Die Aufprägung und Vererbung der Zellpolarität: Analyse der Kernmigration anhand der Aufdeckung eines Kernkorbs aus Aktinfilamenten
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Wiesbaden
Springer Spektrum
2015
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Schriftenreihe: | BestMasters
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GELEITWORT V
DANKSAGUNG VII
INHALTSVERZEICHNIS : IX
ZUSAMMENFASSUNG XIII
ABSTRACT XV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XVTI
1 EINLEITUNG 1
1.1 VON POLARITAET IN PFLANZENGEWEBEN BIS ZUR ZELLPOLARITAET - DER
*KOMPASS , DEN JEDE ZELLE IN SICH TRAEGT 1
1.2 DIE DURCH AKTINFILAMENTE GESTEUERTE KERNWANDERUNG IST
ENTSCHEIDEND FUER DIE ZELLPOLARITAET 3
1.3 AKTIN - EIN HOCHKONSERVIERTES PROTEIN MIT VIELEN UNTERSCHIEDLICHEN
AUFGABEN 4
1.4 AUXINGRADIENTEN BESTIMMEN DIE ZELLPOLARITAET UND AUSBILDUNG
SPEZIFISCHER MUSTER 7
1.5 FRAGESTELLUNG DER MASTERARBEIT 9
1.6 DIE TRANSGENE BY-2 LIFEACFC.PSRFP ZELLLINIE ZUR BEOBACHTUNG DES
PERINUKLEAEREN AKTINNETZWERKS WAEHREND DER KERNWANDERUNG 10
2 MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 ZELLKULTUR 15
2.2 T RANSFORMATION 15
2.2.1 ELEKTROPORATION 16
2.2.2 KULTIVIERUNG 16
2.2.2.1 KULTIVIERUNG DER TRANSFORMIERTEN AGROBAKTERIEN 16
2.2.2.2 KULTIVIERUNG DER TABAKZELLEN 17
2.2.3 KOKULTIVIERUNG, SELEKTION UND ETABLIERUNG DER TRANSGENEN
SUSPENSIONSKULTUR 17
2.3 MANIPULATION DES NUCLEAR BASKETS ANHAND VON
HEMMSTOFFEXPERIMENTEN...19
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X
INHALTSVERZEICHNIS
2.4 KATEGORISIERUNG DER LOKALISATION DES MARKIERTEN PERINUKLEAEREN
AKTINNETZWERKS UND ANALYSE DER KERNPOSITION 20
2.4.1 ERMITTLUNG DER SIGNALPOSITION 20
2.4.2 ERMITTLUNG DER KERNPOSITION 22
2.5 MIKROSKOPIE UND BILDANALYSE 23
2.5.1 MIKROSKOPE 23
2.5.2 LANGZEITSTUDIEN 24
3 ERGEBNISSE 26
3.1 BESCHREIBUNG DER TRANSGENEN LINIE 27
3.1.1 DIE LAGE DES PERINUKLEAEREN AKTINNETZWERKS KANN IN VIER KATEGORIEN
EINGEORDNET WERDEN 28
3.1.2 IN DER EXPONENTIELLEN PHASE BEFINDET SICH DAS MARKIERTE
PERINUKLEAERE
AKTINNETZWERK RUND UM DEN ZELLKERN, DANACH WIRD ES MIT DER
ZELLWAND VERANKERT 30
3.1.3 NACH DER EXPONENTIELLEN PHASE BEFINDEN SICH DIE ZELLKERNE
VERMEHRT IN LATERALER POSITION 32
3.1.4 LANGZEITAUFNAHMEN DECKEN DIE REORIENTIERUNG DER PERINUKLEAEREN
AKTINFILAMENTE WAEHREND DER ZELLTEILUNG AUF 35
3.2 MANIPULATION DES NUCLEAR BASKETS 39
3.2.1 HEMMSTOFFGRUPPE 1| AUXINE UND PHYTOTROPINE 40
3.2.2 HEMMSTOFFGRUPPE 2| HEMMSTOFFE DER AKTINDYNAMIK 47
3.2.3 HEMMSTOFFGRUPPE 3| DIE MYOSININHIBITOREN 53
3.2.4 DIE ZUGABE VON ZELLTEILUNGSHEMMSTOFFEN, NIEDRIG KONZENTRIERTEN
MIKROTUBULIHEMMSTOFFEN ALS AUCH WEITEREN HEMMSTOFFEN DER
AKTINDYNAMIK ERZEUGEN GERINGE EFFEKTE
AUF DIE KERNBEWEGUNG 59
3.3 ZUSAMMENFASSUNG 60
4 DISKUSSION 63
4.1 BESCHREIBUNG DES NUCLEAR BASKETS 63
4.1.1 LIFEACT::PSRFP MARKIERT EINE
PERINUKLEAERE AKTINPOPULATION, DIE EIN
NUCLEAR BASKET FORMT 63
4.1.2 DAS NUCLEAR BASKET IST ALS RAEUMLICHES *GEDAECHTNIS FUER DIE PRAE-
UND
POSTMITOTISCHE POSITIONIERUNG DES NUKLEUS NOTWENDIG 64
4.1.3 DAS NUCLEAR BASKET ALS *POLARITAETSSPEICHER DER ZELLE? 65
4.1.4 DAS NUCLEAR BASKET KOENNTE IN PFLANZENZELLEN DIE FUNKTION DER
TIERISCHEN LAMINA ALS STABILISIERENDE STUETZSTRUKTUR DES ZELLKERNS
UEBERNEHMEN 67
4.2 MANIPULATION DES NUCLEAR BASKETS 68
INHALTSVERZEICHNIS XI
4.2.1 EINE VERZOEGERTE KERNMIGRATION AUS DEM ZELLZENTRUM KOENNTE ZU
EINER ERHOEHTEN ZELLTEILUNG FUEHREN 69
4.2.2 EIN MODELL ZUM EFFEKT VON PHALLOIDIN UND MYOSINIRIHIBITOREN AUF
DIE KERNMIGRATION 72
4.2.3 BDM UND BLEBBISTATIN WIRKEN BEZUEGLICH DER KERNBEWEGUNG AUF
UNTERSCHIEDLICHE MYOSINKLASSEN 76
4.3 ZUSAMMENFASSUNG 78
4.4 AUSBLICK 80
4.4.1 BIOCHEMISCHER ANSATZ 80
4.4.2 ZELLBIOLOGISCHER ANSATZ 80
5 LITERATURVERZEICHNIS 83
6 ANHANG 89
6.1 SEQUENZ UND VEKTOR DES LIFEACT::PSRFP KONSTRUKTS 89
6.2 WEITERE HEMMSTOFFE 91
6.3 ABBILDUNGS- UND TABELLENVERZEICHNIS 96
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