Anaerobes Wachstum von Corynebacterium glutamicum durch gemischte Säurefermentation:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Jülich
Forschungszentrum Jülich, Zentralbibliothek, Verl.
2015
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Schriftenreihe: | Schriften des Forschungszentrums Jülich
Reihe Gesundheit ; 77 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1. SUMMARY -9
2. ZUSAMMENFASSUNG -11
3. EINLEITUNG -13
3.1 ANAEROBER METABOLISMUS UND ANAEROBE PRODUKTION VON C. GLUTAMICUM -14
3.2 ATMUNGSKETTE UND ANAEROBE ATMUNG VON C. GLUTAMICUM -16
3.3 ZIEL DER ARBEIT -19
4. MATERIAL UND METHODEN - 20
4.1 PUFFERLOESUNGEN UND ANDERE STAMMLOESUNGEN - 20
4.2 NAEHRMEDIEN -20
4.3 OLIGONUKLEOTIDE UND PLASMIDE - 21
4.4 BAKTERIENSTAEMME -22
4.5 STAMMHALTUNG VON BAKTERIENSTAEMMEN - 23
4.6 KULTIVIERUNG VON C. GLUTAMICUM - 23
4.6.1 KULTIVIERUNG UNTER AEROBEN BEDINGUNGEN IN SCHUETTELKOLBEN - 23
4.6.2 KULTIVIERUNG UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN AUF AGARPLATTEN - 24
4.6.3 KULTIVIERUNG UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN IN SERUMFLASCHEN - 24
4.6.4 KULTIVIERUNG UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN IM BIOREAKTOR - 24
4.7 KULTIVIERUNG VON E. COLI -25
4.8 BESTIMMUNG DES WACHSTUMS VON BAKTERIEN - 25
4.9 BESTIMMUNG DER BIOTROCKENMASSE - 26
4.10 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN - 26
4.10.1 ISOLIERUNG VON GENOMISCHER DNA - 26
4.10.2 ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA - 27
4.10.3 DNA BZW. RNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG - 27
4.10.4 DNA-AGAROSE-GELELEKTROPHORESE - 27
4.10.5 RESTRIKTIONSVERDAU -28
4.10.6 LIGATION -28
4.10.7 POLYMERASEKETTENREAKTION - 28
4.10.8 PCR-PURIFICATION-KIT -29
4.10.9 DNA-SEQUENZANALYSE -29
4.10.10 HERSTELLUNG UND TRANSFORMATION KOMPETENTER E. COLI-ZELLEN - 29
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4.10.11 HERSTELLUNG UND TRANSFORMATION KOMPETENTER C. GLUTAMICUM-LEHEN
-30 -
4.11 PROTEINBIOCHEMISCHE METHODEN - 31 -
4.11.1 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD : - 31 -
4.11.2 PRAEPARATION VON ZELLMEMBRANEN -31 -
4.11.3 FJFO-ATP-SYNTHASE-AKTIVITAETSMESSUNG - 32 -
4.12 GENEXPRESSIONSANALYSEN MITTELS DNA-MICROARRAYS - 32 -
4.12.1 ISOLIERUNG VON RNA -32-
4.12.2 SYNTHESE FLUORESZENZMARKIERTER CDNA-SONDEN - 33 -
4.12.3 DNA-CHIP-HYBRIDISIERUNG - 34 -
4.12.4 BESTIMMUNG DER FLUORESZENZ VON DNA-CHIPS - 35 -
4.12.5 AUSWERTUNG DER DNA-MICROARRAY-EXPERIMENTE - 35 -
4.13 HPLC-METHODEN -36-
4.13.1 BESTIMMUNG VON EXTRAZELLULAERER GLUCOSE UND ORGANISCHEN SAEUREN
MITTELS HPLC - 36 -
4.13.2 BESTIMMUNG VON AMINOSAEUREN MITTELS HPLC - 37 -
4.14 INTRAZELLULAERE PH-BESTIMMUNG - 37 -
4.15 MIKROSKOPISCHE METHODEN -40-
4.16 ZELLGROESSENANALYSE -40-
5 ERGEBNISSE - 41 -
5.1 ANAEROBE VERSTOFFWECHSLUNG UND ANAEROBES WACHSTUM VON C. GLUTAMICUM
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN C-QUELLEN - 41 -
5.2 CO-VERSTOFFWECHSELUNG VON GLUCONAT UND PYRUVAT VON C. GLUTAMICUM
UNTER ANAEROBEN
BEDINGUNGEN - 43 -
5.3 EINFLUSS VON MEDIENZUSAETZEN AUF DAS ANAEROBE WACHSTUM MIT GLUCOSE
-46 -
5.4 EINFLUSS DER HAEMOXYGENASE AUF DAS ANAEROBE WACHSTUM VON C.
GLUTAMICUM - 59 -
5.5 EINFLUSS DER FIFO-ATP-SYNTHASE AUF DAS ANAEROBE WACHSTUM VON C.
GLUTAMICUM .- 61 -
5.6 BESTIMMUNG DES PH-TOLERANZBEREICHS UND UNTERSUCHUNG DER
PH-HOMOEOSTASE VON
ANAEROB KULTIVIERTEN C. GLUTAMICUM-LEUEN - 63 -
5.7 ABHAENGIGKEIT DER FETTSAEURE- UND MYCOLSAEUREBIOSYNTHESE UND DER
ANAPLEROTISCHEN
REAKTIONEN VON KOHLENSTOFFDIOXID IN ANAEROBEN C. GLUTAMICUM-ZELLEN - 68
-
5.8 UNTERSUCHUNG DER ANAEROBEN WACHSTUMSINHIBIERUNG - 70 -
5.8.1 UNTERSUCHUNG DES WACHSTUMSVERHALTENS VON C. GLUTAMICUM WILDTYP BEI
EINEM
WECHSEL VON ANAEROBEN ZU AEROBEN BEDINGUNGEN - 71 -
5.8.2 WACHSTUMSUNTERSUCHUNG IN SERUMFLASCHEN MIT ZELLFREIEM
MEDIUMSUEBERSTAND VON
ANAEROB GEWACHSENEN BIOREAKTORKULTUREN - 72 -
5.8.3 EINFLUSS DER GAERPRODUKTE AUF DAS ANAEROBE WACHSTUM - 74 -
5.8.4 KULTIVIERUNG VON C. GLUTAMICUM AACTA&PQOAPTA-ACKA - 75 -
5.8.5 FORTLAUFENDE UEBERIMPFUNG VON C. GLUTAMICUM IM BIOREAKTOR UND
BESTIMMUNG DER
ZELLGROESSE - 76 -
5.9 ZEITABHAENGIGES GENEXPRESSIONSPROFIL VON C. GLUTAMICUM WAEHREND DES
UEBERGANGS VON
AEROBEN ZU ANAEROBEN BEDINGUNGEN - 78 -
5.10 ANAEROBE PRODUKTION VON AMINOSAEUREN MIT C. GLUTAMICUM - 87 -
5.10.1 ANAEROBE PRODUKTION VON LYSIN MIT C. GLUTAMICUM - 87 -
5.10.2 ANAEROBE PRODUKTION VON LEUCIN UND VALIN MIT C. GLUTAMICUM - 88 -
6 DISKUSSION -89-
6.1 ANAEROBES WACHSTUM VON C. GLUTAMICUM - 89 -
6.2 PROTONENTRANSLOKATION UND DIE DAMIT VERBUNDENE PH-HOMOEOSTASE VON C.
GLUTAMICUM
UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN - 95 -
6.3 INHIBIERUNG DES WACHSTUM UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN -101 -
6.4 GENEXPRESSIONSPROFIL VON C. GLUTAMICUM UNTER ANAEROBEN BEDINGUNGEN
-104 -
6.5 AMINOSAEUREPRODUKTION MIT ANAEROBEN C. GLUTAMICUM-ZEUEN -107 -
LITERATURVERZEICHNIS -110 -
ANHANG : -117 - |
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