VON PROTEINEN 47
3.2.4 POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE ZUR AUFTRENNUNG VON PROTEINEN 48
3.2.4.1 BLAU-NATIVE PAGE 48
3.2.4.2 REDUZIERENDE UND NICHT-REDUZIERENDE SDS-PAGE 49
3.2.5 DETEKTION DER AUFGEREINIGTEN PROTEINE 51
3.2.5.1 FLUORESZENZSCAN 51
3.2.5.2 PHOSPHORLMAGING 52
3.2.6 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE FUNKTIONSMESSUNG 53
3.2.7 STATISTISCHE DATENANALYSE 53
4 ERGEBNISSE 55
4.1 UNTERSUCHUNG MOLEKULARER GATING-BEWEGUNGEN INNERHALB DER ZWEITEN
TRANSMEM
BRANDOMAENE DES HP2X7-REZEPTORS 55
4.1.1 BIOCHEMISCHER NACHWEIS DER EXPRESSION DER TM2-CYSTEIN-MUTANTEN ...
55
4.1.2 ERMITTLUNG DER ZUGAENGLICHKEIT DER EINGEFUEGTEN CYSTEINE INNERHALB
DER
TM2 FUER EXTRAZELLULAER APPLIZIERTES MALEIMID 59
4.2 ANALYSE MOEGLICHER INTERAKTIONEN DES P2X7R MIT REZEPTOREN DER
P2X-FAMILIE . . 70
4.2.1 INTERAKTION VON P2X1- UND P2X7-REZEPTOREN 71
4.2.2 CHARAKTERISIERUNG DER INTERAKTION VON P2X4- UND P2X7-REZEPTOREN
... 76
4.2.2.1 SDS-PAGE-ANALYSE DER KO-EXPRIMIERTEN HP2X4R UND HP2X7R 77
4.2.2.2 BN-PAGE-ANALYSE DER KO-EXPRIMIERTEN HP2X4R UND HP2X7R
ZUR DIFFERENZIERUNG VON INTER- UND INTRA-SUBTYPISCHEN INTERAKTIONEN 86
4.3 IDENTIFIZIERUNG WEITERER PROTEINOGENER INTERAKTIONSPARTNER DES
P2X7-REZEPTORS 99
4.3.1 AMILORID-SENSITIVE IONENKANAELE: ASIC 99
4.3.1.1 SDS-PAGE-ANALYSE ZUM NACHWEIS DER EXPRESSION DER HASIC . 100
4.3.1.2 BN-PAGE-ANALYSE DER HASIC-SUBTYPEN ZUM BIOCHEMISCHEN
NACHWEIS DES OLIGOMERISIERUNGSZUSTANDS 109
4.3.1.3 SCREENING DER INTERAKTION ZWISCHEN VERSCHIEDENEN ASIC- UND
P2X-SUBTYPEN 116
4.3.2 KALZIUM-AKTIVIERTE CHLORID-KANAELE: ANOCTAMINE 133
4.3.2.1 P2X7R UND P2Y1R INTERAGIEREN FUNKTIONELL MIT ANOL 133
4.3.2.1.1 BIOCHEMISCHE ANALYSE EINER STABILEN PROTEIN-PROTEIN-
INTERAKTION VON 134
4.3.2.1.2 BIOCHEMISCHE ANALYSE EINER STABILEN PROTEIN-PROTEIN-
INTERAKTION VON 139
4.3.2.2 UNTERSUCHUNG DER INTERAKTION ZWISCHEN P2X7R UND ANO6 .... 143
4.4 CHARAKTERISIERUNG ESSENTIELL AN DER BINDUNG DES ANTI-HP2X7R- MAB
BETEILIGTER
AMINOSAEUREN DER EKTODOMAENE DES HP2X7R 153
5 DISKUSSION 161
5.1 CHARAKTERISIERUNG MOLEKULARER GATING-BEWEGUNGEN DES HP2X7-REZEPTORS
.... 161
5.2 NACHWEIS DER INTERAKTION VON P2X7R UND P2X1R 169
5.3 NACHWEIS DER BILDUNG HETEROTRIMERER HP2X4I/72-REZEPTOREN 170
5.4 NACHWEIS WEITERER INTERAKTIONSPARTNER DES HP2X7R 173
5.4.1 BIOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ASIC-SUBTYPEN 175
5.4.2 P2X7R INTERAGIERT MIT ASIC3 178
5.4.3 INTERAKTION VON P2-REZEPTOREN UND ANOCTAMINEN 181
5.4.3.1 P2X7R INTERAGIERT FUNKTIONELL MIT ANOCTAMIN 1 181
5.4.3.2 P2Y1R INTERAGIERT FUNKTIONELL MIT ANOCTAMIN 1 184
5.4.3.3 BIOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DES ANOCTAMIN 6 185
5.4.3.4 P2X7R INTERAGIERT NICHT MIT ANOCTAMIN 6 186
5.5 E115 UND 1214 DES HP2X7R SIND ESSENTIELL AN DER BINDUNG DES
ANTI-HP2X7R-MAB
BETEILIGT 187
6 ZUSAMMENFASSUNG 189
7 LITERATUR 190
8 ANHANG 214
8.1 VERWENDETE CDNA-KONSTRUKTE 214
8.2 REFERENZSEQUENZEN DER VERWENDETEN REZEPTORTYPEN 218
8.3 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 219
9 VEROEFFENTLICHUNGEN 222
10 EIGENSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 224
11 OANKSAGUNG 225
12 LEBENSLAUF 226
|
| any_adam_object | 1 |
| author | Stolz, Michaela 1985- |
| author_GND | (DE-588)1074439562 |
| author_facet | Stolz, Michaela 1985- |
| author_role | aut |
| author_sort | Stolz, Michaela 1985- |
| author_variant | m s ms |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV043002684 |
| ctrlnum | (OCoLC)932600926 (DE-599)BVBBV043002684 |
| dewey-full | 573.84 |
| dewey-hundreds | 500 - Natural sciences and mathematics |
| dewey-ones | 573 - Specific physiological systems in animals |
| dewey-raw | 573.84 |
| dewey-search | 573.84 |
| dewey-sort | 3573.84 |
| dewey-tens | 570 - Biology |
| discipline | Biologie |
| format | Thesis Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>01138nam a2200289 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV043002684</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="005">00000000000000.0</controlfield><controlfield tag="007">t</controlfield><controlfield tag="008">151112s2015 ad|| m||| 00||| ger d</controlfield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)932600926</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV043002684</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-355</subfield><subfield code="a">DE-83</subfield></datafield><datafield tag="082" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">573.84</subfield><subfield code="2">22//ger</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Stolz, Michaela</subfield><subfield code="d">1985-</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="0">(DE-588)1074439562</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors</subfield><subfield code="c">vorgelegt von Michaela Stolz</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">2015</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">IV, 226 S.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst.</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="502" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 2015</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">DNB Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=028427880&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="999" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-028427880</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV043002684 |
| illustrated | Illustrated |
| indexdate | 2024-07-10T07:14:47Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-028427880 |
| oclc_num | 932600926 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-355 DE-BY-UBR DE-83 |
| owner_facet | DE-355 DE-BY-UBR DE-83 |
| physical | IV, 226 S. Ill., graph. Darst. |
| publishDate | 2015 |
| publishDateSearch | 2015 |
| publishDateSort | 2015 |
| record_format | marc |
| spelling | Stolz, Michaela 1985- Verfasser (DE-588)1074439562 aut Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors vorgelegt von Michaela Stolz 2015 IV, 226 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 2015 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=028427880&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Stolz, Michaela 1985- Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |
| subject_GND | (DE-588)4113937-9 |
| title | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |
| title_auth | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |
| title_exact_search | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |
| title_full | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors vorgelegt von Michaela Stolz |
| title_fullStr | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors vorgelegt von Michaela Stolz |
| title_full_unstemmed | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors vorgelegt von Michaela Stolz |
| title_short | Identifizierung von molekularen Gating-Bewegungen und Interaktionspartnern des P2X7-Rezeptors |
| title_sort | identifizierung von molekularen gating bewegungen und interaktionspartnern des p2x7 rezeptors |
| topic_facet | Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=028427880&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT stolzmichaela identifizierungvonmolekularengatingbewegungenundinteraktionspartnerndesp2x7rezeptors |